Page 63 - 《中国药房》2022年4期

表1 各单味饮片的来源信息
金刚刺 土茯苓 火炭母 大血藤 犁头草 虎杖 苦参 黄柏
编号
批号 采收时间 批号 采收时间 批号 采收时间 批号 采收时间 批号 采收时间 批号 采收时间 批号 采收时间 批号 采收时间
S1 Y21011301 2020年4月 Y21011302 2020年4月 Y21011304 2020年5月 Y21011304 2020年12月 Y21011308 2020年7月 Y21011309 2020年10月 Y21011307 2020年7月 Y21011306 2020年7月
S2 Y20100801 2020年4月 Y20100817 2020年4月 Y20100809 2020年5月 Y20100833 2019年12月 Y20100857 2019年7月 Y20100841 2019年10月 Y20100849 2019年10月 Y20100865 2019年7月
S3 Y20100802 2020年4月 Y20100818 2020年4月 Y20100810 2020年5月 Y20100834 2019年12月 Y20100858 2019年7月 Y20100842 2019年10月 Y20100850 2019年10月 Y20100866 2019年7月
S4 Y20100803 2020年4月 Y20100819 2020年4月 Y20100811 2020年5月 Y20100835 2019年12月 Y20100859 2019年7月 Y20100843 2019年10月 Y20100851 2019年10月 Y20100867 2019年7月
S5 Y20100804 2020年4月 Y20100820 2020年4月 Y20100812 2020年5月 Y20100836 2019年12月 Y20100860 2019年7月 Y20100844 2019年10月 Y20100852 2019年10月 Y20100868 2019年7月
S6 Y20100805 2020年4月 Y20100821 2020年4月 Y20100813 2020年5月 Y20100837 2019年12月 Y20100861 2019年7月 Y20100845 2019年10月 Y20100853 2019年10月 Y20100869 2019年7月
S7 Y20100806 2020年4月 Y20100822 2020年4月 Y20100814 2020年5月 Y20100838 2019年12月 Y20100862 2019年7月 Y20100846 2019年10月 Y20100854 2019年10月 Y20100870 2019年7月
S8 Y20100807 2020年4月 Y20100823 2020年4月 Y20100815 2020年5月 Y20100839 2019年12月 Y20100863 2019年7月 Y20100847 2019年10月 Y20100855 2019年10月 Y20100871 2019年7月
S9 Y20100808 2020年4月 Y20100824 2020年4月 Y20100816 2020年5月 Y20100840 2019年12月 Y20100864 2019年7月 Y20100848 2019年10月 Y20100856 2019年10月 Y20100872 2019年7月
S10 19040801 2019年5月 19061603 2019年4月 Y20100817 2020年5月 17042504 2018年12月 Y20100865 2019年7月 19082102 2018年12月 19040801 2019年10月 19041301 2019年3月
声（功率 300 W，频率 40 kHz）30 min 使完全溶解，放冷， 为时间窗宽度、S1 为参照图谱，经色谱图多点校正后自
再次称定质量，用 60％乙醇补足减失的质量，混匀，滤 动匹配，生成对照指纹图谱（R）和10批金母颗粒的叠加
过，取续滤液，即得。 指纹图谱。结果显示，10 批金母颗粒共有 22 个共有
2.1.3 各单味饮片溶液的制备 取金刚刺等各单味饮 峰。金母颗粒的 HPLC 叠加指纹图谱和对照指纹图谱
片适量，分别按“2.1.2”项下方法制备单味饮片溶液。 见图1。
2.1.4 色谱条件 以 Symmetry C18 （250 mm×4.6 mm，5 1 300 10 12 21
1 200 7 11 16 17
μm）为色谱柱，以乙腈（A）-0.3％磷酸溶液（B）为流动相进 1 100 1 2 3 4 5 6 8 9 13 14 15 18 19 20 22
1 000 R
行梯度洗脱（0～40 min，5％A→8％A；40～60 min，8％A→ 900 S10
S9
800
14％A；60～95 min，14％A→19％A；95～110 min，19％A→ U/mV 700 S8
S7
600
500 S6
30％A；110～135 min，30％A→60％A；135～145 min， 400 S5
300 S4
60％A→95％A；145～150 min，95％A→5％A）；流速为 200 S3
100 S2
1 mL/min；柱温为 30 ℃；检测波长为 291 nm；进样量为 0 S1
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150
10 μL。 t/min
2.1.5 精密度试验 取“2.1.2”项下供试品溶液（编号 图1 10批金母颗粒的HPLC叠加指纹图谱和对照指纹
S1），按“2.1.4”项下色谱条件连续进样测定6次，以芦丁 图谱
（11号峰）为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对 2.1.9 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
峰面积。结果显示，22个共有峰相对保留时间和相对峰 价系统（2012 版）》对 10 批金母颗粒进行相似度评价。
面积的RSD均小于3.00％（n＝6），表明方法精密度良好。 结果显示，10 批样品与对照指纹图谱的相似度分别为
2.1.6 重复性试验 取金母颗粒（编号 S1），共 6 份，按 0.997、0.976、0.991、0.987、0.985、0.990、0.962、0.993、
“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.4”项下色谱 0.978、0.985，表明 10 批样品的相似度良好，金母颗粒的
条件进样测定，以芦丁（11 号峰）为参照，计算各共有峰 制备工艺稳定。
的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，22个共有峰 2.1.10 共有峰指认 取“2.1.1”项下混合对照品溶液，
按“2.1.4”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将供试
相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3.00％（n＝
品（编号S1）的HPLC图与混合对照品溶液的HPLC图进
6），表明方法重复性良好。
行比对，共指认了 5 个共有峰，分别为没食子酸（2 号
2.1.7 稳定性试验 取“2.1.2”项下供试品溶液（编号
峰）、虎杖苷（9 号峰）、芦丁（11 号峰）、落新妇苷（13 号
S1），分别于室温下放置0、3、6、9、12、24 h时按“2.1.4”项
峰）、山柰酚（20 号峰）。由于芦丁的峰面积较大且分离
下色谱条件进样测定，以芦丁（11 号峰）为参照，计算各
度较好，故选择芦丁为参照峰。结果见图2。
共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，22个
2.1.11 共有峰与各单味饮片的相关性 取“2.1.3”项下
共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于
各单味饮片溶液，按“2.1.4”项下色谱条件进样测定，记
3.00％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳 录色谱图。将 S1 样品的 HPLC 图与上述各单味饮片溶
定性良好。 液的 HPLC 图进行比对，初步判断各共有峰的归属情
2.1.8 指纹图谱的建立 取10批金母颗粒，按“2.1.2”项 况。结果见图3、表2。
下方法制备供试品溶液，再按“2.1.4”项下色谱条件进样 2.2 聚类分析
测定，记录色谱图。采用《中药色谱指纹图谱相似度评 以10批金母颗粒中22个共有峰的相对峰面积为变
价系统（2012版）》进行色谱峰匹配，以分离度好、峰面积 量，使用 SPSS 21.0 软件，采用 Ward 连接法以平方欧氏
相对较大的色谱峰为共有峰，采用中位数法，以 0.1 min 距离为度量标准进行聚类分析。结果显示，当平方欧氏

中国药房 2022年第33卷第4期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 4 ·441 ·