Page 58 - 《中国药房》2022年2期
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速率，从而发挥抗炎作用 。王晓燕 研究发现，灌胃桂                           余试剂均为分析纯，水为纯净水。
                                       [6]
                              [5]
        枝与白芍水煎液能够明显减轻鸡蛋清所致的大鼠足跖                             2 方法与结果
        肿胀，抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀，抗炎效果十分明                            2.1 GSZD的制备
        显。盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱为麻黄的重要成分，前                                称取桂枝 12 g、白芍 9 g、知母 12 g、防风 12 g、麻
                                        [7]
        者发挥镇痛作用，后者发挥抗炎作用 。芒果苷为知母                            黄 6 g、白术 15 g、生姜 15 g、甘草 6 g、炮附子 6 g，加水
        的主要活性成分，具有缓解喘气不舒、抗自由基氧化、抗                           1 400 mL，浸泡 30 min，武火煮沸，转文火微沸，煎煮两
        炎、抑菌和调节免疫等作用            [8－10] 。有研究表明，甘草中的          次，每次60 min，合并两次滤液，浓缩至100 mL，即得（每
        甘草苷可抑制氧化应激导致的细胞凋亡，甘草酸则可通                            1 mL中含生药0.93 g）。
                                           [11]
        过抑制氧化损伤来减少炎症因子的产生 。6-姜酚是生                           2.2 多指标成分的含量测定
        姜的主要活性成分，极具药用价值，研究发现其有显著                                采用高效液相色谱法进行测定。
                                    [12]
        的抗炎、止痛、强心、抗氧化作用 。薛宝云等 研究发                           2.2.1  对照品溶液的制备         精密称取盐酸麻黄碱、盐酸
                                                [13]
        现，防风中的5-O-甲基维斯阿米醇苷能降低发热大鼠的                          伪麻黄碱、芒果苷、芍药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米
        体温，且解热、镇痛、抗炎及抗血小板聚集作用较明显。                           醇苷、甘草酸、肉桂酸、6-姜酚对照品各适量，加甲醇溶
        基于此，本研究以盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、芒果苷、                           解，制成上述各对照品质量浓度分别为 2.016、2.024、
        芍药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸、甘草                         2.048、4.028、2.026、2.016、2.002、2.000、0.203 mg/mL 的
        酸、6-姜酚的含量和干膏得率作为提取工艺的评价指                            单一对照品溶液。取上述各单一对照品溶液适量，加甲
        标，采用层次分析法和熵权法计算复合权重，并结合                             醇稀释，制成上述各对照品质量浓度分别为201.6、202.4、
        Box-Behnken 响应面法优化 GSZD 的提取工艺，旨在为                   204.8、402.8、202.6、201.6、200.2、200.0、20.3 µg/mL 的混
        后续GSZD的研究开发提供参考。                                    合对照品溶液。
        1 材料                                                2.2.2  供试品溶液的制备         精密量取GSZD 1 mL，加入
        1.1  主要仪器                                           4倍体积的甲醇，涡旋混匀，10 000 r/min离心10 min，取
            本研究所用主要仪器包括 LC-20AT 型高效液相色                      上清液，过0.22 μm微孔滤膜，即得供试品溶液。
        谱系统及其配备的 SPD-M20A 型光电二极管阵列检                         2.2.3  阴性样品溶液的制备          按照GSZD处方量，分别
        测 器、SIL-20A 型自动进样器（日本 Shimadzu 公司），                 称取缺麻黄、缺知母、缺白芍、缺甘草、缺防风、缺桂枝、
        MS105DU型电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），                        缺生姜、缺附子、缺白术的阴性样品，按“2.1”项下方法进
        GXZ-9140MBE 型电热鼓风干燥箱（上海博迅实业有限                       行提取、浓缩，再按“2.2.2”项下方法制成阴性样品溶液。
        公司医疗设备厂），TGL16M型高速离心机（湖南凯达科                         2.2.4  色谱条件与系统适用性试验              以 Waters XSelect
        学仪器有限公司），RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生                        HSS T3（250 mm × 4.6 mm，5 μ m）为 色 谱 柱 ，以 乙 腈
        化仪器厂）等。                                            （A）-0.1％磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～5
        1.2  主要药品与试剂                                        min，95.5％B；5～8 min，95.5％B→91％B；8～13 min，
            知母饮片、甘草饮片、炮附子（黑顺片）饮片（批号分                        91％ B→82％ B；13～28 min，82％ B→80％ B；28～35
        别为 38420007、05620036、D01020009）均购自河北仁心              min，80％B→77％B；35～43 min，77％B→72％B；43～
        药业有限公司；桂枝饮片、白芍饮片、白术饮片、防风饮                           51 min，72％ B→57％ B；51～59 min，57％ B→30％ B；
        片（批号分别为200403、200402、200401、200302）均购自              59～64 min，30％B→5％B；64～70 min，5％B）；流速为
        安 国 市 安 兴 中 药 饮 片 有 限 公 司 ；麻 黄 饮 片（批 号              1.0 mL/min；检测波长为 210 nm（0～17 min，盐酸麻黄
        201911004）购自内蒙古普康药业有限公司；生姜饮片                        碱、盐酸伪麻黄碱）、254 nm（17～20 min，芒果苷）、235
        （批号 201022）购自河北楚风中药饮片有限公司。上述                        nm（20～29 min，芍药苷、甘草苷）、254 nm（29～33 min，
        所有饮片经长春中医药大学王淑敏教授鉴定，均为真品                            5-O-甲基维斯阿米醇苷）、280 nm（33～52 min，肉桂酸）、
        且符合 2020 年版《中国药典》（一部）各药项下标准 。                       235 nm（52～58 min，甘草酸）、280 nm（58～62 min，6-姜
                                                     [14]
        甘草苷、甘草酸、芍药苷、6-姜酚、芒果苷、肉桂酸、5-O-甲                      酚）；柱温为35 ℃；进样量为10 μL。取“2.2.1”～“2.2.3”
        基维斯阿米醇苷对照品（批号分别为 DST200412-009、                     项下混合对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液进样
        DSTDG000601、DSTDS007001、DST190716-027、DST190305-    测定，结果显示，盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、芒果苷、芍
        031、DST190413-045、DST190213-006，纯度均为98.0％）          药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸、甘草酸、
        均购自成都德斯特生物技术有限公司；盐酸麻黄碱、盐                            6-姜酚色谱峰峰形良好，理论板数按甘草苷峰计不低于
        酸伪麻黄碱对照品（批号分别为171241-201809、171237-                 30 000，分离度均大于1.5，阴性样品对测定无干扰，色谱
        201809，纯度分别为100.0％、99.8％）均购自中国食品药                   图见图1。
        品检定研究院；乙腈（色谱纯）购自美国 Sigma 公司；其                       2.2.5  线性关系考察        精密吸取“2.2.1”项下混合对照


        ·180 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2                                    中国药房    2022年第33卷第2期
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