Page 79 - 《中国药房》2022年13期
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Y/%
                                    30                             -1.780
                                                                                             最佳适应度
          1.85
                                                                   -1.785                    平均适应度
          1.80                      25                             -1.790
         Y/%  1.75
          1.70                     X2/%  20                        -1.795
          1.65                                                     -1.800
                                    15                             -1.805
           30                3.0                                  适应度
             25            2.5                                     -1.810
               20        2.0        10
            X2/%  15   1.5  X1       1.0  1.5  2.0  2.5  3.0
                   10 1.0                                          -1.815
                                              X1                   -1.820
             A. X1和X2的响应曲面图             B. X1和X2的等高线图
                                                                   -1.825
                                             Y/%
                                    40                             -1.830
                                                                        0   10  20   30  40   50   60
          1.85
                                                                                   迭代次数
          1.80                      35                                             A. 迭代情况
         Y/%  1.75                 ( mL/g )
          1.70                      30                                40
          1.65                     X3/                                35
                                    25                                                      X3
           40                3.0                                      30                    Y=29.736 4
             35            2.5
               30        2.0        20
          X3/(mL/g)  25  1.5  X1     1.0  1.5  2.0  2.5  3.0          25
                   20 1.0
                                              X1                                      X2
             C. X1和X3的响应曲面图             D. X1和X3的等高线图               最佳自变量值  20        Y=18.114 4
                                             Y/%                      15
                                    40
                                                                      10
          1.85
                                    35                                         X1
          1.80                                                        5        Y=2.494 0
         Y/%  1.75                 ( mL/g )                           0
          1.70                      30                                        X1     X2     X3
          1.65                     X3/                                            B. 含量情况
                                    25
           40                30                                            图4 GA优化结果
             35            25
               30        20         20
          X3/(mL/g)  25  15  X2/%    10  15   20  25  30                                        松果菊苷
                   20 10                                          1.700   a                     毛蕊花糖苷
                                             X2/%                                               异毛蕊花糖苷
             E. X2和X3的响应曲面图             F. X2和X3的等高线图             1.600
        图3   各因素对目标成分总提取效率影响的响应曲面图                                1.500
             和等高线图                                              提取效率/%  1.400
                                                                  1.300      a
        料比 30 mL/g。按修正后的实验条件进行 3 次平行验证                            0.135         a
                                                                  0.090
                                                                  0.045
        实 验 ,得 到 3 种 目 标 成 分 的 总 提 取 效 率 为(1.82 ±                   0
                                                                           NADES-11         50%甲醇
        0.01)%,与预测值 1.83%接近,表明优化的工艺条件准
                                                               a:与50%甲醇比较,P<0.05
        确、可行。                                                   图5 NADES-11与50%%甲醇提取效率的比较
        2.5  NADES-11与传统溶剂的提取效果比较
                                                                (1)DPPH 自由基清除实验。参考文献报道的方
        2.5.1  提取效率的比较         分别以 NADES-11 为溶剂按
                                                           法 ,吸取100 µL NADES-11提取物、50%甲醇提取物、
                                                             [19]
       “2.4.4”项下最优条件和以 2020 年版《中国药典》(一部)
                                                           VC 溶液于 96 孔板中,加入 0.38 mmol/L DPPH 溶液 100
                                                 [18]
        肉苁蓉项下传统溶剂(50%甲醇)进行样品提取 ,比较
                                                           µL,混匀,室温避光孵育 30 min,然后采用酶标仪在 517
        两者的提取效率。实验重复 3 次。采用 SPSS 18.0 软件
                                                           nm波长处检测各溶液的吸光度(A)。同时,将供试品溶
        中t检验对数据进行统计分析,数据以x±s表示,检验水
                                                           液+DPPH溶剂(无水乙醇)的检测结果记为A0,样品溶剂
        准α=0.05。结果显示,NADES-11 对松果菊苷、毛蕊花
                                                           (水)+DPPH 溶液的检测结果记为 A1。计算各样品对
        糖苷和异毛蕊花糖苷的提取效率均显著高于 50%甲醇                          DPPH自由基的清除率:DPPH自由基清除率(%)=[1-
       (P<0.05)。结果见图5。                                     (A-A0 )/A1]×100%。每个质量浓度设置3个复孔。采用
        2.5.2  抗氧化活性的比较         按“2.5.1”项下方法制备2种           SPSS 18.0 软件计算各样品对 DPPH 自由基的半数清除
        样品提取液,精密量取 2 种样品提取液 0、25、50、100、                   浓度(IC50 )及抗坏血酸当量(ascorbic acid equivalent anti-
        150、200、500、1 000 µL,分别置于10 mL量瓶中,用水稀              oxidant capacity,AEAC)。结果显示,在研究质量浓度范
        释得质量浓度为 0、0.08、0.17、0.33、0.50、0.67、1.67、3.34       围内,各样品对DPPH自由基均有一定的清除活性,其强
        mg/mL 的供试品溶液。并制备相同质量浓度的 VC 溶                       弱顺序依次为 VC>NADES-11 提取物>50%甲醇提取
        液,作为阳性对照检测液。                                       物。结果见表5。


        中国药房    2022年第33卷第13期                                             China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 13  ·1609 ·
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