Page 80 - 《中国药房》2022年3期

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肿瘤效果明显 。以5-FU为主的mFOLFOX6方案为目
JAK2 130 kDa
前公认治疗结肠癌的一线用药方案，因此本研究选择
p-JAK2 130 kDa 5-FU作为阳性对照药，同时选择结肠癌细胞中具有代表
性的HCT-116细胞（恶性程度较高）和Caco-2细胞（恶性
STAT3 86 kDa
程度较低）为研究对象，在细胞水平上探讨没食子醇提
p-STAT3 86 kDa 物对结肠癌细胞的抑制效果。
肿瘤细胞能够通过失控性增殖以及远处转移等方
β-actin 42 kDa
式侵犯周围组织和器官，引起器官破坏和正常细胞功能
Bax 20 kDa 损害，使机体功能失调，从而威胁生命。抑制肿瘤细胞
的增殖和迁移是控制癌症进展的重要途径 [13－14] 。因此，
Bcl-2 26 kDa
本研究首先检测没食子醇提物对结肠癌细胞增殖和迁
β-actin 42 kDa 移的抑制情况，发现随着没食子醇提物质量浓度的增
空白对照组 0.1 mg/mL 0.3 mg/mL 0.5 mg/mL 5-FU组 加，细胞增殖抑制率呈升高趋势，迁移率呈降低趋势，故
没食子醇 没食子醇 没食子醇
提物组 提物组 提物组 本研究初步判断没食子醇提物能够有效抑制结肠癌的
A. HCT-116细胞
发展。
JAK2 130 kDa 炎症微环境是导致癌症发生与进展的另一个重要
因素。肿瘤细胞生存的内环境中存在大量的炎症因子，
p-JAK2 130 kDa
其中具有代表性的包括IL-6、TNF-α等，其对肿瘤细胞的
STAT3 86 kDa 生长和转移起到正向调控作用，并诱导肿瘤血管及淋巴
[15]
管的生成，从而促进癌症的进展 。本研究中，在没食
p-STAT3 86 kDa
子醇提物作用之后细胞上清液中 IL-6、TNF-α水平显著
β-actin 42 kDa 降低，说明其改变了结肠癌细胞赖以生存的炎症环境，
可使癌细胞的代谢减慢。
Bax 20 kDa
JAK2/STAT3 信号通路被认为是“炎-癌转变”机制
Bcl-2 26 kDa 当中的一条重要信号轴，该通路中的 JAK2 和 STAT3 蛋
白在肿瘤发生过程中起到重要调控作用 [16－19] 。本研究
β-actin 42 kDa
结果显示，经没食子醇提物干预后，在细胞上清液中
空白对照组 0.1 mg/mL 0.3 mg/mL 0.5 mg/mL 5-FU组
没食子醇 没食子醇 没食子醇 IL-6、TNF-α水平降低的同时，细胞中 p-JAK2/JAK2、
提物组 提物组 提物组
B. Caco-2细胞 p-STAT3/STAT3 比值也显著降低，即 JAK2、STAT3 蛋白
图 2 各组细胞中 JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、 的磷酸化水平显著降低，导致进入细胞核内调控下游基
Bax、Bcl-2蛋白表达的电泳图 因转录的 p-STAT3 减少，随之引起细胞中促凋亡蛋白
Bax水平升高、抗凋亡蛋白Bcl-2水平下降。以上在分子
表 5 各组细胞中 JAK2、STAT3 磷酸化水平和 Bax、
水平上发生的改变也证实了JAK2/STAT3信号通路可由
Bcl-2蛋白表达水平测定结果（x±±s，n＝3）
其上游的炎症因子激活。因此，抑制炎症因子的表达能
细胞 组别 p-JAK2/JAK2 p-STAT3/STAT3 Bax/β-actin Bcl-2/β-actin
HCT-116 空白对照组 0.99±0.49 1.23±0.17 0.59±0.19 1.06±0.12 够使 JAK2/STAT3 信号通路受到抑制，同时会影响调控
0.1 mg/mL没食子醇提物组 0.88±0.10 a 0.94±0.02 a 0.69±0.18 a 0.91±0.10 a 肿瘤细胞凋亡的 Bcl-2 家族蛋白的正常表达，进而促进
0.3 mg/mL没食子醇提物组 0.72±0.04 a 0.75±0.04 a 0.77±0.02 a 0.77±0.17 a 肿瘤细胞凋亡 [20－21] 。
0.5 mg/mL没食子醇提物组 0.59±0.05 a 0.61±0.22 a 0.89±0.17 a 0.65±0.18 a
5-FU组 0.56±0.06 a 0.51±0.08 a 0.92±0.03 a 0.61±0.14 a ROS是在内质网、线粒体和过氧化物酶体等细胞器
Caco-2 空白对照组 1.19±0.11 1.09±0.14 0.48±0.04 1.41±0.31 内发生的各种生化反应中自然产生的高活性化学物质，
0.1 mg/mL没食子醇提物组 0.91±0.03 a 0.85±0.07 a 0.59±0.14 a 1.11±0.36 a 高浓度的 ROS 会通过内源性和外源性途径对肿瘤细胞
0.3 mg/mL没食子醇提物组 0.75±0.02 a 0.71±0.15 a 0.74±0.17 a 0.93±0.09 a [22]
0.5 mg/mL没食子醇提物组 0.54±0.03 a 0.67±0.26 a 0.87±0.12 a 0.68±0.09 a 产生毒性并促使细胞凋亡 。许多促氧化类化疗药物
5-FU组 0.51±0.06 a 0.58±0.14 a 0.95±0.26 a 0.59±0.07 a 的作用原理就是将 ROS 水平提高到可以促使肿瘤细胞
a：与空白对照组比较，P＜0.05 死亡的程度，即通过过度激活ROS引起肿瘤内产生氧化
4 讨论 应激和凋亡 。也有文献证实，ROS的过度活化可通过
[23]
5-FU是抗嘧啶类化疗药物，进入体内活化成脱氧核 多种信号通路网间接抑制 STAT3 的表达 [24－26] 。本研究
苷酸后，通过与胸苷酸合成酶结合并抑制此酶的活性， 中，没食子醇提物能够增加结肠癌细胞内 ROS 的表达，
导致脱氧胸苷酶缺乏和 DNA 复制障碍，尤其对消化道 且该作用具有浓度依赖趋势，说明通过过度氧化应激杀

·330 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 3 中国药房 2022年第33卷第3期