Page 70 - 《中国药房》2022年8期

表 4 β-胡萝卜素等成分的相对校正因子及相对保留 并与外标法测定结果（玉米黄质除外）进行比较，计算相
时间 对误差（relative error，RE）：RE＝（WQAMS－WESM ）/WESM×
相对校正因子 相对保留时间 100％（式中，WESM为外标法测得的成分含量，WQAMS为一
序号 β-胡萝 β-隐黄素棕 玉米黄素双棕 β-胡萝 β-隐黄素棕 玉米黄素双棕 测多评法测得的成分含量） 。结果显示，20 批样品两
[12]
卜素 榈酸酯 榈酸酯 卜素 榈酸酯 榈酸酯
1 1.086 1.386 1.148 2.439 3.925 6.347 种方法测定结果的RE均在±1％范围内，表明两者无明
2 1.084 1.387 1.145 2.438 3.923 6.342 显差异，结果见表7。
3 1.117 1.379 1.157 2.438 3.923 6.344 3 讨论
4 1.158 1.431 1.203 2.437 3.923 6.343
5 1.109 1.370 1.142 2.438 3.924 6.347 3.1 参照物的选择
6 1.100 1.384 1.154 2.438 3.924 6.345 类胡萝卜素酯成分的对照品不易获得且价格昂贵，
平均值 1.109 1.390 1.158 2.438 3.924 6.345 故未选择；玉米黄质和β-胡萝卜素的对照品较易获得，
RSD/％ 2.45 1.53 1.96 0.03 0.02 0.03
但β-胡萝卜素的峰面积较小，且在部分样品中未被检
（0.9、1.0、1.1 mL/min）、YMC C30 色 谱 柱（序 列 号 出，而玉米黄质在所有样品中均被检出且峰面积适中，
102ZA90175、128IA80057、114EA80152）、色谱仪（Agi- 故选择玉米黄质作为参照物。
lent 1260、Waters e2695、Thermo UltiMate 3000）进行耐 3.2 流动相的考察
用性考察，取“2.1.2”项下混合对照品溶液，按“2.2”项下 枸杞子中类胡萝卜素成分较多，等度洗脱无法实现
色谱条件进样测定3次，计算β-胡萝卜素、β-隐黄素棕榈 基线分离，故考虑采用梯度洗脱。在前期预实验中，本
酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯的相对校正因子和相对保留 课题组以甲醇、乙腈、水为流动相，对其分离效果进行了
时间，结果见表5、表6。 考察，结果发现，上述流动相无法洗脱出类胡萝卜素酯
2.5 样品测定 等成分，因类胡萝卜素酯极性较小，故考虑在流动相中
取20批枸杞子样品，按“2.1.3”项下方法制备供试品 加入弱极性溶剂，遂进一步对甲基叔丁基醚、四氢呋喃、
溶液，平行制备3份，按“2.2”项下方法进样测定，记录峰 异丙醇、乙酸乙酯及二氯甲烷的分离效果进行了考察，
面积。以玉米黄质为参照物，按一测多评法计算β-胡萝 结果发现，当流动相中加入二氯甲烷时，各待测成分色
卜素、β-隐黄素棕榈酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯的含量， 谱峰的峰形及分离度均较好。

表5 不同条件对β-胡萝卜素等成分相对校正因子的影响（n＝3）
β-胡萝卜素 β-隐黄素棕榈酸酯 玉米黄素双棕榈酸酯
项目 条件
相对校正因子（x±s） RSD/％ 相对校正因子（x±s） RSD/％ 相对校正因子（x±s） RSD/％
柱温/℃ 18 1.084±0.025 4.13 1.439±0.015 2.96 1.206±0.017 3.38
20 1.109±0.027 1.390±0.021 1.158±0.023
22 1.023±0.015 1.357±0.021 1.128±0.011
流速/（mL/min） 0.9 1.103±0.019 2.53 1.411±0.011 2.45 1.139±0.013 3.90
1.0 1.109±0.027 1.390±0.021 1.158±0.023
1.1 1.155±0.018 1.458±0.027 1.226±0.014
色谱柱 102ZA90175 1.146±0.010 2.21 1.364±0.007 1.53 1.243±0.023 3.59
128IA80057 1.109±0.027 1.390±0.021 1.158±0.023
114EA80152 1.157±0.018 1.406±0.013 1.214±0.018
色谱仪 Agilent 1260 1.109±0.027 4.20 1.390±0.021 4.19 1.158±0.023 4.14
Waters e2695 1.022±0.014 1.503±0.016 1.213±0.017
Thermo UltiMate 3000 1.086±0.023 1.487±0.015 1.258±0.015
表6 不同条件对β-胡萝卜素等成分相对保留时间的影响（n＝3）

β-胡萝卜素 β-隐黄素棕榈酸酯 玉米黄素双棕榈酸酯
项目 条件
相对保留时间（x±s） RSD/％ 相对保留时间（x±s） RSD/％ 相对保留时间（x±s） RSD/％
柱温/℃ 18 2.438±0.003 1.10 4.015±0.007 2.31 6.440±0.006 2.57
20 2.438±0.001 3.924±0.001 6.345±0.002
22 2.392±0.003 3.834±0.003 6.124±0.003
流速/（mL/min） 0.9 2.348±0.007 2.68 3.966±0.003 2.09 6.227±0.005 2.64
1.0 2.438±0.001 3.924±0.001 6.345±0.002
1.1 2.474±0.005 4.085±0.004 6.559±0.006
色谱柱 102ZA90175 2.352±0.004 1.85 4.139±0.007 2.97 6.776±0.003 3.30
128IA80057 2.438±0.001 3.924±0.001 6.345±0.002
114EA80152 2.377±0.002 4.126±0.005 6.606±0.005
色谱仪 Agilent 1260 2.438±0.001 0.68 3.924±0.001 1.35 6.345±0.002 3.15
Waters e2695 2.424±0.003 4.004±0.003 6.681±0.001
Thermo UltiMate 3000 2.457±0.005 4.026±0.005 6.723±0.002

·960 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 8 中国药房 2022年第33卷第8期