Page 58 - 《中国药房》2022年3期

牛膝-杜仲药对对小鼠巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用 Δ

高明珠 1，2，3＊ ，陈 春 ，张巧艳 ，卞 俊 ，鲍蕾蕾 （1.江西中医药大学药学院，南昌 330004；2.海军军医大学
1，2 #
1，2
3
4
第三附属医院药剂科，上海 200438；3.浙江中医药大学药学院，杭州 311402；4.海军军医大学第一附属医院
药剂科，上海 200438）

中图分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2022）03-0308-05
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.03.09

摘 要 目的 研究牛膝-杜仲药对的抗炎作用。方法 将小鼠巨噬细胞RAW264.7分为空白组、模型组、牛膝组（800 μg/mL）、杜仲
组（800 μg/mL）和牛膝-杜仲药对低、中、高浓度组（400、800、1 600 μg/mL），除空白组和模型组外，其余各组加入相应药物培养6 h
后，空白组继续加入培养基，模型组加入10 μg/mL 脂多糖（以复制炎症模型），其余各组加入相应药物和10 μg/mL 脂多糖。检测各
组细胞中炎症因子[一氧化氮（NO）、白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）]的水平，并采用金氏公式评价牛膝、杜仲
的联合作用；检测细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、环氧合酶2（COX-2）、核因子κB（NF-κB）抑制蛋白α（IκBα）的表达水平和
NF-κB p65、IκB激酶（IKK）、p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38 MAPK）、胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun N端激酶（JNK）的磷酸化
水平。结果 与空白组比较，模型组细胞中炎症因子水平以及 iNOS、COX-2 蛋白表达水平和 NF-κB p65、IKK、p38 MAPK、ERK、
JNK蛋白磷酸化水平均显著升高（P＜0.01），IκBα蛋白的表达水平显著降低（P＜0.01）；经牛膝-杜仲药对干预后，细胞中炎症因子
水平以及上述蛋白的表达水平或磷酸化水平大部分显著逆转（P＜0.05或P＜0.01），且牛膝-杜仲药对具有协同作用。结论 牛膝-
杜仲药对对RAW264.7细胞具有协同抗炎作用，其作用机制可能与抑制NF-κB/MAPK信号通路相关蛋白表达有关。
关键词 牛膝；杜仲；药对；抗炎；NF-κB/MAPK信号通路

Anti-inflammatory effect of couplet medicinals of Achyranthes bidentata-Eucommia ulmoides on mouse
macrophage RAW264.7
GAO Mingzhu 1，2，3 ，CHEN Chun ，ZHANG Qiaoyan ，BIAN Jun ，BAO Leilei （1. School of Pharmacy，Jiangxi
3
1，2
1，2
4
University of Chinese Medicine，Nanchang 330004，China；2. Dept. of Pharmacy，the Third Affiliated Hospital
of Naval Medical University，Shanghai 200438，China；3. School of Pharmacy，Zhejiang Chinese Medical
University，Hangzhou 311402，China；4. Dept. of Pharmacy，the First Affiliated Hospital of Naval Medical
University，Shanghai 200438，China）
ABSTRACT OBJECTIVE To study the anti-inflammatory effect of couplet medicinals of Achyranthes bidentata-Eucommia
ulmoides. METHODS Mouse macrophage RAW264.7 were divided into blank group，model group，A. bidentata group （800
μg/mL），E. ulmoides group（800 μg/mL）and low-，medium- and high- concentration groups of couplet medicinals of A. bidentata-
E. ulmoides（400，800，1 600 μg/mL）. Excep for blank group and model group，the other groups were added with corresponding
drugs for 6 hours；then blank group was continued to add into the medium，while model group was added into 10 μ g/mL
lipopolysaccharide （to induce the inflammatory model）；other groups were added into corresponding drugs and 10 μ g/mL
lipopolysaccharide. The levels of inflammatory factors [nitric oxide（NO），interleukin-1β（IL-1β），IL-6，tumor necrosis factor-α
（TNF-α）] were detected，and Jin’s formula was used to evaluate the effects of A. bidentata-E. ulmoides. The expression of
inducible nitric oxide synthase（iNOS），cyclooxygenase-2（COX-2），nuclear factor kappa-B（NF-κB）and inhibitor α of NF-κB
（IκBα）as well as the phosphorylation of NF-κB p65，IκB kinase（IKK），p38 mitogen-activated protein kinase（p38 MAPK），
extracellular signal-regulated kinase（ERK）and c-Jun N-terminal kinase（JNK）were determined. RESULTS Compared with blank
group，the level of inflammatory factors，protein expression of iNOS and COX-2 as well as the phosphorylation of NF-κB p65，
IKK，p38 MAPK，ERK and JNK were increased significantly（P＜0.01），while the protein expression of IκBα was decreased
significantly（P＜0.01）. After intervention of couplet medicinals of A. bidentata-E. ulmoides，the level of inflammatory factors，the
expression or phosphorylation of above proteins were reversed significantly（P＜0.05 or P＜0.01），and couplet medicinals of A.
bidentata-E. ulmoides had a synergistic effect. CONCLUSIONS The couplet medicinals of A. bidentata-E. ulmoides have
synergistic anti-inflammatory effect on RAW264.7 cells. Its mechanism may be related to the inhibition of NF-κB/MAPK signaling
pathway related protein expression.
Δ 基金项目：上海市科研计划项目（No.19ZR1456500）
＊硕士研究生。研究方向：中药药理学。E-mail：576436541@qq. KEYWORDS Achyranthes bidentata；Eucommia ulmoides；
com couplet medicinals；anti-inflammation；NF-κB/MAPK signaling
# 通信作者：副主任药师，硕士生导师。研究方向：中药药理学。 pathway
E-mail：annabao212@126.com

·308 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 3 中国药房 2022年第33卷第3期