Page 30 - 《中国药房》2022年18期

2.3 桦褐孔菌总三萜的纯化 吸附量 吸附率
2.5 100
2.3.1 大孔吸附树脂的预处理 将大孔吸附树脂用 90
2.0 80
95% 乙醇浸泡 24 h，然后装柱，用 95% 乙醇以 5 mL/min 70
的流速洗脱至洗脱液澄清，再用蒸馏水洗脱至无醇味 （ mg/g ） 1.5 60 吸附率/％
50
即可。 吸附量/ 1.0 40
2.3.2 大孔吸附树脂种类的筛选 取预处理后的 AB-8 0.5 30
20
型、X-5型、D101型大孔吸附树脂分为7组，分别为单用 10
0 0
组、两两等比例混合的联用组以及三者等比例混合的混 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23
时间/h
用组，分别加至具塞锥形瓶中，各加入桦褐孔菌总三萜
图1 AB-8 型大孔吸附树脂对桦褐孔菌总三萜的静态
粗提物溶液 20 mL（溶剂为水，质量浓度为 2.0 mg/mL， 吸附曲线
总三萜含量约为 0.687 mg/mL，下同），振荡 24 h（25 ℃、
总三萜粗提物溶液上样，上样速率为 1.0 mL/min，每流
110 r/min，下同），过滤，取续滤液按“2.2.3”项下方法处
出 20 mL 流出液测定 1 次桦褐孔菌总三萜的质量浓度，
理后测定吸光度，代入回归方程计算质量浓度。另将过
绘制动态吸附曲线（图2）。图2显示，第7份流出液中桦
滤后的大孔吸附树脂加至具塞锥形瓶中，加乙醇20 mL，
褐孔菌总三萜质量浓度为 0.063 75 mg/mL，接近初始上
振荡24 h，按上述方法计算其中总三萜的质量浓度。按
[11]
下列公式计算吸附量、吸附率和解析率（表1）：吸附量＝ 样液质量浓度的1/10，即认为吸附饱和 ，故选择上样体
V（c0－ce ）/m，吸附率＝（c0－ce ）/c0×100%，解析量＝ V1c1/ 积为140 mL。
m，解析率＝V1c1/[V（c0－ce ）]×100%，式中c0、ce、c1分别为 0.8
0.7
桦褐孔菌总三萜的加入质量浓度、平衡质量浓度、解析 （ mg/mL ） 0.6
后质量浓度，V和V1分别为吸附液（桦褐孔菌总三萜粗提 0.5
物溶液）及解析液（乙醇）体积，m为大孔吸附树脂质量。 0.4
结果显示，AB-8 型大孔吸附树脂的吸附量和吸附率最 总三萜质量浓度/ 0.3
0.2
高，解析率仅略低于X-5型大孔吸附树脂。综合考虑，最 0.1
终选用AB-8型大孔吸附树脂纯化桦褐孔菌总三萜。 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26
表1 不同类型大孔吸附树脂对桦褐孔菌总三萜吸附、 流出液/份
解析的影响 图2 桦褐孔菌总三萜在 AB-8 型大孔吸附树脂中的动
树脂型号 吸附量/（mg/g） 吸附率/% 解析量/（mg/g） 解析率/% 态吸附曲线
AB-8 2.141 93.47 1.917 89.54 2.3.5 上样液质量浓度对动态吸附的影响 同“2.3.4”
X-5 1.785 77.94 1.611 90.22
D101 1.967 85.88 1.541 78.36 项下方法装柱，上样速率为1.0 mL/min，上样体积为140
AB-8+X-5 1.864 81.39 1.633 87.58 mL，考察不同质量浓度（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5
D101+X-5 1.804 78.77 1.577 87.41
AB-8+D101 2.035 88.84 1.568 77.07 mg/mL）的桦褐孔菌总三萜粗提物上样溶液对吸附率的
AB-8+X-5+D101 1.884 82.25 1.634 86.74
影响。结果显示，上述上样液的吸附率分别为 98.61%、
2.3.3 静态吸附曲线的绘制 精密称取预处理后的
96.55%、95.63%、94.74%、89.38%、74.69%、65.82%，可见
AB-8型大孔吸附树脂5 g（湿质量，下同），置具塞锥形瓶
当桦褐孔菌粗提物溶液的质量浓度为 0.5～2.0 mg/mL
中，加桦褐孔菌总三萜粗提物溶液20 mL，振荡24 h进行
时，吸附率均大于90%，考虑到生产周期和成本，最终选
吸附，每小时测定溶液中桦褐孔菌总三萜的含量，并计
择上样液质量浓度为2.0 mg/mL。
算吸附量和吸附率，绘制静态吸附曲线（图 1）。图 1 显
2.3.6 上样流速对动态吸附的影响 同“2.3.4”项下方
示 ，在 吸 附 5 h 后 吸 附 量 趋 于 平 衡 ，最 终 吸 附 率 为
法装柱，用 2.0 mg/mL 的桦褐孔菌总三萜粗提物溶液上
93.48%，表明 AB-8 型大孔吸附树脂对桦褐孔菌总三萜
具有较好的吸附性能，在吸附 5 h 时基本达到吸附 样，上样体积为 140 mL，考察不同上样速率（1.0、2.0、
饱和。 3.0、4.0 mL/min）对吸附率的影响。结果显示，上述上样
2.3.4 动态吸附曲线的绘制 精密称取预处理后的 速 率 下 的 吸 附 率 分 别 为 93.59%、90.52%、88.21%、
AB-8 型大孔吸附树脂 25 g，平行 7 份，湿法装柱（2.0 84.68%，可见当上样速率为1.0 mL/min时，吸附率最高，
cm×30 cm，径高比为 2∶11），用 2.0 mg/mL 的桦褐孔菌 最终选择上样流速为1.0 mL/min。

·2200· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 中国药房 2022年第33卷第18期