Page 56 - 《中国药房》2022年10期
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剂量组小鼠海马组织中 APP 蛋白的相对表达量均显著                          组织中AChE、ChAT的水平来维持胆碱能系统的功能。
        降低（P＜0.05）。结果见图2、表6。                                    有研究表明，炎症因子在 AD 进展过程中会促进淀
                                                            粉样斑块转化为神经炎症斑块并扩散，促进APP蛋白降
           APP                                      86 kDa
                                                            解以产生大量的Aβ；IL-6水平升高会使钙离子流入Tau

         BACE1                                      70 kDa  蛋白，并使后者磷酸化水平发生改变；TNF-α由被 Aβ激
                                                            活的胶质细胞分泌，对神经元具有毒性，可增加血脑屏
          p-Tau                                     60 kDa
                                                            障的通透性，促进淋巴细胞透过血脑屏障，进而引起中
         GAPDH                                      36 kDa  枢系统的一系列神经炎症反应              [18－20] 。由此可见，炎症因

               正常组    模型组   阳性组  TPE高剂  TPE中剂  TPE低剂        子在AD的发生及发展中起着重要作用。本研究结果显
                                  量组     量组    量组
        图2    各组小鼠海马组织中p-Tau、BACE1、APP蛋白表                   示，TPE能够显著抑制学习记忆障碍模型小鼠脑组织中
              达的电泳图                                         IL-6、TNF-α水平的升高，表明TPE可能通过降低炎症反
                                                            应来改善小鼠的学习记忆障碍。
        表6    各组小鼠海马组织中p-Tau、BACE1、APP蛋白相
                                                                氧化应激是 AD 发生发展中的重要环节之一                  [21－22] 。
              对表达量测定结果（x±±s，n＝4）
                                                            大脑主要由脂质组成，具有较高的耗氧率，故易受活性
         组别        p-Tau/GAPDH  BACE1/GAPDH   APP/GAPDH
         正常组        0.52±0.29    2.29±0.25     1.40±0.25    氧自由基的攻击       [23－24] 。MDA是一种重要的脂质过氧化
         模型组        1.16±0.20 a  2.88±0.28 a   2.13±0.15 a  产物，其水平高低可反映体内脂质过氧化的程度 ；
                                                                                                         [25]
         阳性组        0.68±0.31 b  2.18±0.26 b   1.76±0.44 b
         TPE高剂量组    0.84±0.15 b  1.98±0.23 b   1.19±0.30 b  SOD能有效清除活性氧自由基，其水平高低能反映机体
         TPE中剂量组    0.86±0.13 b  2.00±0.38 b   1.24±0.30 b  清除自由基的能力 。本研究结果显示，TPE 能够抑制
                                                                            [26]
         TPE低剂量组    0.94±0.34    2.64±0.20     1.54±0.24 b
                                                            学习记忆障碍模型小鼠脑组织中 SOD 水平的降低并抑
            a：与正常组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05
                                                            制 MDA 水平的升高，表明 TPE 可能通过缓解氧化应激
        4 讨论
                                                            损伤来改善小鼠的学习记忆障碍。
            有研究指出，AD 的病理学特征包括受影响的脑区
                                                                BACE1是切割APP生成Aβ的关键酶，Aβ在大脑中
        产生广泛的氧化应激、胆碱功能障碍、淀粉样斑块、神经
                                                            异常沉积形成的淀粉样斑块和Tau蛋白过度磷酸化所导
                                    [12]
        元纤维缠结以及神经元丢失等 。为寻求有效的防治
                                                            致的神经纤维缠结是 AD 的特殊病理改变，在 AD 的发
        手段，研究者从不同机制出发，开发了不同的体外动物                                             [27]
                                                            展过程中至关重要 。为了进一步阐明 TPE 保护东莨
        模型，其中腹腔注射东莨菪碱致胆碱能系统功能障碍、
                                                            菪碱致小鼠学习记忆障碍的作用机制，本研究采用
        氧化应激增加而使学习记忆能力下降的建模方法，因具
                                                            Western blot 法探究了 TPE 对小鼠海马组织中 p-Tau、
        有操作简便、经济的优点而被广泛应用于 AD 学习记忆
                                                            BACE1和APP蛋白表达的影响。结果显示，TPE能够抑
                       [12]
        损伤的研究领域 。基于此，本研究采用该方法建立学
                                                            制学习记忆障碍模型小鼠海马组织中 p-Tau、BACE1、
        习记忆障碍小鼠模型，初步探讨TPE的相关作用。
                                                            APP 蛋白的过度表达，表明 TPE 可能通过改善 p-Tau 蛋
            为探究 TPE 对小鼠学习记忆能力下降的保护作用
                                                            白过度表达来改善小鼠的学习记忆障碍。
        是否与脑内神经元损伤有关，本研究采用苏木精-伊红
                                                                综上所述，TPE可改善东莨菪碱诱发的小鼠学习记
        染色法观察了小鼠海马组织细胞形态。结果显示，与模
                                                            忆障碍，其机制可能与平衡大脑胆碱能系统，缓解氧化
        型组比较，各药物组小鼠海马CA1区的神经元均有所增
                                                            应激损伤，改善炎症反应，抑制p-Tau、BACE1、APP蛋白
        多，固化萎缩状态的神经元均有所减少，且神经元排列
                                                            的过度表达有关。但TPE是一个成分复杂的粗提取物，
        趋于紧密，提示TPE能够显著改善学习记忆障碍模型小
                                                            其发挥药效的物质基础还需要进一步研究。
        鼠海马组织的病理形态。
                                                            参考文献
            胆碱能系统损伤被认为是 AD 发生的重要因素 。
                                                     [13]
                                                            [ 1 ]  陈云慧，张天娥，龚圆渊，等.基于泛素-蛋白酶体途径探
        AD 的临床症状与乙酰胆碱含量的减少密切相关                     [14－15] 。
                                                                 讨当归芍药散“肝脾同调-血水同治”治疗阿尔茨海默病
        ChAT是合成乙酰胆碱的关键酶，AChE能迅速分解乙酰                              的作用机制[J].世界科学技术：中医药现代化，2020，22
        胆碱，故通过抑制AChE水平、增强ChAT水平可增加乙                             （1）：93-100.
        酰胆碱含量，从而改善认知功能               [16－17] 。本研究结果显        [ 2 ]  陈静.基于网络药理学探讨温脾通络开窍汤治疗阿尔茨
        示，TPE能够显著降低学习记忆障碍模型小鼠脑组织中                                海默病的作用机制[D].南宁：广西中医药大学，2021.
        AChE水平并提高ChAT水平，表明TPE可能通过调节脑                        [ 3 ]  薛伟宁.重酒石酸卡巴拉汀对难治性精神分裂症手术后


        ·1202 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10                                 中国药房    2022年第33卷第10期
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