Page 58 - 《中国药房》2022年14期

0.298 mg/mL范围内线性关系良好。 表4 鸭嘴花药材含量测定结果（n＝2，mg/g）
2.3.7 精密度试验 取“2.3.2”项下供试品溶液（编号 编号 鸭嘴花碱 鸭嘴花酮碱 编号 鸭嘴花碱 鸭嘴花酮碱
S1 4.12 1.44 S7 6.91 0.93
S10），照“2.3.1”项下色谱条件进样 6 次，记录峰面积。
S2 10.22 0.60 S8 9.44 3.26
结果显示，鸭嘴花碱、鸭嘴花酮碱峰面积的 RSD 分别为 S3 6.70 1.36 S9 4.83 2.86
0.72％、0.57％（n＝6），表明方法精密度较好。 S4 5.60 0.92 S10 4.22 1.59
S5 9.22 0.60 S11 4.57 1.06
2.3.8 稳定性试验 精密称取同一批样品（编号 S10） S6 5.65 0.95
0.5 g，照“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，分别在室温 3 讨论
下放置0、2、4、8、12、24 h时照“2.3.1”项下色谱条件进样 3.1 指标成分的确定
分析，记录峰面积。结果显示，鸭嘴花碱、鸭嘴花酮碱峰 通过查阅文献发现，藏药鸭嘴花的现代药理学研究
面积的 RSD 分别为 0.98％、0.78％（n＝6），表明供试品 报道较少，相关化合物的药理学研究主要集中在抗炎、
在室温下放置24 h内稳定性较好。 抗肿瘤、抗菌作用等方面，其中鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱
被证实具有显著的抗炎、抗菌活性 ；同时，鸭嘴花碱被
[6]
2.3.9 重复性试验 精密称取同一批样品（编号 S10）
证实能够有效地降低血压，而鸭嘴花酮碱具有较强的抗
0.5 g，共 6 份，照“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，照
过敏作用 ，与藏药鸭嘴花的传统功效相符。本课题组
[21]
“2.3.1”项下色谱条件进样分析，记录峰面积并采用标准
前期研究发现，鸭嘴花的化学成分以生物碱类成分为
曲线法计算各成分含量。结果显示，鸭嘴花碱、鸭嘴花
主，此类成分最能体现其“苦味”药性，其中鸭嘴花碱被
酮碱含量的 RSD 分别为 1.07％、0.71％（n＝6），说明方 预测为鸭嘴花治疗类风湿性关节炎的潜在标志物，且该
法重复性较好。 成分与鸭嘴花酮碱均在鸭嘴花中具有相对较高的含
[13]
2.3.10 加样回收率试验 称取已知含量的鸭嘴花样品 量 ，故本研究选择鸭嘴花碱、鸭嘴花酮碱作为藏药鸭
（编号 S10），共 6 份，分别按已知量的 100％加入混合对 嘴花的质量评价指标成分。
照品溶液（按“2.3.3”项下方法制得）适量，照“2.3.2”项下 3.2 色谱条件的确定
本课题组前期对色谱条件进行了系统考察，通过全
方法制备供试品溶液，照“2.3.1”项下色谱条件进样分
波长扫描确定了检测波长，并对比了不同流动相体系
析，记录峰面积并计算加样回收率。试验结果（表 3）显
（甲醇-水，乙腈-0.1％磷酸溶液、甲醇-0.1％磷酸溶液）、
示，鸭嘴花碱、鸭嘴花酮碱的平均加样回收率分别为
不 同 流 速（0.8、1.0、1.2 mL/min）、不 同 柱 温（25、30、
99.99％（RSD＝1.53％，n＝6）、99.06％（RSD＝1.83％，
35 ℃）等条件的分离效果，最终确定了适用于鸭嘴花指
n＝6），说明方法准确性较好。 纹图谱分析和含量测定的最优色谱条件，并通过方法学
表 3 鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的加样回收率试验结果 考察验证了上述方法的可行性。
（n＝6） 3.3 指纹图谱及化学模式识别分析

待测成分 已知量/mg 加入量/mg 测得量/mg 加样回收率/％ 平均加样回收率/％ RSD/％ 本研究从整体性的角度出发，采用 HPLC 指纹图谱
鸭嘴花碱 1.056 2 1.054 0 2.110 0 99.98 99.99 1.52 技术结合化学模式识别分析方法对不同来源的 11 批鸭
1.055 4 1.054 0 2.090 1 98.17 嘴花样品进行评价，结果表明，11 批不同产地的鸭嘴花
1.054 5 1.054 0 2.111 3 100.27
1.053 3 1.054 0 2.101 2 99.42 样品呈现出较好的相似性。通过建立HPLC指纹图谱、
1.057 1 1.054 0 2.139 9 102.73 对比混合对照品图谱，共确定了23个稳定性、分离度皆
1.053 7 1.054 0 2.101 0 99.36 好的共有峰。通过聚类分析、主成分分析、正交偏最小
鸭嘴花酮碱 0.398 0 0.402 8 0.789 4 97.17 99.06 1.83
0.397 8 0.402 8 0.793 6 98.26 二乘法-判别分析发现，这 11 批鸭嘴花样品均可得以明
0.397 3 0.402 8 0.795 9 98.96 显区分。相似的结果提示，上述3种分析方法均可有效
0.396 9 0.402 8 0.808 7 102.23 区分不同产地的鸭嘴花药材。其中，云南产鸭嘴花与西
0.398 1 0.402 8 0.792 2 97.84
0.397 0 0.402 8 0.799 3 99.88 藏产鸭嘴花样品的品质较为接近，而四川产鸭嘴花与云
南、西藏产鸭嘴花样品则有所区别；同时，化学模式识别
2.3.11 样品含量测定 取11批鸭嘴花样品粉末0.5 g，
分析结果还提示，产自同一省份的样品并不完全一致，
照“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，照“2.3.1”项下色谱
如同产于云南的 S9 样品与 S2～S3、S5～S8 样品之间存
条件平行进样测定2次，记录峰面积并采用标准曲线法
在一定的差异。
计算各成分含量。由检测结果（表4）可知，11批鸭嘴花
从指纹图谱结果可知，鸭嘴花 S9 样品中 21 号峰对
样品中，鸭嘴花碱、鸭嘴花酮碱的含量分别为 4.12～ 应成分的含量明显高于其他产地的鸭嘴花样品。通过
10.22、0.60～3.26 mg/g，提示不同产地鸭嘴花药材中上 VIP值分析结果可以看出，21号峰对11批鸭嘴花样品间
述化学成分的含量差异较大。 的差异有较大的贡献，结合以上信息可推测21号峰对应

·1716 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 14 中国药房 2022年第33卷第14期