Page 65 - 《中国药房》2022年5期

下色谱条件进样测定，选取15号峰为参照峰，记录其余 13
6
共有峰的保留时间和峰面积。结果显示，19个共有峰的 17
相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3.0％，表明 1 119.72
该方法重复性较好。 15
4 10 19
2.2.7 指纹图谱比较 取“2.2.1”项下虎杖一体化饮片 837.21 1 2 9 18
R
C10
供试品溶液和传统饮片供试品溶液适量，按“2.2.3”项下 C9
C8
C7
色谱条件进样分析，记录色谱图。然后将两种虎杖饮片 mAU 554.69 C6
C5
C4
的HPLC图谱均导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系 C3
C2
C1
Y10
统》（2004A版）软件中，采用中位数法，将时间窗宽度设 272.17 Y9
Y8
Y7
Y6
置为 0.1 min，分别建立 10 批虎杖一体化饮片的叠加指 Y5
Y4
Y3
纹图谱、10批虎杖传统饮片的叠加指纹图谱以及这两种 －10.34 Y2
Y1
0 11.60 23.19 34.79 46.39 57.96 69.58
虎杖饮片的叠加指纹图谱（图1、图2、图3）。结果显示， t/min
两种虎杖饮片共有 19 个色谱峰，11 个共有峰。10 批虎
图3 20批虎杖饮片的叠加指纹图谱
杖一体化饮片共有 17 个共有峰，10 批虎杖传统饮片共
有13个共有峰，由此可见，虎杖两种饮片间存在一定差 500
17
异，其中一体化工艺较传统工艺可更好地保留虎杖的成 400 6
分。取“2.2.2”项下混合对照品溶液，按“2.2.3”项下色谱
300 13
条件进样分析，记录色谱图（图4）。将图3与图4进行比 mAU
对，指认出6号峰为虎杖苷，13号峰为白藜芦醇，15号峰 200 19
为大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，17号峰为大黄素，19号峰 100 15
为大黄素甲醚。另外，结合虎杖一体化饮片和传统饮片
0
的镜面对比图谱（图 5）可知，虎杖一体化饮片中 6 号峰 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
（虎杖苷）和15号峰（大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷）的峰高 t/min
6：虎杖苷；13：白藜芦醇；15：大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷；17：大黄
明显高于传统饮片，传统饮片中13号峰（白藜芦醇）、17
素；19：大黄素甲醚
号峰（大黄素）和19号峰（大黄素甲醚）的峰高明显高于
图4 混合对照品溶液的HPLC图
一体化饮片。
6
13
6
17 13 17 A
1 119.72
10 15 15
4
837.21 1 2 3 7 8 9 12 14 16 18 19 10 16 19
R 1 2 3 4 5 7 89 11 12 14 18
Y10
mAU 554.69 Y9 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
Y8
Y7 2 3 45 7 8 9 11 12 14
Y6 1 10 15 16 18
272.17 Y5 19
Y4 6
Y3
Y2
－10.34 Y1
0 11.60 23.19 34.79 46.39 57.96 69.58
t/min 17 B
13
图1 10批虎杖一体化饮片的叠加指纹图谱
A：虎杖一体化饮片；B：虎杖传统饮片
图5 虎杖一体化饮片和传统饮片的镜面对比图谱
6 13 17
1 119.72
2.2.8 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
10 15 19 价系统》（2004A 版）分别对 10 批虎杖一体化饮片、10 批
837.21 1 2 4 5 9 11 18
R
C10 虎杖传统饮片的指纹图谱进行相似度分析。结果显示，
mAU 554.69 C9 10 批虎杖一体化饮片的相似度为 0.801～0.988，10 批虎
C8
C7
C6 杖传统饮片的相似度除C7号样品（4年生虎杖）为0.699
C5
272.17
C4
C3 外，其余均大于0.850，说明年限不同的虎杖之间存在一
C2
－10.34 C1 定差异；20批虎杖一体化饮片和传统饮片的相似度均为
0 11.60 23.19 34.79 46.39 57.96 69.58
t/min 0.800～0.993，说明虎杖一体化饮片和传统饮片的相似
图2 10批虎杖传统饮片的叠加指纹图谱 度较高，但存在一定差异。结果见表2～表4。
中国药房 2022年第33卷第5期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5 ·571 ·