Page 45 - 《中国药房》2022年18期
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如鼻用糖皮质激素类药物及抗组胺药物等，但这些药物                           immunosorbent assay，ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为
          不仅治疗效果有限，而且还会导致患者鼻出血、体质量                           SEKRT-0132、SEKRT-0216、SEKRT-0365、SEKRT-0402）
          增加或心脏毒性等不良反应            [3―4] 。因此，寻找新的安全、          均购自北京索莱宝科技有限公司；兔源TNF-α、IL-2、IL-
          可靠、疗效佳的治疗药物迫在眉睫。有研究指出，AR主                          13、β-actin 抗体（批号分别为 13265S、12227S、06274S、
          要由外界的过敏性抗原进入鼻黏膜并与相应的免疫球                            4967S）均购自美国Cell Signaling Technology公司；辣根
                                               [5]
          蛋白 E（immunoglobulin E，IgE）结合而引起 ，其严重程              过氧化物酶标记羊抗兔免疫球蛋白 G（IgG）抗体（批号
                             [6]
          度与IgE水平呈正相关 。研究证实，当敏感机体鼻黏膜                         ZB-2512）购自北京中杉金桥生物技术有限公司；增强型
          接触到过敏原后，B 淋巴细胞会迅速合成 IgE，在 IgE 的                    BCA蛋白浓度测定试剂盒（批号P0013S）购自上海碧云
          介导下，肥大细胞脱颗粒释放出炎症介质，从而诱发过                           天生物技术有限公司；磷酸铝凝胶购自韩国保宁制药株
                                             [7]
          敏反应，因此 IgE 是 AR 发病的关键因素 。同时，外周                     式会社。
          血1型辅助性T细胞（type 1 helper T cells，Th1）和2型辅           1.3 动物
          助性 T 细胞（type 2 helper T cells，Th2）间的免疫失衡也              SPF级健康合格的SD大鼠72只，雌雄各半，体质量
          是 AR 发病的原因之一，即 Th1 和 Th2 细胞分泌的多种                   180～220 g，购自长沙市天勤生物技术有限公司，动物生
          细胞因子相互作用使得 Th1/Th2 平衡被打破，T 淋巴细                     产许可证号为SCXK（湘）2014-0011。
          胞分化失衡，进而导致大量炎症介质（如组胺）被释放，                          2 方法
          引发AR的各类症状        [8―9] 。                           2.1 模型的建立
              复方鱼鹅滴鼻剂是贵州中医药大学第二附属医院                              SD大鼠适应性喂养3 d后，随机取12只作为空白对
          研发的新型医院制剂，主要由鱼腥草、鹅不食草、冰片等                          照组，其余大鼠参照文献[15－16]采用卵清蛋白致敏法
          药物组成，具有清热解毒、除湿祛浊、芳香通窍等功效。                          复制AR模型：将卵清蛋白（0.4 mg/mL）与同体积磷酸铝
          前期药理学研究显示，复方鱼鹅滴鼻剂具有抗炎、抑菌、                          凝胶（4 mg/mL）混匀后，每只大鼠腹腔注射 1 mL（即每
          解热镇痛及抗过敏等药理作用              [10―12] ；临床研究表明，复       只大鼠腹腔注射0.2 mg卵清蛋白及2 mg磷酸铝凝胶）致
          方鱼鹅滴鼻剂对AR、急慢性鼻炎、鼻窦炎均具有显著疗                          敏，间隔1 d致敏1次，连续7次。从首次致敏后第15天
          效 [13―14] 。因此，本研究以复方鱼鹅滴鼻剂为干预药物，                    开始，以2％卵清蛋白溶液双侧滴鼻激发过敏反应，每鼻
          以卵清蛋白复制的 AR 模型大鼠为研究对象，观察模型                         孔50 μL，每日1次，连续7 d。空白对照组大鼠予以等量
          大鼠鼻黏膜组织病理学改变，并检测血清中IgE、白细胞                         无菌生理盐水处理。第 22 天末次鼻腔激发过敏后 30
          介素 2（interleukin-2，IL-2）、IL-13、肿瘤坏死因子 α（tu‐        min 内采用“量化叠加记分法”对大鼠鼻部症状进行评
          mor necrosis factor- α，TNF- α）水 平 及 鼻 黏 膜 组 织 中    分。按照表 1 的评分标准，综合评分≥6 分为成功
          TNF-α、IL-2、IL-13 蛋白表达水平，从 Th1/Th2 平衡的角             造模。
          度探讨该药对 AR 模型大鼠的改善作用，以期为厘清复                                   表1   AR大鼠鼻部症状评分标准
          方鱼鹅滴鼻剂治疗AR的作用机制和进一步研究开发提                            症状       轻度（1分）        中度（2分）        重度（3分）
          供理论依据。                                              擦鼻/次     1～4           5～9           ≥10
                                                              喷嚏/个     1～4           5～9           ≥10
          1 材料                                                鼻腔分泌物    少量鼻涕          流涕至鼻孔         鼻腔周围附着分泌物
          1.1  主要仪器                                           鼻腔炎症     鼻腔充血          鼻腔红肿          鼻腔红肿出血
              本研究所用主要仪器有HSZ-HS3型显微镜（重庆光                      2.2  分组及给药
          学仪器厂），VG3S025型振荡器[艾卡（广州）仪器设备有                          将造模成功的大鼠随机分为模型组、曲安奈德组
          限公司]，JY200C型电泳仪、JY-SCZ4+型垂直电泳槽（北                  （阳性对照，0.026 mg/kg）和复方鱼鹅滴鼻剂高、中、低剂
          京君意东方电泳设备有限公司），TGL-20M型离心机（长                       量组（134.4、67.2、33.6 mg/kg），另设空白对照组，每组12
          沙迈佳森仪器设备有限公司），MK3型全功能酶标仪（美                         只，雌雄各半。以上6组大鼠均滴鼻给药（用移液枪取药
          国Thermo Fisher Scientific公司）等。                     液），给药剂量为0.1 μL/g，每天2次，连续给药14 d；并于
          1.2  主要药品与试剂                                       每天第2次给药后1 h，以2％卵清蛋白溶液双侧滴鼻，每
              复方鱼鹅滴鼻剂（批号20190712，规格10 mL/瓶）由                 鼻孔20 μL，每天1次，连续14 d，维持过敏状态，空白对
          贵州中医药大学第二附属医院药学部提供；曲安奈德鼻                           照组和模型组大鼠滴鼻等量的无菌生理盐水，且空白对
          喷雾剂（阳性对照药，批号20190825，规格6 mL/瓶）购自                   照组大鼠不用维持过敏状态。各给药组大鼠的给药剂
          昆明源瑞制药有限公司；卵清蛋白（批号A8040）及IgE、                      量依据如下：成人（体质量 60 kg）曲安奈德鼻喷雾剂临
          IL-2、IL-13、TNF-α 酶联免疫吸附测定（enzyme-linked            床用药剂量为每天 220 μg，换算成大鼠等效剂量约为


          中国药房    2022年第33卷第18期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18  ·2215·
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