Page 90 - 《中国药房》2022年3期
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形态观察。结果显示，SSD 中未读取到粒径分布数据，                          为 1.23％，n＝6）、101.39％～105.85％（RSD 为 2.15％，
        可能是形成的 SAN 较少（图 1a）；GSD 中存在粒径为                      n＝6）、97.53％ ～104.23％（RSD 为 3.32％ ，n＝6）、
        （213±28）nm、PDI为0.41±0.18的棒状或梭形SAN（图                 100.18％～105.62％（RSD为2.65％，n＝6）。
        1b）；MSSGD中存在粒径为（242±20）nm、PDI为0.42±                 2.2.2  体外释放实验         采用透析袋法考察 SGD-SAN
        0.04 的棒状或梭形 SAN，形态与 GSD 中 SAN 一致（图                  对甘草中主要成分体外释放的影响。分别取“2.1”项下
        1c）；SGD 中存在粒径为（255±12）nm、PDI 为 0.36±                GSD、MSSGD 和 SGD 各 3 mL，分别置于截留分子量为
        0.09的不规则球形SAN（图1d）。                                 8 000～14 000 Da的透析袋中，两端扎紧后，放入释放介
                                                            质[200 mL pH1.2 的 HCl 溶液或 200 mL pH6.8 的磷酸盐
         a                        b
                                                            缓冲液（PBS）]中，在 37 ℃下以 100 r/min 进行搅拌。分
                                                            别于搅拌 5、15、30 min 和 1、2、4、6、8、10、12、24 h 时，取
                                                            释放溶液1 mL，同时补充相同温度、相同体积的释放介
                                                            质。将释放溶液经0.45 µm微孔滤膜过滤，取续滤液，然
                                                            后采用HPLC法进样分析，计算各成分的累积释放量并
         c                        d
                                                            绘制释放曲线。甘草中7种主要成分在pH1.2 HCl溶液
                                                            和pH6.8 PBS中的体外释放曲线分别见图2、图3。
                                                                由图2可知，在pH1.2 HCl溶液中，甘草与芍药配伍
                                                            后对甘草中芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草苷和异甘
                                                            草苷的体外释放均没有明显影响，而对甘草素、异甘草
            a：SSD；b：GSD；c：MSSGD；d：SGD                       素和甘草酸的体外释放影响较大。甘草素在 GSD 中的
                   图1   4种水煎液的透射电镜图
                                                            24 h 累积释放量仅为 25.85％，但在 MSSGD 中能达到
        2.2  SGD-SAN形成对甘草中主要成分体外释放的影响                       80.52％，在 SGD 中能达到 100％；异甘草素在 GSD 中的
        2.2.1  含量测定方法的建立            采用 HPLC 法进行含量           24 h累积释放量为0，而在MSSGD中为14.55％，在SGD
        测定，色谱条件及溶液制备方法参考文献[16]。参照                           中为 20.98％；甘草酸在 GSD 中的 24 h 累积释放量为
        2020 年版《中国药典》（四部）分析方法验证指导原则及                        6.74％，而在MSSGD中为11.06％，在SGD中为16.83％。
        文献[16]进行方法学考察。专属性试验结果显示，供试                          以上结果说明，当甘草与芍药配伍后，能显著增加甘草
        品溶液与混合对照品溶液在相同保留时间处有相同色                             难溶性成分（如甘草素、异甘草素、甘草酸）在pH1.2 HCl
        谱峰出现，各待测成分色谱峰与相邻色谱峰的分离度均                            溶液中的溶解度，加速药物的释放，且两药合煎的效果
        大于1.5，且阴性对照溶液对测定无干扰，表明本方法的                          优于单煎液混合；但对于溶解性较好的成分（如芹糖甘
        专属性较好（图略）。以质量浓度（X）为横坐标、峰面积                          草苷、芹糖异甘草苷），甘草与芍药配伍后对其体外释放
        （Y）为纵坐标进行线性回归后，得到芹糖甘草苷、甘草                           影响不大。
        苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素                              由图 3 可知，在 pH6.8 PBS 中，甘草中 7 种成分的
                                             2
        的回归方程分别为 Y＝14 495X－4 719.2（R ＝1.000 0）、             24 h 累积释放量均达到 100％，芍药成分对其体外释放
                            2
        Y＝18 407X－11 852（R ＝0.999 9）、Y＝10 913X－1 380.3      均没有影响。
        （R ＝0.999 2）、Y＝10 454X－816.53（R ＝0.999 5）、Y＝        2.3  SGD-SAN 形成对甘草中主要成分在肠段吸收的
           2
                                          2
                                                      2
        20 080X+287.64（R ＝0.999 2）、Y＝5 622.2X+7 428.4（R ＝   影响
                        2
        0.999 7）、Y＝11 585X+688.82（R ＝0.999 9），上述成分质         2.3.1  含量测定方法的建立          采用HPLC法进行含量测
                                   2
        量 浓 度 分别在 3.76～150.40、3.24～129.60、0.72～28.80、       定，色谱条件及溶液制备方法参考文献[16]。参照 2020
        0.68～27.20、0.14～5.60、6.04～241.60、0.44～17.60 µg/mL   年版《中国药典》（四部）分析方法验证指导原则及文
        范围内与其峰面积线性关系良好。上述7种成分精密度                            献[16]进行方法学考察。专属性试验结果显示，供试品
        试验的RSD分别为0.29％、0.59％、0.83％、1.91％、1.95％、             溶液与混合对照品溶液在相同保留时间处有相同色谱
        1.52％、1.51％（n＝6）；重复性试验的RSD分别为2.67％、                 峰出现，各待测成分色谱峰与相邻色谱峰的分离度均大
        3.19％、3.71％、3.62％、4.01％、3.60％、4.05％（n＝6）；稳          于1.5，且阴性对照溶液对测定无干扰，表明本方法的专
        定性试验（室温放置 24 h）的 RSD分别为1.68％、0.98％、                 属性较好（图略）。以质量浓度（X）为横坐标、峰面积（Y）
        0.89％、0.34％、1.97％、0.26％、1.23％（n＝6）；平均加样回            为纵坐标进行线性回归后，得到芹糖甘草苷、甘草苷、芹
        收率分别为 96.91％～98.87％（RSD 为 1.00％，n＝6）、               糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素的回
        96.90％ ～102.52％（RSD 为 2.81％ ，n＝6）、99.06％ ～          归方程分别为 Y＝14 253X－6 612.9（R ＝0.999 6）、Y＝
                                                                                              2
        105.02％（RSD为2.92％，n＝6）、96.28％～98.68％（RSD            18 407X－11 852（R ＝0.999 8）、Y＝10 515X－1 041.4
                                                                              2

        ·340 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 3                                    中国药房    2022年第33卷第3期
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