Page 65 - 《中国药房》2022年4期
P. 65

R  2
                                               Q  2
                                                             0.10
               1.0                                                               1   2
                                                             AU
                                                               0
               0.5                                              0    5   10   15  20   25   30  35   40  45
                                                                                    t/min
                0
                                                                                A.混合对照品溶液
              -0.5
                                                             0.10
                                                                                     2
              -1.0                                           AU                 1
                                                               0
              -1.5                                              0    5   10  15   20   25  30   35   40  45
                -0.2  0   0.2  0.4  0.6  0.8  1.0                                   t/min
                                                                              B.供试品溶液(编号S3)
         图7 正交偏最小二乘-判别分析模型的置换检验结果
                                                             0.10
            变量重要性投影(variable importance in projection,                               2
                                                             AU
        VIP)值是筛选差异性化合物的重要指标,VIP 值越高,                           0
                                                                0   5    10  15   20   25  30   35   40  45
        表示对应化合物对组间质量差异的影响越大 。采用                                                     t/min
                                                [12]
                                                                             C.缺虎杖的阴性对照溶液
        SIMCA 14.1 软件,以 VIP 值>1 为标准筛选影响金母颗
        粒质量的标志成分 。结果显示,VIP值>1的共有峰依                           0.10
                        [13]
        次为 7 号峰、11 号峰(芦丁)、17 号峰、13 号峰(落新妇                    AU                  1
                                                               0
        苷)、3号峰、8号峰、6号峰、16号峰,表明这8个共有峰对                           0    5   10   15  20   25   30  35   40  45
                                                                                    t/min
        应的成分可能是造成金母颗粒质量差异的标志成分。                                           D.缺金刚刺、土茯苓的阴性对照溶液
        结果见图8。                                                 1:虎杖苷;2:落新妇苷
                                                           图9    虎杖苷等混合对照品溶液、供试品溶液、阴性对照
                                                                 溶液的HPLC图
          2.0
                                                           2.5.6  线性关系考察        取各对照品适量,按“2.5.1”项下
          1.5
                                                           方法制备虎杖苷质量浓度分别为0.010 8、0.027 0、0.067 4、
          VIP值  1.0                                        0.168 4、0.421 0、1.052 5 mg/mL,落 新 妇 苷 0.012 6、

                                                           0.031 4、0.078 4、0.196 0、0.490 0、1.225 0 mg/mL 的系列
          0.5
                                                           线性工作溶液,按“2.5.4”项下色谱条件进样测定,记录峰
           0                                               面积。以各待测成分的质量浓度(X)为横坐标、峰面积
             7  11 17 13  3  8  6 16  2  9 10 15 4  5 18 12 22 14 20 19 21
                                峰号                         (Y)为纵坐标进行线性回归,得虎杖苷的回归方程为Y=
              图8   10批金母颗粒22个共有峰的VIP值                      3.539 7×10 X-115 346.622 7(R =0.999 9),落新妇苷的回
                                                                                     2
                                                                    7
                                                                                7
                                                                                                 2
        2.5  金母颗粒中虎杖苷、落新妇苷的含量测定                            归方程为Y=2.209 8×10 X-104 101.031 7(R =0.999 9),
        2.5.1  混合对照品溶液的制备           取虎杖苷、落新妇苷对             表明虎杖苷、落新妇苷检测质量浓度的线性范围分别为
        照品适量,精密称定,加入60%乙醇溶解并稀释,制成上                         0.010 8~1.052 5、0.012 6~1.225 0 mg/mL。
        述 2 种成分质量浓度分别为 0.413、0.496 mg/mL 的混合               2.5.7  精密度试验       取“2.5.1”项下混合对照品溶液,按
        对照品溶液。                                            “2.5.4”项下色谱条件连续进样测定 6 次,记录峰面积。
        2.5.2 供试品溶液的制备          同“2.1.2”项。                 结果显示,虎杖苷、落新妇苷峰面积的 RSD 分别为
        2.5.3  阴性对照溶液的制备           按金母颗粒的制备工艺              0.20%、0.03%(n=6),表明仪器精密度良好。
        分别制备缺金刚刺、土茯苓、虎杖的阴性颗粒,再按                            2.5.8  稳定性试验       取“2.5.2”项下供试品溶液(编号
       “2.5.2”项下方法制备缺虎杖和缺金刚刺、土茯苓的阴性                        S3),分别于室温下放置 0、4、8、12、16、20、24 h 时按
        对照溶液。                                             “2.5.4”项下色谱条件进样测定,记录峰面积。结果显
        2.5.4  色谱条件      以 Shim-pack GIST C18 (250 mm×4.6  示,虎杖苷、落新妇苷峰面积的 RSD 分别为 1.53%、
        mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(15 ∶ 85,                 2.27%(n=7),表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳
        V/V)为流动相;流速为 1 mL/min;柱温为 30 ℃;检测波                 定性良好。
        长为291 nm;进样量为10 μL。                                2.5.9  重复性试验       取金母颗粒(编号 S3)约 2 g,共 6
        2.5.5  专属性试验      取上述混合对照品溶液、供试品溶                  份,精密称定,按“2.5.2”项下方法制备供试品溶液,再按
        液及各阴性对照溶液,按“2.5.4”项下色谱条件进样测                       “2.5.4”项下色谱条件进样测定,记录峰面积并按外标法
        定,记录色谱图,详见图 9。由图 9 可知,各色谱峰的分                       计算样品含量。结果显示,虎杖苷、落新妇苷含量的RSD
        离度均大于1.5,理论板数按虎杖苷峰计不低于3 000,阴                      分别为2.34%、2.44%(n=6),表明方法重复性良好。
        性对照无干扰。                                            2.5.10  加样回收率试验         取已知含量的金母颗粒(编


        中国药房    2022年第33卷第4期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 4  ·443 ·
   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70