Page 65 - 《中国药房》2022年4期

R 2
Q 2
0.10
1.0 1 2
AU
0
0.5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
t/min
0
A.混合对照品溶液
－0.5
0.10
2
－1.0 AU 1
0
－1.5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
－0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 t/min
B.供试品溶液（编号S3）
图7 正交偏最小二乘-判别分析模型的置换检验结果
0.10
变量重要性投影（variable importance in projection， 2
AU
VIP）值是筛选差异性化合物的重要指标，VIP 值越高， 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
表示对应化合物对组间质量差异的影响越大 。采用 t/min
[12]
C.缺虎杖的阴性对照溶液
SIMCA 14.1 软件，以 VIP 值＞1 为标准筛选影响金母颗
粒质量的标志成分 。结果显示，VIP值＞1的共有峰依 0.10
[13]
次为 7 号峰、11 号峰（芦丁）、17 号峰、13 号峰（落新妇 AU 1
0
苷）、3号峰、8号峰、6号峰、16号峰，表明这8个共有峰对 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
t/min
应的成分可能是造成金母颗粒质量差异的标志成分。 D.缺金刚刺、土茯苓的阴性对照溶液
结果见图8。 1：虎杖苷；2：落新妇苷
图9 虎杖苷等混合对照品溶液、供试品溶液、阴性对照
溶液的HPLC图
2.0
2.5.6 线性关系考察 取各对照品适量，按“2.5.1”项下
1.5
方法制备虎杖苷质量浓度分别为0.010 8、0.027 0、0.067 4、
VIP值 1.0 0.168 4、0.421 0、1.052 5 mg/mL，落 新 妇 苷 0.012 6、

0.031 4、0.078 4、0.196 0、0.490 0、1.225 0 mg/mL 的系列
0.5
线性工作溶液，按“2.5.4”项下色谱条件进样测定，记录峰
0 面积。以各待测成分的质量浓度（X）为横坐标、峰面积
7 11 17 13 3 8 6 16 2 9 10 15 4 5 18 12 22 14 20 19 21
峰号 （Y）为纵坐标进行线性回归，得虎杖苷的回归方程为Y＝
图8 10批金母颗粒22个共有峰的VIP值 3.539 7×10 X－115 346.622 7（R ＝0.999 9），落新妇苷的回
2
7
7
2
2.5 金母颗粒中虎杖苷、落新妇苷的含量测定 归方程为Y＝2.209 8×10 X－104 101.031 7（R ＝0.999 9），
2.5.1 混合对照品溶液的制备 取虎杖苷、落新妇苷对 表明虎杖苷、落新妇苷检测质量浓度的线性范围分别为
照品适量，精密称定，加入60％乙醇溶解并稀释，制成上 0.010 8～1.052 5、0.012 6～1.225 0 mg/mL。
述 2 种成分质量浓度分别为 0.413、0.496 mg/mL 的混合 2.5.7 精密度试验 取“2.5.1”项下混合对照品溶液，按
对照品溶液。 “2.5.4”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
2.5.2 供试品溶液的制备 同“2.1.2”项。 结果显示，虎杖苷、落新妇苷峰面积的 RSD 分别为
2.5.3 阴性对照溶液的制备 按金母颗粒的制备工艺 0.20％、0.03％（n＝6），表明仪器精密度良好。
分别制备缺金刚刺、土茯苓、虎杖的阴性颗粒，再按 2.5.8 稳定性试验 取“2.5.2”项下供试品溶液（编号
“2.5.2”项下方法制备缺虎杖和缺金刚刺、土茯苓的阴性 S3），分别于室温下放置 0、4、8、12、16、20、24 h 时按
对照溶液。 “2.5.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显
2.5.4 色谱条件 以 Shim-pack GIST C18 （250 mm×4.6 示，虎杖苷、落新妇苷峰面积的 RSD 分别为 1.53％、
mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-0.1％磷酸溶液（15 ∶ 85， 2.27％（n＝7），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳
V/V）为流动相；流速为 1 mL/min；柱温为 30 ℃；检测波 定性良好。
长为291 nm；进样量为10 μL。 2.5.9 重复性试验 取金母颗粒（编号 S3）约 2 g，共 6
2.5.5 专属性试验 取上述混合对照品溶液、供试品溶 份，精密称定，按“2.5.2”项下方法制备供试品溶液，再按
液及各阴性对照溶液，按“2.5.4”项下色谱条件进样测 “2.5.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法
定，记录色谱图，详见图 9。由图 9 可知，各色谱峰的分 计算样品含量。结果显示，虎杖苷、落新妇苷含量的RSD
离度均大于1.5，理论板数按虎杖苷峰计不低于3 000，阴 分别为2.34％、2.44％（n＝6），表明方法重复性良好。
性对照无干扰。 2.5.10 加样回收率试验 取已知含量的金母颗粒（编

中国药房 2022年第33卷第4期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 4 ·443 ·