Page 61 - 《中国药房》2022年16期
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or P＜0.01）. CONCLUSIONS By inhibiting the RANKL/RANK/OPG signaling pathway，C. sinomenii compatible with prepared
        Aconiti Lateralis can inhibit the excessive proliferation of osteoclasts and restore the balance of bone metabolism so as to play a
        role in protecting bone joints and treating RA.
        KEYWORDS    rheumatoid arthritis；Caulis sinomenii；prepared Aconiti Lateralis；compatibility


            类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种            IL-25、IL-31、核因子κB 受体激活蛋白（receptor activator
        以慢性、对称性关节炎和骨破坏为临床表现的人体自身                           of nuclear factor-κB，RANK）、核因子κB受体激活蛋白配
                  [1]
        免疫性疾病 。目前，RA的治疗药物主要包括糖皮质激                          体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL）、
                                              [2]
        素、肿瘤坏死因子抑制剂和非甾体抗炎药等 。这些药                           护 骨 因 子（osteoprotegerin，OPG）酶 联 免 疫 吸 附 测 定
        物虽能迅速消除关节红肿热痛症状，缓解关节炎症，但                           （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（批
        存在副作用多、成本高、骨破坏病情难以改善等问题；近                          号 分 别 为 E-EL-H0100c、E-EL-R2394c、E-EL-H5469c、
        年来兴起的生物制剂虽有一定疗效，但也存在靶器官特                           SN368、SEKM-0138、20190121）均购于上海晶天生物科技
        异性较低、长期疗效缺乏足够的循证证据等不足 。基                           有限公司；兔抗鼠RANK、RANKL、OPG多克隆抗体（批号
                                                  [3]
        于化学药品和生物制剂治疗RA的上述毒副作用以及局                           分别为ab182158、ab9957、ab73400）均购于英国Abcam公
        限性，寻找有效的 RA 治疗中药近年来也越来越受到人                         司；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G
        们的重视。                                              （IgG）二抗（批号 BA1032）购于武汉博士德生物工程有
                                                           限公司；二甲苯等试剂均购于国药集团化学试剂有限
            RA 属于中医“痹症”范畴，一般按照“顽痹”“尪痹”
                                                           公司。
        进行辨证施治 。古今中医皆认为痹症病机为本虚者脏
                    [4]
                                                           1.3  实验动物
        气内虚，引起寒凝气滞、血瘀，最终导致痰浊瘀血、痹阻
                                                               40只SPF级雌性SD大鼠（体质量150～170 g）由湖
        经络 。痹症的治则治法可以简要概括为6个字：祛风、
            [5]
                                                           南斯莱克景达实验动物有限公司提供，动物合格证号为
                 [6]
        除湿、散寒 。临床常用中药青风藤和制附子治疗 RA，
                                                           11400700346315，动 物 生 产 许 可 证 号 为 SCXK（湘）
        其主要作用机制包括下调炎症因子表达水平、抑制核因
                                                           2019-0004。大鼠适应性喂养5 d后进行分组实验。
        子κB配位体受体活化剂分泌以及抑制骨破坏等                   [7－8] 。
                                                           2 方法
            本研究以牛Ⅱ型胶原复制 RA 大鼠模型，通过检测
                                                           2.1  药物的制备
        RA 模型大鼠的一般情况、体质量、足肿胀度、关节炎症
                                                           2.1.1  造模药物     将2.0 mg/mL的牛Ⅱ型胶原与等量不
        指数（arthritis index，AI）评分、踝关节骨质变化情况、血
                                                           完全弗氏佐剂混合，于 4 ℃条件下，采用匀浆机搅拌均
        清中炎症因子及趋化因子水平、踝关节病理学情况和踝
                                                           匀至完全乳化（完全乳化标志为乳化剂滴至水中不扩
        关节滑膜组织中核因子的表达情况，探讨青风藤配伍制
                                                           散），即得牛Ⅱ型胶原质量浓度为 1.0 mg/mL 的混合
        附子抗RA骨破坏的作用及机制。
                                                           乳剂。
        1 材料
                                                           2.1.2  青风藤配伍制附子水提液             将青风藤和制附子
        1.1  主要仪器
                                                           以4 ∶ 5的质量比投料（质量比依据前期研究结果设置），
            本研究所用主要仪器有Quantum GX2型小动物CT
                                                           总量为180 g，加水回流提取2次，第1次加10倍量水，提
        机[珀金埃尔默仪器（上海）有限公司]，T10 basic 型匀浆
                                                           取 2 h，滤过；第 2 次加 8 倍量水，提取 1.5 h，滤过；合并 2
        机（德国IKA公司），KH-Q330/350型切片机、KL型组织                   次滤液，减压浓缩至相应质量浓度（青风藤质量浓度为
        脱水机、KH-BL1型组织包埋机（湖北孝感阔海医疗科技                        5.4 g/mL，制附子质量浓度为6.75 g/mL），备用。
        有限公司），VIB50型制冰机（广州科勒尔制冷设备有限                        2.1.3  吲哚美辛水溶液         将吲哚美辛肠溶片用研钵碾
        公司）等。                                              碎后，加蒸馏水配制成质量浓度为1.35 mg/mL的吲哚美
        1.2 主要药物与试剂                                        辛水溶液。
            青风藤（批号1512150652）、制附子（批号170650411）             2.2 动物的分组、造模与给药
        均购于康美药业股份有限公司；吲哚美辛肠溶片（国药准                              根据体质量将大鼠随机分为 4 组，空白组、模型组、
        字 H14020771，批号 F171003，规格 25 mg/片）购于云鹏             阳性对照组、青风藤配伍制附子组，每组10只。根据预
        医药集团有限公司；牛Ⅱ型胶原（批号 180382）、不完全                      实验的结果确定造模方式、给药剂量及给药方式。除空
        弗氏佐剂（批号SLBW2506）均购于西格玛奥德里奇（上                       白组外，其余各组大鼠于尾根部正面皮下注射“2.1.1”项
        海）贸易有限公司；白细胞介素 3（interleukin-3，IL-3）、              下混合乳剂 200 μL 进行初次免疫（第 0 天，以下均从实


        中国药房    2022年第33卷第16期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 16  ·1975 ·
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