Page 75 - 《中国药房》2022年8期

典》（四部）通则“2302酸不溶性灰分测定法”测定酸不溶 峰与相邻色谱峰的分离度均大于 1.2，空白溶液对测定
[18]
性灰分 ，每样品平行测定 3 次。结果显示，9 批米炒北 无干扰。
沙参饮片的酸不溶性灰分含量为 0.21％～0.27％，平均 15
含量为 0.24％。由于各批样品中酸不溶性灰分含量较 10
稳定，故将酸不溶性灰分含量的平均值上浮 20％，作为 AU 5 1 2 3 4 5
酸不溶性灰分限度标准，即暂定酸不溶性灰分不得过 0
8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
0.30％。结果见表2。 t/min
2.6 浸出物 A.混合对照品溶液
取 9 批米炒北沙参饮片粉末，按 2020 年版《中国药 15
典》（四部）通则“2201 浸出物测定法”项下“冷浸法”，以 AU 10 2
[18]
水为溶剂测定水溶性浸出物含量 ，每样品平行测定 3 5 1 3 4 5
0
次。结果显示，9 批米炒北沙参饮片的水溶性浸出物含 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
量为24.91％～30.30％，平均含量为26.69％。将水溶性 t/min
B.供试品溶液（编号S8）
浸出物含量的平均值下浮20％，作为水溶性浸出物限度 15
标准，即暂定水溶性浸出物不得少于 21.00％。结果见 10
AU
表2。 5
取 9 批米炒北沙参饮片粉末，按 2020 年版《中国药 0
8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38
典》（四部）通则“2201 浸出物测定法”项下“热浸法”，以 t/min
50％乙醇为溶剂测定醇溶性浸出物含量 ，每样品平行 C.空白溶液
[18]
1：补骨脂素；2：花椒毒素；3：佛手柑内酯；4：欧前胡素；5：异欧前
测定 3 次。结果显示，9 批米炒北沙参饮片的醇溶性浸
胡素
出物含量为20.66％～25.83％，平均含量为22.18％。将
图 4 补骨脂素等 5 个成分混合对照品溶液、供试品溶
醇溶性浸出物含量的平均值下浮20％，作为醇溶性浸出
液、空白溶液的HPLC图
物限度标准，即暂定醇溶性浸出物不得少于 18.00％。
结果见表2。 2.7.6 线性关系考察 精密吸取“2.7.2”项下混合对照
品溶液100、200、300、400、500、750、1 000 μL，置于5 mL
2.7 含量测定
2.7.1 色谱条件 以 Eelipse Plus C18 （250 mm×4.6 mm， 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制得相应质量浓度的
5 µm）为色谱柱，以水（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度 系列线性工作溶液，按“2.7.1”项下色谱条件进样测定，
记录峰面积。以待测成分质量浓度（X）为横坐标、峰面
洗脱（0～15 min，24％B→42％B，15～19 min，42％B；
积（Y）为纵坐标进行线性回归，结果见表3。
19～25 min，42％B→65％B；25～35 min，65％B→62％B；
35～40 min，62％B→75％B）；检测波长为 302 nm；柱温 表3 补骨脂素等5个成分的回归方程、线性范围、定量
为25 ℃；进样量为20 μL。 限、检测限结果
2.7.2 混合对照品溶液的制备 取补骨脂素、花椒毒 待测成分 回归方程 线性范围/（μg/mL） r 定量限/μg 检测限/μg
补骨脂素 Y＝1.142 5×10 X－32 787.3 0.240～2.400 0.999 8 0.032 0 0.100 8
6
素、佛手柑内酯、欧前胡素、异欧前胡素对照品适量，精密
6
花椒毒素 Y＝1.130 7×10 X－58 514.1 0.320～3.200 0.999 9 0.030 0 0.089 6
称定，置于10 mL量瓶中，分别加甲醇溶解并稀释至刻度， 佛手柑内脂 Y＝1.118 6×10 X－28 640.6 0.224～2.240 0.999 9 0.032 5 0.071 5
6
6
摇匀，制得上述5个成分质量浓度分别为0.012 0、0.016 0、 欧前胡素 Y＝0.880 9×10 X－33 849.0 0.292～2.920 0.999 9 0.032 0 0.090 0
6
0.011 2、0.014 6、0.010 4 mg/mL的混合对照品溶液。 异欧前胡素 Y＝1.000 3×10 X－36 947.7 0.208～2.080 0.999 8 0.045 0 0.132 0
2.7.3 供试品溶液的制备 精密称取米炒北沙参饮片 2.7.7 定量限与检测限考察 精密吸取“2.7.2”项下混
粉末（过四号筛，下同）2.0 g，置于50 mL具塞锥形瓶中， 合对照品溶液适量，用甲醇倍比稀释，按“2.7.1”项下色
加入75％甲醇30 mL，称定质量，超声（功率160 W，频率 谱条件进样测定，以信噪比 10 ∶ 1、3 ∶ 1 分别计算定量限
59 kHz）处理50 min，取出，冷却至室温，再次称定质量， 和检测限，结果见表3。
用 75％甲醇补足减失的质量，以 3 000 r/min 离心 10 2.7.8 精密度试验 取“2.7.2”项下混合对照品溶液，用
min，取上清液，即得供试品溶液。 甲醇稀释10倍，按“2.7.1”项下色谱条件连续进样测定6
2.7.4 空白溶液 以75％甲醇为空白溶液。 次，记录峰面积。结果显示，补骨脂素、花椒毒素、佛手
2.7.5 系统适用性试验 取上述混合对照品溶液、供试 柑内酯、欧前胡素、异欧前胡素峰面积的 RSD 分别为
品溶液、空白溶液适量，按“2.7.1”项下色谱条件进样测 0.59％、0.87％、0.90％、0.80％、0.96％（n＝6），表明仪器
定，记录色谱图，详见图 4。由图 4 可知，理论板数按花 精密度良好。
椒毒素计不低于4 000，各待测成分均基线分离，各色谱 2.7.9 稳定性试验 取“2.7.3”项下供试品溶液（编号

中国药房 2022年第33卷第8期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 8 ·965 ·