Page 59 - 《中国药房》2022年12期
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relative expressions of HIF-1α and STAT5 mRNA，the relative expressions of HIF-1α，STAT5 and p-STAT5 protein as well as
        p-STAT5/STAT5 were all significantly decreased （P＜0.05）. The above effects of saltwater stir-baked E. ulmoides were in
        dose-dependent manner（P＜0.05）. CONCLUSIONS Saltwater stir-baked E. ulmoides can significantly relieve renal tissue damage
        in rats with kidney-yang deficiency，decrease the levels of BUN，SCR and COR in serum，increase the level of T in serum，the
        mechanism of which may be associated with anti-oxidative stress and inhibition of the expression of HIF-1α and STAT5 protein.
        KEYWORDS     saltwater stir-baked Eucommia ulmoides；kidney-yang deficiency；rat；hypoxia-inducible factor-1 α ；signal
        transducer and activator of transcription 5


            肾阳虚是我国传统医学的常见证型之一，多与素体                         1908161），经陕西中医药大学药学院胡本祥教授鉴定为
                                              [1]
        阳虚、年老肾亏、久病不愈等因素密切相关 。研究发                           杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.干燥树皮的盐
        现，肾阳虚会导致患者出现骨质疏松、软骨退变及生殖                           制品；桂附地黄片[阳性对照药，批号1806192，规格0.4 g
        能力减退等多种病理性改变，如不及时治疗会严重影响                           （相当于总药材1 g）]购自太极集团重庆桐君阁药厂有限
                  [2]
        其生活质量 。目前，临床尚无针对肾阳虚的系统治疗                           公司；磷酸腺嘌呤片（批号 1811271，规格 10 mg）购自天
        药物，只能进行基础的对症治疗，所以相关治疗药物的                           津力生制药股份有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide
                          [1]
        研发是当前工作重点 。中医理论认为，肾主水，肾阳虚                          dismutase，SOD）检 测 试 剂 盒（货 号 S0103）、丙 二 醛
        的临床表现主要呈小便清长等特征，故有学者结合现代                           （malondialdehyde，MDA）检测试剂盒（货号S0131M）、睾
                                                  [3]
        医学研究认为，肾阳虚与肾组织病理学变化有关 。杜                           酮（testosterone，T）酶联免疫吸附测定（enzyme-linked
        仲可通过增强或提高肾阳虚小鼠抓力、肛温、自主活动                           immunosorbent assay，ELISA）试 剂 盒（货 号 PT872）、
        能力、睾丸和精囊腺指数，延长其游泳时间，降低其血尿                          RIPA 蛋白裂解液（货号 P0013B）、超敏 ECL 化学发光试
        素氮（blood urea nitrogen，BUN）、血肌酐（serum creati-      剂盒（货号 P0018M）、兔源 HIF-1α多克隆抗体（货号
        nine，SCR）水平，改善其血液学指标来改善其肾阳虚证
                                                           PT872）、兔 源 甘 油 醛 -3- 磷 酸 脱 氢 酶（glyceralde-
        之腰膝酸软、性欲减退、畏寒、肢冷、精神萎靡、阳虚水泛
                                                           hyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）单克隆抗体
                                            [4]
        以及肾精亏虚、肝气虚弱所致的血液亏虚 。盐炙杜仲
                                                           （货号 AF7087）、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫
        对大鼠去卵巢所引起的骨质疏松症有良好的干预作用，
                                                           球蛋白 G（immunoglobulin G，IgG）二抗（货号 A0208）均
                            [5]
        且盐制品效果优于生品 。杜仲盐炙后，能改变其大多
                                                           购自上海碧云天生物科技有限公司；皮质醇（cortisol，
        数化学成分的结构，增加亲脂性，从而促进其体内吸收，
                                                           COR）ELISA 试剂盒（货号 KB3114）购自上海恪敏生物
                      [6]
        提高生物利用度 。然而目前盐炙杜仲在肾阳虚方面的
                                                           科技有限公司；兔源STAT5及磷酸化STAT5（phosphory-
        药理作用及机制尚不明确。有研究报道，缺氧诱导因子
                                                           lated STAT5，p-STAT5）多 克 隆 抗 体（货 号 分 别 为
        1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）/信号转导及转
                                                           ab16276、ab178941）均购自艾博抗（上海）贸易有限公
        录活化因子5（signal transducer and activator of transcrip-
                                                           司；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染液试剂盒（货
        tion 5，STAT5）信号通路及相关蛋白的表达变化与肾阳
                                                           号 G1120）购自北京索莱宝科技有限公司；RNA 提取试
        虚的发病机制及患者预后密切相关，调控 HIF-1α和
                                                           剂盒（货号WLA088）、聚合酶链反应（PCR）试剂盒（货号
        STAT5 蛋白的表达可能是治疗肾阳虚的重要途径和方
                                                           WLA071）均购自沈阳万类生物科技有限公司；其余试剂
        法 [7－8] 。基于此，本研究拟初步探讨盐炙杜仲对肾阳虚
                                                           均为分析纯或实验室常用规格，水为蒸馏水。
        大鼠的干预作用及潜在机制，为盐炙杜仲药理作用的深
                                                           1.3 实验动物
        入研究及肾阳虚治疗药物的研发提供新的思路和参考。
        1 材料                                                   清洁级雄性 SD 大鼠共 90 只，6～8 周龄，体质量为
        1.1 主要仪器                                           180～200 g，购自西安交通大学医学部实验动物中心，使
            本研究所用主要仪器包括SD1-BS型全自动生化分                       用许可证号为SYXK（陕）2018-001。所有大鼠均饲养在
        析仪（成都斯马特科技公司）、Axio Imager M2m 型倒置                  温度（22±2）℃、相对湿度40％～60％的动物房内，自由
        显微镜（德国Carl Zeiss公司）、ChemiDoc XRS型凝胶成               摄食、饮水。本动物实验方案经陕西国际商贸学院动物
        像仪（美国Bio-Rad公司）、ST-960型多功能酶标仪（上海                   伦理委员会批准同意，批准号为201940。
        科华实验系统有限公司）、GL-20MS 型台式高速冷冻离                       2 方法
        心机（上海卢湘仪离心机仪器有限公司）、DYCZ-30C型                       2.1 盐炙杜仲混悬液的制备
        双垂直电泳槽（北京海天友诚科技公司）等。                                   取盐炙杜仲300 g，粉碎，得粗粉，取适量，置于60％
        1.2  主要药品与试剂                                       乙醇 1 000 mL 中，回流提取 1.5 h×2 次，合并提取液，加
            盐 炙 杜 仲（北 京 同 仁 堂 制 药 有 限 公 司 ，批 号             热浓缩制成质量浓度为3 g/mL（以生药量计）的浸膏，备


        中国药房    2022年第33卷第12期                                            China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 12  ·1461 ·
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