Page 76 - 《中国药房》2022年8期

S8），分别于室温下放置0、2、4、6、8、10、24 h时按“2.7.1” 2.7.12 样品含量测定 取 9 批米炒北沙参饮片粉末各
项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，补骨 2.0 g，精密称定，按“2.7.3”项下方法制备供试品溶液，再
脂素、花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素、异欧前胡素峰 按“2.7.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准
面 积 的 RSD 分 别 为 1.32％ 、1.41％ 、1.59％ 、2.24％ 、 曲线法计算样品含量。每样品平行测定3次，结果见表5。
2.19％（n＝7），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳 表5 9批米炒北沙参饮片的含量测定结果（n＝3，µg/g）
定性良好。 编号 补骨脂素 花椒毒素 佛手柑内酯 欧前胡素 异欧前胡素 总含量
2.7.10 重复性试验 取米炒北沙参饮片（编号S8）粉末 S1 13.31 29.94 14.52 12.44 9.13 79.34
S2 12.79 29.45 14.33 12.43 10.50 79.50
适量，共 6 份，按“2.7.3”项下方法制备供试品溶液，再按
S3 11.03 33.38 15.25 12.98 10.77 83.41
“2.7.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲 S4 9.33 15.79 10.31 10.27 9.38 55.08
线法计算样品含量。结果显示，补骨脂素、花椒毒素、佛 S5 5.85 8.92 6.45 6.12 6.86 34.20
手柑内酯、欧前胡素、异欧前胡素的平均含量分别为7.70、 S6 5.90 8.63 6.78 6.72 7.01 35.04
S7 5.91 8.97 6.23 6.95 7.85 35.91
13.62、7.74、7.00、5.57 μ g/g，RSD 分别 2.30％、0.86％、 S8 7.85 13.60 7.74 7.05 5.57 41.81
1.70％、2.00％、1.98％（n＝6），表明方法重复性良好。 S9 7.46 13.33 7.36 7.54 5.52 41.21
2.7.11 加样回收率试验 精密称取已知含量的米炒北 平均值 8.83 18.00 9.89 9.16 8.07 53.94
沙参饮片（编号S8）粉末，每份约1.0 g，共6份，分别精密 3 讨论
加入补骨脂素、花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素、异欧 3.1 TLC条件的选择
前胡素对照品溶液（相应对照品溶液按“2.7.1”项下方法 3.1.1 对照品 本课题组前期研究结果显示，欧前胡
配制）适量，按“2.7.3”项下方法制备供试品溶液，再按 素、补骨脂素、花椒毒素、佛手柑内酯的荧光斑点不清
“2.7.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样 晰，在增加点样量后发现，样品的斑点分离度差，但异欧
回收率，结果见表4。 前胡素的 TLC 斑点清晰，分离度较好，且样品在异欧前
表 4 补骨脂素等 5 个成分的加样回收率试验结果 胡素对照品位置处显相同的蓝色荧光斑点，故选择异欧
（n＝6） 前胡素为对照品进行TLC鉴别。
3.1.2 展开剂 本课题组前期考察了石油醚、乙酸乙
称样量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收率/ 平均加样回收率/ RSD/
待测成分
g μg μg μg ％ ％ ％ 酯、乙醚、乙醇、甲醇、90％甲醇、70％甲醇、50％甲醇等
补骨脂素 1.000 0 7.64 7.80 15.50 100.77 100.56 1.36 不同提取溶剂对 TLC 分离的影响，结果显示，以 70％甲
1.000 1 7.65 7.80 15.29 97.95
1.000 4 7.72 7.80 15.63 101.41 醇为提取溶剂时，TLC斑点清晰，各成分分离度良好，故
1.000 3 7.68 7.80 15.50 100.26 选择70％甲醇为提取溶剂。同时，本课题组还对石油醚
1.000 2 7.75 7.80 15.67 101.54 （60～90 ℃）-乙酸乙酯-甲醇、石油醚（60～90 ℃）-丙酮、
1.000 1 7.76 7.80 15.67 101.41
花椒毒素 1.000 0 13.58 14.00 27.15 96.93 100.73 2.25 三氯甲烷-甲醇、石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯等不同展
1.000 2 13.60 14.00 27.47 99.07 开系统进行了比较，结果显示，以石油醚（60～90 ℃）-乙
1.000 3 13.62 14.00 27.81 101.36 酸乙酯（4 ∶ 1，V/V）为展开剂时，荧光斑点清晰，主斑点的
1.000 4 13.68 14.00 28.09 102.92 比移值较适宜，且该方法在不同相对湿度和温度条件下
1.000 3 13.82 14.00 28.07 101.79
1.000 3 13.90 14.00 28.22 102.29 的耐用性良好，故选择石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯
佛手柑内酯 1.000 2 7.79 7.80 15.65 100.77 100.36 0.98 （4∶1，V/V）为展开剂。
1.000 3 7.73 7.80 15.42 98.59 3.2 浸出物测定条件的选择
1.000 3 7.74 7.80 15.53 99.87
1.000 2 7.80 7.80 15.67 100.90 本课题组前期分别采用冷浸法和热浸法测定水溶
1.000 4 7.78 7.80 15.64 100.77 性浸出物含量，结果显示，由于米炒北沙参的含糖量可
1.000 3 7.81 7.80 15.71 101.28 能较高，使得热浸法所得溶液较为黏稠，难以滤过，故选
欧前胡素 1.000 1 6.95 7.00 13.86 98.71 98.24 0.40
1.000 2 7.10 7.00 13.95 97.85 择冷浸法测定水溶性浸出物的含量。同时，本课题组根
[18]
[19]
1.000 3 6.93 7.00 13.81 98.29 据已有文献 和2020年版《中国药典》（四部） ，分别以
1.000 2 6.96 7.00 13.87 98.70 无水乙醇和90％、80％、70％、60％、50％乙醇为溶剂，以
1.000 3 7.15 7.00 14.0 97.86
1.000 1 6.95 7.00 13.81 98.00 浸膏率为指标，考察了乙醇体积分数对醇溶性浸出物提
异欧前胡素 0.999 9 5.60 5.60 11.16 99.29 99.40 0.35 取的影响，结果显示，当以50％乙醇为溶剂时，所得提取
1.000 2 5.58 5.60 11.13 99.10 物的浸膏率较高，故选择 50％乙醇为醇溶性浸出物的
1.000 3 5.66 5.60 11.20 98.93 溶剂。
1.000 2 5.60 5.60 11.18 99.64
1.000 3 5.62 5.60 11.20 99.64 3.3 含量测定色谱条件的选择
1.000 2 5.66 5.60 11.25 99.82 本课题组前期考察了甲醇-水、甲醇-水（含 0.1％磷

·966 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 8 中国药房 2022年第33卷第8期