Page 58 - 《中国药房》2022年8期

2.5 体外透皮释放实验 min。按此工艺制得BC-LN-FA的EE为（68.62±1.16）％，
2.5.1 释放介质的配制 按 2020 年版《中国药典》（四 含量为（7.01±0.12）％，泡沫外观均一，无塌陷，粒径、EE
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部）方法配制pH分别为7.4、6.8、5.0的PBS，备用 。 与预测值的偏差较小，符合相关要求 。同时，本研究建
2.5.2 离体皮肤的制备 取 8 只雄性 Wistar 大鼠，脱颈 立了测定BC含量的HPLC法，经方法学考察证实，该方法
处死后固定于鼠板上，剔去皮肤毛发并剪下其腹部皮 快速、便捷。
肤，去除皮下脂肪后漂洗，展平并吸去多余水分后用锡 本研究初步探讨了各因素间的交互作用。结果显
箔纸包裹，置于－80 ℃冰箱中冷藏，备用 。 示，均质时间对粒径与EE均有显著影响，尤以对粒径的
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2.5.3 离体皮肤渗透实验 采用 Franz 扩散池考察含 影响较为明显。研究表明，高压均质可使物料细化为微
BC的PBS（pH7.4）及BC-LN-FA的离体皮肤渗透性。将 米级至纳米级，高压均质压力越大，均质循环次数越多，
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“2.5.2”项下皮肤取出解冻，固定于Franz扩散池中，使角 所得药物粒径越小 。但本研究结果显示，随着均质时
质层面向供给室，平衡 30 min 后，在扩散池下层分别加 间的延长，粒径呈先增加后降低的趋势。其粒径增加的
入 pH 为 7.4、6.8、5.0 的 PBS（含 0.5％乙醇）作为接收液， 原因可能为随着均质时间的延长，纳米粒破碎，形成更
上层加入BC-LN-FA（含药量约为56 μg）800 μL，此刻记 小的粒子，在静电作用下相互吸引，从而发生团聚现象，
为 0 h，分别于 32.0℃下扩散 0.25、0.5、1、2、4、8、12、24、 这一破碎过程可能会进一步导致粒径和 EE 的降低，而
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48 h 时取样 500 μL，并及时补加等体积的新鲜接收液。 团聚过程会导致粒径的增加 。本研究还发现，投药量
每次取样后将样品滤过，取续滤液300 μL，按“2.2.10”项 对粒径、EE 均有显著影响，尤以对 EE 的影响较强。随
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下方法测定并计算BC含量。 着投药量的增加，EE 呈增加趋势 ，但在本研究中，EE
2.5.4 药物累积释放百分率 按下式计算不同时间点 呈先增加后降低的趋势。这可能是由于初期随着载药
单 位 面 积 的 药 物 累 积 释 放 百 分 率（Qe ）：Qe＝Qi/W × 量的增加，黏度增大，使得 EE 提高；后期由于投药量过
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n－1－1 大，部分 BC 未被包裹而导致 EE 降低 。此外，助乳化
n
100％，Qi＝（5Cn+∑ Ci×0.5）/0.785。式中，0.785 为透皮
i＝1 剂对粒径、EE也具有显著影响，随着助乳化剂用量的增
扩散面积（cm），5 为接受池体积（mL），0.5 为取样体积 加，粒径、EE均呈先增加后降低的趋势。前期增加趋势
2
（mL），Cn为第n个取样点测得的药物质量浓度（μg/mL）， 可能是由于少量使用的十八醇等辅料在乳化过程中增
Ci为第 n 个取样点之前某时间点测得的药物质量浓度 加了黏度，进而导致粒子聚集，从而影响粒径和EE。随
（μg/mL），Qi为第 i 个取样点的药物累积透过量（μg），W 着助乳化剂用量的增多，一方面由于其中的乳酸成分增
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为上样体积中的含药量（μg） 。以各取样点的 Qe为纵 加，降低了黏度，减弱了粒子聚集倾向；另一方面，乳液
坐标、t 为横坐标，采用 GraphPad Prism 7 软件绘制体外 的形成和稳定与制备过程中乳液体系的能量密度有关，
释放曲线，详见图6。由图6可见，BC-LN-FA在不同pH 乳化成分含量的增加，可帮助BC-LN- FA乳液体系获得
接收液中均有良好的缓释效果，48 h 时，BC-LN-FA 在 较高的能量密度，进而获得较小的液滴，因此高浓度助
pH7.4、6.8、5.0 的 PBS 中的 Qe 分别为（54.12±2.69）％、 乳化剂使粒径、EE 降低的原因也可能与更多的乳化成
（57.85±4.25）％、（59.47±1.83）％，而游离 BC 在 pH7.4 分提供了更高的能量密度有关 。
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的 PBS 中的 Qe 仅为（15.04±1.43）％；相较于游离 BC， 本研究结果显示，所制BC-LN-FA呈类圆形，大小均
BC-LN-FA 虽在初始阶段释药较快，但随后释药逐渐放 一，分散均匀，其黏度为（122.92±5.09）mPa·s，表明
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缓，提示该剂型可实现BC的缓慢释放 。 BC-LN-FA 具有一定的黏附性，能避免液体制剂滑落等
问题，可在实现局部定位给药的同时，延长药物作用时
100
BC-LN-FA（pH7.4）
BC-LN-FA（pH6.8） 间。泡沫消解率为（65.32±3.22）％，表明泡沫消解率
80 BC-LN-FA（pH5.0）
BC（pH7.4） 高，可快速消泡，这不仅可减少泡沫滞留于患者局部皮
60 肤引起的观感问题，而且可通过按摩进一步调节给药部
Qe/％ 位，促进其局部吸收。
40
体外透皮释放实验结果显示，48 h时，BC-LN-FA在
20 pH7.4、6.8、5.0 的 PBS 中的 Qe 分别为（54.12±2.69）％、
（57.85±4.25）％、（59.47±1.83）％，而游离 BC 在 pH7.4
0
0 6 12 18 24 30 36 42 48 的 PBS 中的 Qe仅为（15.04±1.43）％，表明 BC-LN-FA 具
t/h
图6 BC及BC-LN-FA体外释放曲线 有显著的促渗透作用，其原因可能为处方中的乳化成分
（如硬脂酸，十八醇、乳酸等）破坏了角质层细胞，使角
3 讨论 质层细胞流动性增强，从而导致药物的渗透能力增
本研究通过 Box-Behnken 设计-响应面法构建了 强 [29－30] 。
BC-LN-FA 的参数模型，得到最优工艺为投药量 25 mg、 综上所述，本研究所得最优工艺稳定、可行，所制
乳化剂用量 40 mg、助乳化剂用量 30 mg、均质时间 20 BC-LN-FA粒度均匀，消泡快，具有一定黏度。

·948 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 8 中国药房 2022年第33卷第8期