Page 82 - 《中国药房》2022年5期

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1 2 3 4 5 7 9 10 11 12 13 14 15 16 平方欧氏距离
400 R 0 5 10 15 20 25
360 S10 S4
320 S9 S9
280 S8
240 S7 S6
AU 200 S6 S10
160 S5 S5
120 S4 S8
80 S3 S1
40 S2 S2
0 S1
S7
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min S3
图1 10批益母草颗粒的HPLC叠加指纹图谱及对照指 图3 10批益母草颗粒样品的聚类分析树状图
纹图谱R 特征值为 9.630、方差贡献率为 60.185％，第 2 主成分的
特征值为 3.026、方差贡献率为 18.912％，第 3 主成分的
6
36
32 特征值为1.903、方差贡献率为11.891％。3个主成分的
28
24 14 累计方差总贡献率为 90.987％，表明 3 个主成分的提取
AU 20
16 涵盖了样品共有成分的大部分信息，代表性良好，可用
8 13
4 16 于益母草颗粒的质量评价。PCA结果显示，10批样品被
0
划分为 4 类：第 1 类为 S4～S6、S8～S10；第 2 类为 S1、
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min S2；第 3 类为 S3；第 4 类为 S7。该结果与聚类分析结果
6：盐酸益母草碱；13：阿魏酸；14：芦丁；16：金丝桃苷 一致，表明不同批次的样品可以被区分开。
图2 混合对照品溶液的HPLC图
6
2.4.5 相似度分析 以对照指纹图谱R为参照图谱，通 4
过《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》软件 2 第1类
第2类
0 第3类
第4类
分析 10 批益母草颗粒的相似度。结果显示，10 批益母 t[2] －2
草颗粒的相似度均大于 0.970，表明不同批次益母草颗 －4
－6
粒的相似度良好、质量较稳定，结果见表1。
－8
0
表1 10批益母草颗粒的相似度评价结果 －15 －10 －5 t[1] 5 10
样品编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 对照指纹图谱R 图4 10批益母草颗粒的PCA得分图
S1 1.000 1.000 0.991 0.999 0.999 0.986 0.998 0.966 0.996 0.982 0.998
S2 1.000 1.000 0.993 0.998 0.998 0.989 0.997 0.971 0.995 0.985 0.999 2.7 益母草颗粒中4个指标成分的含量测定
S3 0.991 0.993 1.000 0.986 0.986 0.999 0.983 0.991 0.977 0.998 0.997 2.7.1 系统适用性试验 取“2.2”项下混合对照品溶液、
S4 0.999 0.998 0.986 1.000 1.000 0.980 0.999 0.956 0.999 0.974 0.995
S5 0.999 0.998 0.986 1.000 1.000 0.980 0.999 0.956 0.999 0.975 0.996 “2.3”项下供试品溶液（S6）及空白溶液（50％甲醇）各适
S6 0.986 0.989 0.999 0.980 0.980 1.000 0.976 0.995 0.970 1.000 0.994 量，分别按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图（图
S7 0.998 0.997 0.983 0.999 0.999 0.976 1.000 0.951 0.999 0.971 0.994 5）。结果显示，空白溶液对测定无干扰，4个待测成分的
S8 0.966 0.971 0.991 0.956 0.956 0.995 0.951 1.000 0.943 0.997 0.979
S9 0.996 0.995 0.977 0.999 0.999 0.970 0.999 0.943 1.000 0.964 0.991 色谱峰均能达到基线分离，且与相邻色谱峰间的分离度
S10 0.982 0.985 0.998 0.974 0.975 1.000 0.971 0.997 0.964 1.000 0.991 均大于1.5，理论板数均大于3 000，说明本方法的系统适
对照指纹图谱R 0.998 0.999 0.997 0.995 0.996 0.994 0.994 0.979 0.991 0.991 1.000 用性较好。
2.5 聚类分析 2.7.2 线性关系考察 分别取盐酸益母草碱对照品溶
以 10 批益母草颗粒的 16 个共有峰峰面积为变量， 液（质量浓度分别为 12.01、18.99、30.88、48.99、78.00、
通过SPSS 25.0软件运用组间对比法对10批益母草颗粒 124.81 μg/mL，以 50％甲醇制得，下同）、阿魏酸对照品
进行系统聚类分析，以平方欧氏距离为标尺计算样品的 溶液（质量浓度分别为 1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00
相似程度。结果显示，当平方欧氏距离为10时，10批益 μg/mL）、芦丁对照品溶液（质量浓度分别为 1.16、2.08、
母草颗粒样品可被划分为 4 类：第 1 类为 S4～S6、S8～ 4.04、6.04、8.00、14.99 μg/mL）、金丝桃苷对照品溶液（质
S10；第2类为S1、S2；第3类为S3；第4类为S7。10批益 量浓度分别为1.01、1.99、4.00、6.01、8.00、11.99 μg/mL），
母草颗粒的聚类分析树状图见图3。 按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以各对照
2.6 PCA 品的质量浓度为横坐标（X，μg/mL）、峰面积为纵坐标
以 10 批益母草颗粒的 16 个共有峰峰面积为变量， （Y）绘制回归曲线，并求出回归方程和相关系数（r）。结
采用SPSS 25.0软件进行PCA，PCA得分图见图4。模型 果，4 个待测成分在其相应质量浓度范围内与其峰面积
建立结果显示，本研究提取出3个主成分：第1主成分的 均呈现良好的线性关系（r均大于0.999 0），结果见表2。

·588 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5 中国药房 2022年第33卷第5期