Page 55 - 《中国药房》2022年5期

积，并代入线性回归方程计算样品中原儿茶酸、盐酸麻 量分别为 623.3、152.1、1 213.9 μg/mL，且其色谱峰分离
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黄碱和柚皮苷的含量。每批样品平行测定2次，取平均 度均大于1.5，满足可测性原则 。原儿茶酸来源于四季
值，结果见表3。 青、金荞麦、鱼腥草等多味药材，虽非专属性成分，却是
表3 10批急支糖浆含量测定结果（n＝2，μg/mL） 复方中的代表性酚酸类成分，具有调节机体氧化应激和
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批号 原儿茶酸 盐酸麻黄碱 柚皮苷 炎症反应等作用 ；盐酸麻黄碱是麻黄药材的特征性生
19040073 593.8 155.1 1 224.2 物碱成分，有解热、发汗、止咳、抗哮喘等功效 ；柚皮苷
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19040074 584.8 147.8 1 166.1
19040075 679.3 151.6 1 170.8 是枳壳药材的特征性二氢黄酮类成分，有抗氧化、抗炎、
19040077 621.8 145.5 1 237.4 抗凋亡、抗溃疡等作用 。以上 3 种活性成分均与急支
[20]
19040079 688.9 148.7 1 294.4
19040097 563.8 162.1 1 212.7 糖浆的功效作用相关，是潜在的质量标志物。
19040098 678.2 165.1 1 258.1 3.2 HPTLC前处理方法及薄层色谱条件考察
19040101 640.7 130.2 1 116.9 在 HPTLC 方法建立过程中，对甘草、枳壳、四季青
19040114 651.2 158.4 1 234.3
19040116 530.8 156.6 1 224.4 药材的鉴别，考察了不同样品前处理方法（直接萃取、
平均值 623.3 152.1 1 213.9 5％氢氧化钠溶液调至 pH11～12 再萃取、稀盐酸调至
RSD/％ 8.62 6.54 4.18
pH2～3 再萃取），不同展开剂[正丁醇-乙醇-水（体积比
3 讨论
4∶1∶5，取上层）、正丁醇-乙酸乙酯-水（体积比4∶1∶5，取上
3.1 HPTLC鉴别和HPLC含量测定指标成分的选择
层）、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（体积比15∶40∶22∶15，
基于“整体鉴别”思路，为实现一板多药味鉴别，本
4 ℃静置取下层）、三氯甲烷-甲醇-水（体积比 16 ∶ 10 ∶ 3，
研究选择甘草、枳壳、四季青药材中的黄酮类成分甘草
4 ℃静置取下层）]，不同显色剂（10％硫酸乙醇溶液、5％
苷、柚皮苷、具栖冬青苷进行同板鉴别，选择前胡药材中
香草醛硫酸溶液、2％三氯化铝甲醇溶液），不同检视条
的香豆素类成分白花前胡甲素和鱼腥草对照药材进行
件（日光、紫外光 254 nm 和 366 nm）以及不同展距（60、
同板鉴别；使用鱼腥草对照药材鉴别虽无法指认具体成
70、80 mm）。对急支糖浆中前胡和鱼腥草药材的鉴别，
分，但2个特征性斑点仍可保证鉴别的准确性。薄层鉴
考察了不同样品前处理方法（考察项同上），不同展开
别指标成分的选择均参照2020年版《中国药典》标准：柚
剂[二氯甲烷-丙酮（体积比 15 ∶ 1）、环己烷-乙酸乙酯（体
皮苷、具栖冬青苷（又名长梗冬青苷）、白花前胡甲素均
积比 4 ∶ 1）、三氯甲烷-甲醇（体积比 19 ∶ 1）、三氯甲烷-乙
为鉴别枳壳、四季青、前胡药材的特征成分，甘草苷是甘
酸乙酯-丙酮（体积比5 ∶ 1 ∶ 4）、环己烷-乙酸乙酯（体积比
草药材含量测定的特征成分，满足专属性条件。本研究
9∶5）]，不同显色剂（10％硫酸乙醇溶液、5％磷钼酸乙醇
较2020年版《中国药典》，去除了非专属性成分原儿茶酸
和阿魏酸成分的鉴别，增加专属性成分甘草苷（来源于 溶液、2，4-二硝基苯腈盐酸乙醇溶液），不同检视条件
甘草）、具栖冬青苷（来源于四季青）及鱼腥草对照药材 （考察项同上）和不同展距（65、75、85 mm）等各因素对展
特征斑点的鉴别。专属性成分的鉴别可以实现工业生 开效果的影响。最终所选择的样品前处理方法和薄层
产中原料药材的可追溯性；而非专属性成分由于来源于 色谱条件均为各项考察下的最优结果，经后期各项方法
多个药材，即便检出也无法准确判定该批次急支糖浆的 学考察证实，专属性、耐用性、批次重复性良好。
质量，所以专属性成分鉴别是中药复方制剂薄层鉴别的 3.3 HPLC前处理方法及色谱条件考察
发展趋势。对于麻黄、金荞麦、紫菀3种处方药材，麻黄 在采用 HPLC 法测定含量过程中，考察了不同溶剂
中的代表性成分为生物碱类成分，样品制备条件和展开 （60％甲醇、80％甲醇、甲醇、80％乙醇、乙醇）制备供试
系统条件均要求偏碱性条件 ，不适宜与其他成分进行 品溶液的效果，考察了水相添加剂0.1％磷酸、0.1％甲酸
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同板鉴别，所以仍沿用药典方法；目前金荞麦、紫菀的水 和0.1％冰醋酸的分离效果，考察了柱温30、35、40、45 ℃
提液中可检出特征成分表儿茶素和紫菀酮，但在急支糖 的分离效果，也考察了不同检测波长、进样量、流速等多
浆中无法检出，推测与这2种成分水溶性差、工业化生产 个色谱条件，选择了最优的样品制备方法和色谱条件作
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未粉碎药材等因素相关 ，笔者推荐使用液质联用技术 为本实验条件。其中，盐酸麻黄碱仅在210 nm下有末端
对金荞麦和紫菀的特征成分进行鉴别。 吸收，当使用0.1％磷酸作为添加剂时，在210 nm波长下
结合质量标志物筛选“五原则”中的可测性、特有性 整体基线平稳，所以本色谱条件对于仅有末端吸收的化
和功效关联性原则，本研究的含量测定选择原儿茶酸、 合物成分检测非常适用。经验证，本研究所建立的
盐酸麻黄碱和柚皮苷3种活性成分进行含量测定。原儿 HPLC 含量测定方法同样适用于 1200 型 HPLC 系统（美
茶酸、盐酸麻黄碱、柚皮苷在10批急支糖浆中的平均含 国Agilent公司），耐用性好。

中国药房 2022年第33卷第5期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 5 ·561 ·