Page 32 - 《中国药房》2022年18期
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A.对照组 B.顺铂组 C.桦褐孔菌总三萜低剂量组 D.桦褐孔菌总三萜中剂量组 E.桦褐孔菌总三萜高剂量组
图3 桦褐孔菌总三萜纯化物对HeLa细胞划痕间距的影响（×40）
2.4.5 细胞凋亡实验 （1）采用AnnexinⅤ-FITC流式凋 表3 桦褐孔菌总三萜纯化物对 HeLa 细胞凋亡率的
亡检测试剂盒进行检测。按“2.4.4”项下分组、加药，培 影响
养48 h，收集细胞，PBS清洗，重悬计数，参照AnnexinⅤ- 组别 AnnexinⅤ-FITC AO/EB（n＝3）
早期凋亡率/% 晚期凋亡率/% 细胞凋亡率/% RSD/%
FITC流式凋亡检测试剂盒说明书操作，采用流式细胞仪 对照组 0.99 2.15 7.58±0.21 2.83
分析细胞早期、晚期凋亡率（表3、图4）。与对照组相比， 桦褐孔菌总三萜低剂量组 1.29 9.21 b 10.07±0.34 a 3.45
桦褐孔菌总三萜中剂量组 1.80 19.14 b 21.29±0.79 b 3.72
各药物组细胞的晚期凋亡率均显著升高（P＜0.01）。
桦褐孔菌总三萜高剂量组 4.28 60.95 b 66.81±2.24 b 3.35
（2）采用AO/EB试剂盒进行检测。按“2.4.4”项下分 顺铂组 3.97 86.76 b 56.10±1.44 b 2.56
组、加药，培养 48 h，收集细胞，PBS 清洗，调整细胞在 a：与对照组相比，P＜0.05；b：与对照品相比，P＜0.01
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1×10 个以内，参照 AO/EB 试剂盒说明书操作，采用荧 1.53c 软件进行荧光定量计数，计算细胞凋亡率（表 3）。
光显微镜观察染色结果（图5，绿色为正常活细胞或早期 与对照组相比，各药物组的细胞凋亡率均显著升高（P＜
凋亡细胞，橙红色为晚期凋亡细胞），使用 Image J V 0.05或P＜0.01）。
10 5 10 5 10 5
pE-A 10 4 pE-A 10 4 pE-A 10 4
0 0 0
0 10 4 10 5 0 10 4 10 5 0 10 4 10 5
FITC-A FITC-A FITC-A
A.对照组 B.顺铂组 C.桦褐孔菌总三萜低剂量组
10 5 10 5
pE-A 10 4 pE-A 10 4
0 0
0 10 4 10 5 0 10 4 10 5
FITC-A FITC-A
D.桦褐孔菌总三萜中剂量组 E.桦褐孔菌总三萜高剂量组
图4 桦褐孔菌总三萜纯化物对HeLa细胞凋亡影响的流式细胞图
·2202· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 中国药房 2022年第33卷第18期
