Page 67 - 《中国药房》2022年2期

C18 （2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色谱柱以及柱温±2 ℃、流 佛手柑内酯和欧前胡素的平均相对保留时间分别为
速±0.02 mL/min对花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素相 0.550、0.788、0.960。
对校正因子的影响，结果见表6。结果显示，在上述条件 表7 不同色谱条件对花椒毒素等3种成分相对保留时
下，花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素相对校正因子的 间的影响
RSD均小于3.0％（n＝3），表明不同色谱仪、色谱柱以及 花椒毒素 佛手柑内酯 欧前胡素
较小变化的柱温、流速对上述3种成分的相对校正因子 项目 条件 相对保留 RSD/ 相对保留 RSD/ 相对保留 RSD/
时间 ％ 时间 ％ 时间 ％
无显著影响。
色谱仪 Waters H-Class 0.535 2.41 0.788 0.46 0.959 0.49
表6 不同色谱条件对花椒毒素等3种成分相对校正因 Agilent 1290 0.555 0.781 0.961
子的影响 Thermo Vanquish 0.560 0.786 0.968
色谱柱 YMC Trait C18 0.535 2.08 0.788 0.61 0.959 0
花椒毒素 佛手柑内酯 欧前胡素
项目 条件 Waters BEH C18 0.556 0.797 0.959
f 蛇床子素/花椒毒素 RSD/％ f 蛇床子素/佛手柑内酯 RSD/％ f 蛇床子素/欧前胡素 RSD/％
Agilent SB C18 0.538 0.789 0.959
色谱仪 Waters H-Class 0.178 7 1.85 0.257 7 0.34 0.726 3 0.57 柱温/℃ 28 0.559 2.21 0.776 1.46 0.959 0.06
Agilent 1290 0.172 2 0.257 9 0.732 5 30 0.535 0.788 0.959
Thermo Vanquish 0.175 6 0.256 3 0.734 2 32 0.545 0.799 0.958
色谱柱 YMC Trait C18 0.178 7 0.63 0.257 7 0.48 0.726 3 1.11 流速/（mL/min） 0.18 0.570 1.36 0.806 2.35 0.958 0.06
0.180 9 0.260 0 0.732 3
Waters BEH C18 0.20 0.555 0.788 0.959
0.180 4 0.258 0 0.716 3
Agilent SB C18 0.22 0.560 0.769 0.958
柱温/℃ 28 0.182 9 1.26 0.258 7 0.33 0.714 7 0.91
30 0.178 7 0.257 7 0.726 3 2.5.10 含量测定 取 21 批蛇床子药材粉末，按“2.2.2”
32 0.182 4 0.259 4 0.725 8 项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测
流速/（mL/min） 0.18 0.179 8 0.43 0.256 2 1.37 0.715 9 1.36 定，记录峰面积。采用外标法计算其中蛇床子素、花椒
0.20 0.178 7 0.257 7 0.726 3
0.22 0.180 9 0.261 2 0.735 7 毒素、佛手柑内酯、欧前胡素的含量；以蛇床子素为内参
2.5.9 色谱峰定位 根据“2.5.8”项下耐用性考察结果， 物，采用一测多评法计算花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡
以蛇床子素峰为参照峰，计算花椒毒素、佛手柑内酯和 素的含量，并计算两种测定法的相对偏差，结果见表 8。
欧前胡素的相对保留时间，结果见表7。结果显示，在不 结果显示，两种方法测定的花椒毒素、佛手柑内酯、欧前
同色谱仪、色谱柱以及较小变化的柱温、流速条件下，花 胡素含量的相对偏差[（A－B）/（A+B）×100％，式中 A 表
椒毒素、佛手柑内酯和欧前胡素相对保留时间的RSD均 示外标法结果，B表示一测多评法结果]分别在0.88％～
小于5.0％（n＝3），说明相对保留时间比较稳定，可以采 1.07％、2.22％～2.29％、0.67％～2.93％范围内，均小于
用相对保留时间对花椒毒素、佛手柑内酯、欧前胡素的 3.0％，表明一测多评法与外标法测得的含量结果无明显
色谱峰进行定位。本研究得不同色谱条件下花椒毒素、 差异，一测多评法的结果可靠性高。

表8 21批蛇床子药材中蛇床子素等4种成分的含量测定结果
蛇床子素含量/ 花椒毒素含量/（mg/g） 佛手柑内酯含量/（mg/g） 欧前胡素含量/（mg/g） 总含量/（mg/g）
编号
（mg/g） 外标法 一测多评法 相对偏差/％ 外标法 一测多评法 相对偏差/％ 外标法 一测多评法 相对偏差/％ 外标法 一测多评法 相对偏差/％
S1 35.039 2.507 2.456 1.03 1.530 1.462 2.27 11.801 11.374 1.84 50.877 50.331 0.54
S2 33.091 2.317 2.271 1.00 1.418 1.355 2.27 11.069 10.667 1.85 47.895 47.384 0.54
S3 32.793 2.309 2.263 1.01 1.422 1.359 2.27 10.922 10.538 1.79 47.446 46.953 0.52
S4 26.325 1.298 1.272 1.01 1.770 1.692 2.25 9.663 9.362 1.58 39.056 38.651 0.52
S5 22.014 1.109 1.087 1.00 1.097 1.049 2.24 9.047 8.806 1.35 33.267 32.956 0.47
S6 22.570 1.068 1.047 0.99 1.319 1.260 2.29 7.588 7.360 1.53 32.545 32.237 0.48
S7 31.089 1.496 1.466 1.01 1.520 1.453 2.25 7.694 7.408 1.89 41.799 41.416 0.46
S8 18.189 0.506 0.496 1.00 1.168 1.117 2.23 4.463 4.281 2.08 24.326 24.083 0.50
S9 24.872 1.644 1.611 1.01 1.065 1.018 2.26 9.024 8.657 2.08 36.605 36.158 0.61
S10 17.256 0.495 0.486 0.92 1.103 1.054 2.27 9.047 8.806 1.35 27.901 27.602 0.54
S11 21.271 0.830 0.814 0.97 1.383 1.322 2.26 11.135 10.766 1.68 34.619 34.173 0.65
S12 30.795 1.490 1.460 1.02 1.864 1.782 2.25 9.258 9.087 0.93 43.407 43.124 0.33
S13 14.158 0.297 0.291 1.02 1.061 1.014 2.27 9.776 9.417 1.87 25.292 24.880 0.82
S14 16.545 0.228 0.224 0.88 1.149 1.099 2.22 4.790 4.687 1.09 22.712 22.555 0.35
S15 26.964 1.490 1.460 1.02 1.162 1.110 2.29 13.217 12.786 1.66 42.833 42.320 0.60
S16 41.388 3.813 3.737 1.01 1.758 1.680 2.27 5.847 5.514 2.93 52.806 52.319 0.46
S17 28.191 2.205 2.161 1.01 1.447 1.383 2.26 5.987 5.907 0.67 37.830 37.642 0.25
S18 25.820 1.131 1.108 1.03 0.928 0.887 2.26 12.426 11.984 1.81 40.305 39.799 0.63
S19 18.706 0.895 0.877 1.02 2.765 2.645 2.22 5.821 6.115 2.46 28.187 28.343 0.28
S20 19.078 0.897 0.878 1.07 2.803 2.681 2.22 5.942 6.203 2.15 28.720 28.840 0.21
S21 19.189 0.920 0.902 0.99 2.842 2.715 2.29 6.028 5.820 1.76 28.979 28.626 0.61

中国药房 2022年第33卷第2期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2 ·189 ·