Page 68 - 《中国药房》2022年2期
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3 讨论                                                域温度、降雨量和日照时长的影响 。本研究对 21 批
                                                                                           [4]
        3.1 色谱条件选择                                          产自7个产地的蛇床子药材进行含量测定，结果显示，21
            本研究采用超高效液相色谱法构建蛇床子药材指                           批蛇床子药材均符合 2020 年版《中国药典》规定——蛇
                                                                                                        [1]
        纹图谱，并对其中4种成分进行含量测定。与传统的高                            床子药材蛇床子素的含量不少于1.0％（即10 mg/g） ；4
        效液相色谱法相比，超高效液相色谱法分辨率更高、分                            种香豆素类成分的总含量在22.712～52.806 mg/g（外标
        析能力更强、分析时间更短，同时减少了溶剂用量，降低                           法）之间，总含量按产地排序由高至低依次为江苏省徐
        了分析成本 。本研究前期分别对色谱柱、流动相体                             州市＞湖北省宜昌市＞山东省滨州市＞江苏省盐城市＞
                   [10]
        系、检测波长、柱温等进行了考察，结果显示，在色谱柱                           山东省日照市＞河南省南阳市＞黑龙江省哈尔滨市。
        为YMC Trait C18 （2.1 mm×100 mm，1.9 μm）、流动相为甲         这可能是因为南方地区的温度、降雨量和日照时间总体
                                                                                                      [4]
        醇-水（梯度洗脱）、流速为0.20 mL/min、检测波长为248                   上更有利于蛇床子的生长和香豆素类成分的富集 。但
        nm（指纹图谱检测波长为310 nm）、柱温为30 ℃的色谱                      是，对于某些特殊类型的香豆素，北方天气可能更利于
        条件下，蛇床子药材色谱图的整体基线平稳，各色谱峰                            其富集，如黑龙江省哈尔滨市蛇床子药材中佛手柑内酯
        分离效果良好且方法重复性良好。                                     的含量明显高于其他产地。
        3.2 供试品溶液制备方法考察                                         综上所述，本研究利用超高效液相色谱法建立了蛇
            本课题组以花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素和蛇                          床子药材的指纹图谱，并建立了测定4种香豆素类成分
        床子素的含量以及各色谱峰“峰面积/称样量”为评价指                           的一测多评法，实现了对蛇床子中蛇床子素、佛手柑内
        标，考察了不同体积分数甲醇、乙醇对蛇床子中花椒毒                            酯、花椒毒素、欧前胡素含量的控制，为蛇床子药材质量
        素、佛手柑内酯、欧前胡素、蛇床子素提取效率的影响。                           标准的提升提供了参考。
        结果显示，当提取溶剂为 80％甲醇时，各待测成分色谱                          参考文献
        峰响应值高、基线平稳，提取效果最好，且色谱信息丰                            [ 1 ]  国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]. 2020年
        富。另外，本课题组还对超声提取和加热回流的提取效                                 版.北京：中国医药科技出版社2020：328-329.
        率进行了考察，发现两者的提取效率没有明显差别，故                            [ 2 ]  伍冠一，曽曼榈，吉玉芳，等.蛇床子本草考证[J].中国民
        为了操作更加简便，本研究选择超声提取。同时，本课                                 族民间医药，2017，26（4）：72-75.
        题组进一步对样品提取时间、料液比进行了考察，结果显                           [ 3 ]  田斌，瞿孝兰，林义平，等.蛇床子化学成分及药理作用研
                                                                 究进展[J].中药与临床，2020，11（1）：70-73，80.
        示，超声提取30 min已能够将样品提取完全；当料液比为
                                                            [ 4 ]  李义敏.蛇床果实香豆素类化学成分的生态地理分布及
        0.3∶20（g/mL）时，4种待测成分均已被完全提取。通过上
                                                                 其形成机理[D].上海：第二军医大学，2016：44-57.
        述考察，本课题组最终确定最优供试品溶液制备方法如
                                                            [ 5 ]  宋宜蕾，侯雪芹，郝吉福.蛇床子现代药理学作用及临床
        下：料液比为0.3∶20（g/mL），80％甲醇超声提取30 min。
                                                                 应用的研究进展[J].神经药理学报，2019，9（6）：58-63.
        3.3  指纹图谱分析                                         [ 6 ]  李昱.关于蛇床子的化学成分与药理作用研究进展[J/
            本研究基于 21 批蛇床子药材的超高效液相色谱叠                             OL].全科口腔医学电子杂志，2019，6（26）：22-23[2021-06-
        加指纹图谱，采用平均数法建立了其对照指纹图谱，并                                 17]. https：//kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=
        确认了10个共有峰。相似度评价结果显示，产自山东省                                CJFD&dbname=CJFDLAST2019&filename=QKKQ2019-
        日照市（编号 S7）和河南省南阳市（编号 S14）蛇床子药                            26013&uniplatform=NZKPT&v=okDA05iAQCTvwh_Vm-
        材样品的图谱与对照指纹图谱的相似度小于 0.999，其                              DQBdsNU8AJuCwKy187cTs8DvFoPJMSGTfQRgI7bya-
        余批次蛇床子药材样品的相似度均不小于0.999。笔者                               5p0w15.
        发现，S7与其余20批样品的差异主要表现在峰1的峰高                          [ 7 ]  沃小敏，伍冠一，王海霞.蛇床子防治骨质疏松的研究概
        或峰面积较其他批次大；而 S14 主要表现在峰 4 的峰高                            况[J].中国民族民间医药，2018，27（20）：34-38.
        或峰面积较其他批次小，这可能与药材生长的环境、采                            [ 8 ]  王倩，郑海雅，周颖，等.蛇床子素对 TRAIL 抗乳腺癌活
                                                                 性的影响及其作用机制[J].中国现代应用药学，2016，33
        收时间及产地加工方式等的差异有关。总体而言，21批
                                                                （9）：1141-1147.
        蛇床子药材的相似度均在0.99以上，说明21批蛇床子药
                                                            [ 9 ]  魏良兵，单莉，高家荣，等.一测多评结合指纹图谱法在中
        材指纹图谱相似度较高，质量比较稳定；指纹图谱的相
                                                                 药质量控制中的研究进展[J].中国基层医药，2018，25
        似度评价结果可以作为药材质量标准制定的依据。
                                                                （9）：1220-1224.
        3.4 含量测定分析                                          [10]  鲁珍娥，聂娟，鲁彩彩，等.高效液相色谱法在药品检验中
                                                    [3]
            香豆素类成分为蛇床子药材的主要活性成分 ，为                               的应用和效果[J].生物化工，2020，6（6）：170-172.
        了进一步明确不同产地蛇床子中活性成分的差异，严格                                          （收稿日期：2021-06-27  修回日期：2021-12-16）
        控制临床用蛇床子的质量，很有必要对蛇床子中所含香                                                                 （编辑：邹丽娟）
        豆素类成分进行含量测定。而香豆素类成分容易受地




        ·190 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2                                    中国药房    2022年第33卷第2期
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