Page 66 - 《中国药房》2022年4期

号S3）约1 g，精密称定，共9份，精密加入各单一对照品 345 nm；进样量为10 μL。
适量，按“2.5.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.5.4” 2.6.5 专属性试验 取上述对照品溶液、供试品溶液、
项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收 阴性对照溶液，按“2.6.4”项下色谱条件进样测定，记录
率。结果见表3。 色谱图，详见图10。由图10可知，盐酸小檗碱色谱峰与
表3 虎杖苷等成分的加样回收率试验结果（n＝9） 相邻色谱峰的分离度均大于1.5，理论板数大于4 000，阴
性对照无干扰。
样品量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收率/ 平均加样回收率/ RSD/
待测成分
g mg mg mg ％ ％ ％ 1
虎杖苷 0.998 4 3.146 7 2.187 3 5.304 9 98.67 98.57 1.77 AU 0.50
1.000 7 3.153 9 2.187 3 5.381 2 101.83 0
0 2 4 6 8 10 12 14
1.010 2 3.183 8 2.187 3 5.354 4 99.24 t/min
1.005 6 3.169 3 3.920 6 6.916 4 95.57 A.对照品溶液
0.999 7 3.150 8 3.920 6 6.938 9 96.62 1
0.50
1.001 5 3.156 4 3.920 6 7.037 1 98.98 AU
1.002 0 3.158 0 5.695 1 8.758 4 98.34 0 0 2 4 6 8 10 12 14
0.999 2 3.149 2 5.695 1 8.790 4 99.05 t/min
1.010 3 3.184 2 5.695 1 8.814 6 98.86 B.供试品溶液（编号S3）
落新妇苷 0.998 4 5.647 9 2.973 6 8.524 5 96.73 99.48 2.67
0.50
1.000 7 5.661 0 2.973 6 8.626 7 99.74 AU
1.010 2 5.714 7 2.973 6 8.545 4 95.19 0 0 2 4 6 8 10 12 14
1.005 6 5.688 7 5.699 5 11.230 1 97.23 t/min
0.999 7 5.655 3 5.699 5 11.344 7 99.82 C.缺黄柏的阴性对照溶液
1.001 5 5.665 5 5.699 5 11.336 3 99.50 1：盐酸小檗碱
1.002 0 5.668 3 8.425 3 14.275 8 102.16 图 10 盐酸小檗碱对照品溶液、供试品溶液、阴性对照
0.999 2 5.652 5 8.425 3 14.244 4 101.98 溶液的HPLC图
1.010 3 5.715 3 8.425 3 14.388 4 102.94
2.6.6 线性关系考察 取盐酸小檗碱对照品适量，用
2.5.11 样品含量测定 取 10 批金母颗粒样品，按
60％乙醇稀释制成质量浓度分别为 0.020 0、0.050 0、
“2.5.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.5.4”项下色谱
0.125 0、0.312 5、0.781 2、1.562 5 mg/mL的系列线性工作
条件进样测定，记录峰面积并按外标法计算样品含量。
溶液，按“2.6.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以
每样品平行测定 3 次，取平均值。结果显示，10 批样品
待测成分的质量浓度（X）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标
中虎杖苷、落新妇苷的含量分别为 2.251 1～4.462 9、
进行线性回归，得盐酸小檗碱的回归方程为Y＝4.349 1×
1.221 0～7.011 6 mg/g，平均含量分别为 3.022 7、2.958 9
7
2
10 X－218 508.214 8（R ＝0.999 9），表明盐酸小檗碱检测
mg/g。结果见表4。
质量浓度的线性范围为0.020 0～1.562 5 mg/mL。
表 4 金母颗粒中虎杖苷、落新妇苷的含量测定结果 2.6.7 精密度试验 取“2.6.1”项下对照品溶液，按
（n＝3，mg/g） “2.6.4”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
编号 虎杖苷 落新妇苷 编号 虎杖苷 落新妇苷 结果显示，盐酸小檗碱峰面积的 RSD 为 0.26％（n＝6），
S1 4.462 9 7.011 6 S6 2.783 9 2.839 5
S2 3.531 1 4.595 4 S7 2.540 8 1.293 3 表明仪器精密度良好。
S3 3.387 8 5.124 7 S8 2.757 0 1.289 3 2.6.8 稳定性试验 取“2.6.2”项下供试品溶液（编号
S4 2.881 4 2.276 2 S9 2.424 8 1.310 9 S3），分别于室温下放置 0、4、8、12、16、20、24 h 时按
S5 3.206 2 2.626 6 S10 2.251 1 1.221 0
“2.6.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显
2.6 金母颗粒中盐酸小檗碱的含量测定 示，盐酸小檗碱峰面积的 RSD 为 0.12％（n＝7），表明供
2.6.1 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量， 试品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。
精密称定，加入 60％乙醇溶解并稀释，制成盐酸小檗碱 2.6.9 重复性试验 取金母颗粒（编号 S3）约 2 g，共 6
质量浓度为0.050 0 mg/mL的对照品溶液。 份，精密称定，按“2.6.2”项下方法制备供试品溶液，再按
2.6.2 供试品溶液的制备 同“2.1.2”项。 “2.6.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法
2.6.3 阴性对照溶液的制备 按金母颗粒制备工艺制 计算样品含量。结果显示，盐酸小檗碱的平均含量为
备缺黄柏的阴性颗粒，再按“2.6.2”项下方法制备阴性对 1.645 8 mg/g，RSD 为 2.63％（n＝6），表明方法重复性
照溶液。 良好。
2.6.4 色谱条件 以Agilent ZORBAX C18 （250 mm×4.6 2.6.10 加样回收率试验 取已知含量的金母颗粒（编
mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-0.3％磷酸溶液（每100 mL 号S3）约1 g，精密称定，共9份，精密加入“2.6.1”项下对
磷酸溶液中加入十二烷基硫酸钠0.08 g）（50∶50，V/V）为 照品溶液，按“2.6.2”项下方法制备供试品溶液，再按
流动相；流速为 1 mL/min；柱温为 30 ℃；检测波长为 “2.6.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样

·444 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 4 中国药房 2022年第33卷第4期