Page 87 - 《中国药房》2022年5期
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衡量其质量的指标。2020 年版《中国药典》（四部）中                        2.2.1  对照品溶液的制备          精密称取没食子酸对照品
        0213 炮制通则规定，制炭应“存性”，即外观及性状是控                       2.5 mg，置于50 mL棕色量瓶中，加水定容，摇匀，即得质
                                  [1]
        制炭药质量规范化的重要因素 。                                    量浓度为0.05 mg/mL的没食子酸对照品溶液。
            Box-Behnken 设计-响应面法是一种综合设计试验                   2.2.2  供试品溶液的制备          取过四号筛的马齿苋炭粉
        和数学建模的优化方法，通过建立直观的数学模型来表                           10 g，精密称定，置于 250 mL 棕色量瓶中，加水定容，密
        达因素与响应值的联系，可精准地预测最优工艺，更好                           塞；避光静置 8 h 后，超声（功率 250 W，频率 40 kHz）提
                                           [7]
        地体现各因素、指标与效应值之间的关联 。基于此，笔                          取 15 min，放冷后补足减失质量；滤过，取续滤液 20 mL
        者采用 Box-Behnken 设计-响应面法，以鞣质含量、水溶                   置于100 mL棕色量瓶中，加水定容，即得供试品溶液。
        性浸出物含量以及外观性状的综合评分为指标，优化马                           2.2.3  检测波长的确定         分别精密量取“2.2.1”“2.2.2”
        齿苋炭的炮制工艺，并研究最优炮制工艺制得的马齿苋                           项下对照品、供试品溶液各 3 mL，分别置于 25 mL 棕色
        炭对痔疮模型大鼠症状的改善作用，以期规范马齿苋炭                           量瓶中，加入磷钼钨酸 1 mL、水 9 mL，再以 29％碳酸钠
        的炮制工艺，为治疗痔疮的新药开发提供参考。                              溶液定容，摇匀，静置 30 min。以相应试剂为空白，于
        1 材料                                               400～800 nm波长范围内进行紫外全波长扫描。结果显
        1.1 主要仪器                                           示，对照品溶液和供试品溶液均在 760 nm 处有最大吸
            本研究所用主要仪器有 MS-5 型炒货机型炒药机、                      收，因此本研究选择760 nm为检测波长。
        101-3BS 型电热鼓风干燥机（常州市金坛迈斯机械有限                       2.2.4  线性关系考察        精密吸取对照品溶液 0.5、1.0、
        公司），DE-100型高速万能高速粉碎机（浙江红景天工贸                       2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于 25 mL 棕色量瓶中，加入
        有限公司），UV-2550型紫外分光光度计（日本Shimadzu                   磷钼钨酸 1 mL，再分别加水 11.5、11、10、9、8、7 mL，以
        公司），KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限                       29％碳酸钠溶液定容，摇匀；静置 30 min 后，于 760 nm
        公司），BT25S型十万分之一电子天平（北京赛多利斯科                        波长处测定吸光度。以没食子酸吸光度（Y）为纵坐标、
        学仪器有限公司），C22-C503型电陶炉（浙江苏泊尔股份                      质量浓度（X）为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程
        有限公司），M200PRO型酶标仪[帝肯（上海）贸易有限公                      为 Y＝87.34X－0.052 4（r＝0.999 1），表明没食子酸在
        司]。                                                0.001～0.01 mg/mL 检 测 质 量 浓 度 范 围 内 线 性 关 系
        1.2  主要药品与试剂                                       良好。
            没 食 子 酸 对 照 品（批 号 Y19M8C36143，纯 度 ≥            2.2.5  含量测定      精密量取供试品溶液3 mL，置25 mL
        98％）购自上海源叶生物科技有限公司；磷钼钨酸试剂                          棕色量瓶中，按“2.2.4”项下“加入磷钼钨酸……于 760
       （批号 202104031）购自成都艾科达化学试剂有限公司；                      nm波长处测定吸光度”方法操作后，根据标准曲线计算
        马应龙痔疮膏（批号 210216）购自马应龙药业集团股份                       供试品溶液中总多酚的含量（以没食子酸计）。精密量
        有限公司；大鼠肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，            取供试品溶液25 mL，加至已盛有0.6 g干酪素的100 mL
        TNF-α）、白细胞介素6（interleukin 6，IL-6）、IL-1β酶联免         具塞锥形瓶中，密塞，置于30 ℃水浴条件下保温1 h；取
        疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）     出振摇混匀，放冷，滤过，精密量取续滤液 2 mL，置 25
        试剂盒（批号分别为 202109、202109、202106）均购自上                mL 棕色量瓶中，按“2.2.4”项下“加入磷钼钨酸……于
        海优选生物科技有限公司；马齿苋饮片（批号170112）购                       760 nm 波长处测定吸光度”方法操作后，根据标准曲线
        自哈尔滨祺功堂中药饮片有限公司，经长春中医药大学                           计算供试品溶液中不被吸附的多酚含量（以没食子酸
        药学院蔡广之教授鉴定为马齿苋科植物马齿苋P. olera-                      计）。根据公式计算鞣质含量（鞣质含量＝总多酚含
        cea L.干燥地上部分。                                      量－不被吸附的多酚含量），同时进行空白校正。
        1.3 动物                                             2.2.6  精密度试验       精密吸取供试品溶液 3.0 mL，按
            本研究所用SPF级SD大鼠共40只，雌雄各半，体质                     “2.2.5”项下总多酚的含量测定方法测定供试品的吸光
        量 180～200 g，购自苏州西山生物科技有限公司，动物                      度，连续测定 6 次。结果显示，吸光度的 RSD 为 0.14％
        生产许可证号为SCXK（辽）2020-0001。                           （n＝6），表明仪器精密度良好。
        2 方法与结果                                            2.2.7  重复性试验       取同一批马齿苋炭粉末 6 份，精密
        2.1 马齿苋炭样品的制备                                      称定，按“2.2.2”项下方法操作，平行制备供试品溶液 6
            参照2020年版《中国药典》（四部）中0213炮制通则                    份，按“2.2.5”项下方法测定鞣质含量。结果显示，鞣质
        项下的炒炭法 ，取马齿苋适量，投入已经预热30 min的                       的平均含量为 0.054 5％，RSD 为 0.72％（n＝6），表明该
                    [1]
        炒药机中，炒至表面焦黑色、内部焦褐色时，取出，晾凉。                         方法重复性良好。
        2.2  鞣质的含量测定                                       2.2.8  稳定性试验       精密吸取“2.2.2”项下供试品溶液
            参考2020年版《中国药典》（四部）2202鞣质含量测                    3 mL，于室温放置10、20、30、40、50、60 min后，按“2.2.5”
        定法 进行测定。                                           项下总多酚的含量测定方法测定供试品的吸光度。结
            [1]

        中国药房    2022年第33卷第5期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5  ·593 ·
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