Page 25 - 《中国药房》2022年2期

知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides 北省药品检验所/孙宝惠全国名老中医药传承工作室孙
Bge.的干燥根茎，味苦、甘，性寒，归肺、胃、肾经，具有清 宝惠教授鉴定，均为百合科植物知母 A. asphodeloides
热泻火、滋阴润燥的作用，常用于中医临床治疗外感发 Bge.的干燥根茎。药材样品保存于河北中医学院中药
热、内伤发热等热症 [1－2] 。现代研究发现，知母的主要化 炮制技术创新中心。28批知母药材的来源信息见表1。

学成分包括双苯吡酮类、甾体皂苷类、多糖类、木脂素类 表1 28批知母药材的来源信息
等 ，具有治疗类风湿性关节炎、糖尿病、抑郁症等作 样品编号 产地 采集时间 样品编号 产地 采集时间
[3]
用 [4－6] 。 Z1 河北保定 2020－12－20 Y1 河北保定 2020－10－22
Z2 河北保定 2020－12－20 Y2 河北保定 2020－10－22
根据繁殖生长方式的不同，知母分为栽培品和野生 Z3 河北保定 2020－12－20 Y3 河北保定 2020－10－22
品两种类型，主要分布于我国河北、山西、内蒙古、陕西、 Z4 安徽亳州 2020－10－20 Y4 河北保定 2020－10－22
Z5 安徽亳州 2020－10－20 Y5 河北石家庄 2020－11－18
吉林、河南、山东等地 。2020年版《中国药典》（一部）以 Z6 安徽亳州 2020－10－20 Y6 河北石家庄 2020－11－18
[7]
芒果苷和知母皂苷BⅡ两个成分作为知母质量控制的指 Z7 山西太原 2020－11－15 Y7 河北石家庄 2020－11－18
Z8 山西太原 2020－11－15 Y8 河北石家庄 2020－11－18
[1]
标性成分 ，但并不能全面地反映知母药材的整体质量， Z9 陕西延安 2020－10－25 Y9 山西大同 2020－10－22
也不能体现知母栽培品与野生品的差异。 Z10 陕西延安 2020－10－25 Y10 山西大同 2020－10－22
Z11 陕西延安 2020－10－25 Y11 山西太原 2020－10－22
本研究采用高效液相色谱法对知母栽培品和野生
Z12 山东烟台 2020－11－21 Y12 山西太原 2020－10－22
品进行化学成分分析，建立知母栽培品和野生品的指纹 Z13 山东烟台 2020－11－21 Y13 内蒙古赤峰 2020－11－10
Z14 山东烟台 2020－11－21 Y14 内蒙古赤峰 2020－11－10
图谱；同时在此基础上，建立知母中新芒果苷、芒果苷、
异芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ、知母皂苷Ⅰ、知 2 方法与结果
母皂苷 AⅢ共 7 个化学成分的含量测定方法，通过多成 2.1 色谱条件
分含量测定和化学模式识别分析，比较知母栽培品与野 以 InertSustain C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱
生品的化学成分差异，以期为寻求更优质的知母资源提 柱，以乙腈（A）-0.1％甲酸溶液（B）为流动相进行梯度洗
供参考。 脱（0～5 min，5％A→7％A；5～12 min，7％A→15％A；
1 材料 12～20 min，15％A→20％A；20～23 min，20％A→23％A；

1.1 主要仪器 23～36 min，23％A；36～40 min，23％A→29％A；40～
本研究所用主要仪器包括 1260 型高效液相色谱仪 43 min，29％A→35％A；43～51 min，35％A→46％A；
及其配套的G4260B型蒸发光散射检测器、G7111A型四 51～60 min，46％A→95％A）；流速为 1.0 mL/min；柱温
元梯度泵、G7129A 型自动进样器、OpenLab CDS2.3 色 为20 ℃；漂移管温度为70 ℃；雾化温度为90 ℃；载气流
谱工作站（美国 Agilent 公司），JP-060S 型超声波清洗仪 速为1.6 mL/min；进样量为10 μL。
（深圳洁盟清洗设备有限公司），ME204E 型十万分之一 2.2 混合对照品溶液的制备
电子天平、BSA224S-CW型电子分析天平（德国Sartorius 分别精密称取新芒果苷、芒果苷、异芒果苷、知母皂
公司），Milli-Q型超纯水机（美国Millipore公司）等。 苷 BⅡ、知母皂苷 BⅢ、知母皂苷Ⅰ、知母皂苷 AⅢ对照
1.2 主要药品与试剂 品适量，置于同一5 mL量瓶中，加70％乙醇溶解、定容，
新芒果苷对照品（批号 19072315，纯度≥98％）、芒 制 成 上 述 成 分 质 量 浓 度 依 次 为 0.428、0.395、0.023、
果苷对照品（批号 19040123，纯度≥98％）、异芒果苷对 0.583、0.073、0.063、0.104 mg/mL的混合对照品溶液。
照品（批号 19072905，纯度≥98％）、知母皂苷 BⅡ对照 2.3 供试品溶液的制备
品（批号 19052605，纯度≥98％）、知母皂苷 BⅢ对照品 精密称取知母栽培品或野生品药材粉末（粉碎，过
（批号20052209，纯度≥96％）、知母皂苷Ⅰ对照品（批号 60 目筛，下同）0.50 g，置于具塞锥形瓶中，按照料液比

20052405，纯度≥98％）、知母皂苷 AⅢ对照品（批号 1 ∶ 40（g/mL）精密加入 70％乙醇，称定质量，超声（功率
19040108，纯度≥98％）均购自成都曼思特生物科技有 300 W，频率 40 kHz）提取 30 min，室温冷却，再次称定
限公司；甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）均购自赛默飞世 质量，用 70％乙醇补足减失的质量，离心（转速 13 000
尔科技（中国）有限公司；其余试剂均为分析纯，水为超 r/min，时间 10 min）两次，取上清液，过 0.22 μm 微孔滤
纯水。 膜，即得。
知母药材共 28 批（编号 Z1～Z14、Y1～Y14），其中 2.4 知母药材指纹图谱的建立与分析
Z1～Z14 为知母栽培品、Y1～Y14 为知母野生品，经河 2.4.1 精密度试验 精密称取知母药材粉末（编号 Z1）

中国药房 2022年第33卷第2期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2 ·147 ·