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0.05），上述指标与镇肝熄风汤组比较差异均无统计学意 4 讨论
义（P＞0.05）。结果见表4。 中医学认为 PD 属于“颤证”范畴，早在《黄帝内经》
[14]
表4 各组小鼠脑黑质氧化应激指标结果（x±s，n＝10） 就有“诸风掉眩、皆属于肝”的描述 。肝阳上亢是 PD
组别 T-AOC/（mol/mg） SOD/% MDA/（mol/mg） 常见证候，附子味辛干，大热，久用耗伤精血，夺肝肾之
正常对照组 1.75±0.24 100.00 7.12±1.53 阴而使肝肾阴虚，阴不潜阳而肝阳偏亢，因此灌服附子
模型组 0.52±0.10 a 35.24±13.26 a 17.28±5.24 a
[15]
镇肝熄风汤组 1.38±0.35 b 69.09±8.41 b 9.61±1.26 b 可复制肝阳上亢模型 。MPTP可引起灵长类和啮齿类
牛膝组 0.81±0.33 bc 50.21±10.63 bc 13.44±3.21 bc 动物脑黑质和纹状体区多巴胺能神经元死亡，这与 PD
白芍组 0.60±0.17 c 41.24±7.15 c 15.47±5.10 c
[16]
牛膝-白芍药对组 1.34±0.28 b 68.96±6.38 b 10.07±2.54 b 的病理改变类似 。本研究采用附子煎液联合MPTP诱
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与牛 导复制肝阳上亢型PD小鼠模型，用于考察牛膝-白芍药
膝-白芍药对组比较，P＜0.05
对 PD 的干预作用，充分体现了中医辨病与辨证结合的
3.7 牛膝-白芍药对对肝阳上亢型 PD 小鼠脑黑质中
特色。
Nrf2、Trxr1、Txnip mRNA和蛋白表达的影响 临床研究报道，镇肝熄风汤防治肝阳上亢型 PD 效
与正常对照组比较，模型组小鼠脑黑质中 Nrf2、 果明显 ，但是中药复方复杂，导致中医方剂内涵实质
[17]
Trxr1 mRNA相对表达量和蛋白表达水平差异均无统计 难以被揭示。药对是方剂组成的最小单位，也是方剂配
学意义（P＞0.05），Txnip mRNA相对表达量和蛋白表达 伍的精华与核心所在。牛膝-白芍是镇肝熄风汤的核心

水平均显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，各给药组小 药对：牛膝补益肝肾、引火下行，在抗氧化及免疫调节方
鼠脑黑质中 Nrf2、Trxr1 mRNA 相对表达量和蛋白表达 面有一定功效；白芍养血濡筋、缓急止痉，有较好的神经
[18]
水平均显著升高，Txnip mRNA 相对表达量和蛋白表达 保护及抗炎作用 ，两药联用起到与镇肝熄风汤相似的
水平均显著降低（P＜0.05）；牛膝-白芍药对组小鼠脑黑 抗 PD 作用和“镇肝熄风”作用。TH 作为检测多巴胺能
神经元的金标准，可以反映出神经元的位置和数量，用
质中 Nrf2、Trxr1 mRNA 相对表达量和蛋白表达水平均
[19]
来判断 MPTP 诱导的 PD 模型的严重程度 。本研究发
显著高于牛膝组、白芍组，Txnip mRNA相对表达量和蛋
现，与模型组比较，牛膝-白芍药对能够显著改善模型小
白表达水平均显著低于牛膝组、白芍组（P＜0.05），上述
鼠易激惹的程度，减轻麻痹震颤现象，增加小鼠悬挂和
指标与镇肝熄风汤组比较差异均无统计学意义（P＞
游泳的时间，增加小鼠脑黑质区 TH 阳性神经元表达水
0.05）。结果见表5、图2。
平，对细胞核的超微结构变化所有改善，且牛膝-白芍药
表5 各组小鼠脑黑质中 Nrf2、Trxr1、Txnip mRNA 和
对的效果强于牛膝、白芍单味药材，与镇肝熄风汤的效
蛋白表达结果（x±s，n＝5）
果相近。
mRNA相对表达量 蛋白表达水平/%
组别
Nrf2 Trxr1 Txnip Nrf2 Trxr1 Txnip 有关报道阐述，氧化应激损伤是导致 PD 等诸多神
正常对照组 1.00±0.08 1.00±0.13 1.00±0.15 100.00 100.00 100.00 经 退 行 性 疾 病 发 病 的 关 键 因 素 。 T-AOC、SOD 和
[20]
a
模型组 1.17±0.24 1.12±0.03 2.28±0.35 110.14±16.82 107.35±19.25 290.36±12.15 a
镇肝熄风汤组 2.01±0.11 1.86±0.23 1.44±0.41 277.31±26.25 289.54±34.15 144.21±22.46 b MDA 是反映氧化应激的常用检测指标，能够表达抗氧
b
b
b
b
b
bc
bc
bc
牛膝组 1.35±0.41 1.25±0.16 1.81±0.20 157.36±19.42 146.58±19.21 234.59±19.70 bc 化损伤的能力及氧化损伤的程度 。本研究发现，与正
bc
bc
[21]
白芍组 1.32±0.26 1.20±0.09 1.91±0.10 150.11±24.15 139.61±11.19 261.10±14.21 bc
bc
bc
bc
bc
bc
牛膝-白芍药对组 1.89±0.24 1.66±0.09 1.50±0.21 265.27±19.52 276.13±10.45 138.64±16.33 b 常对照组比较，肝阳上亢型 PD 小鼠脑黑质中 T-AOC 和
b
b
b
b
b
a：与正常对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与牛 SOD 的表达水平均显著降低，而 MDA 表达水平显著升
膝-白芍药对组比较，P＜0.05 高，说明模型小鼠脑氧化损伤程度较高；而各给药组可
抑制肝阳上亢型PD小鼠发生氧化应激，且牛膝-白芍药
Nrf2 57 kDa
对的效果强于牛膝、白芍单味药材，与镇肝熄风汤的效
lamin B 67 kDa
果相近。
Trxr1 60 kDa
Nrf2是调节氧化应激反应的关键因子，能够激活内
Txnip 50 kDa
源性抗氧化应答，是抗氧化还原的中枢调节者 。Trxr1
[22]
GAPDH 37 kDa 具有调节氧化还原、激活转录因子和防治 PD 等多种生
正常对 模型组 镇肝熄 牛膝组 白芍组 牛膝-白芍 物活性，Nrf2 可直接与 Trxr1 启动子区域的抗氧化反应
照组 风汤组 药对组
[23]
图2 各组小鼠脑黑质中 Nrf2、Trxr1、Txnip 蛋白表达 元件结合从而促进 Trxr1 表达 。Txnip 是氧化应激效
电泳图 应途径中的一个关键调控蛋白，过度表达时可使细胞更
·2196· China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 18 中国药房 2022年第33卷第18期