Page 129 - 《中国药房》2022年2期
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2.4 T1AM与毒蕈碱受体结合减少膀胱收缩                             肌缺血再灌注模型进行实验，发现低浓度T1AM可缩小
            毒蕈碱受体广泛存在于副交感神经节后纤维支配                          缺血再灌注损伤模型大鼠的心脏梗死面积，且不影响其
        的效应器细胞上，分为5个亚型。毒蕈碱受体在中枢神                           血流动力学参数，但高浓度T1AM无此效果；此外，PKC
        经系统中表达，在记忆和疼痛回路中起主要作用，在外                           抑制剂白屈菜红碱和K -ATP通道阻滞剂格列本脲可消
                                                                                +
        周参与平滑肌收缩、外分泌腺和内分泌腺分泌等生物学                           除T1AM介导的心脏保护作用。由此该研究团队推测，
        过程。有学者利用毒蕈碱受体过表达的中国仓鼠卵巢                            T1AM 可通过 PKC/K -ATP 通道来调节线粒体的渗透
                                                                              +
        细胞CHO进行研究发现，T1AM可以抑制毒蕈碱受体激                         性，从而减轻心肌缺血再灌注损伤，上述结果与本课题
        动剂碳酰胆碱诱导的大鼠膀胱收缩，提示T1AM是毒蕈                          组前期研究结果一致 。
                                                                             [7]
                                   [49]
        碱受体弱的、非选择性的拮抗剂 。                                   2.7 T1AM通过AMPK信号通路促进脂肪（细胞）分解
        2.5 T1AM 通过 FoxO1 信号通路减少心肌缺血再灌注                    2.7.1 T1AM 通过 AMPK/ACC 信号通路促进脂肪分
        损伤并诱导肌细胞萎缩                                         解    Rogowski 等 以小鼠胚胎成纤维细胞 3T3-L1 和人
                                                                          [54]
        2.5.1 T1AM通过Akt/FoxO1信号通路减少心肌缺血再                   肝癌细胞 HepG2 为研究对象进行实验，发现 3T3-L1 细
        灌注损伤      心肌缺血再灌注损伤是缺血性心脏病溶栓                       胞经 T1AM 处理后脂质沉积减少，HepG2 细胞经 T1AM
        或者介入治疗后，影响临床治疗效果的重要因素 。在
                                                  [50]
                                                           处理后脂肪分解增加，同时 AMPK 和 ACC 蛋白的磷酸
        心肌缺血再灌注损伤过程中，T1AM 可通过 Akt/FoxO1
                                                           化水平有所升高，推测细胞脂肪分解作用可能与该化合
        信号通路来调控心肌细胞代谢，从而减少其凋亡，最终
                                                           物激活 AMPK/ACC 信号通路而引起脂肪代谢变化有
        起到保护心肌的作用。本课题组前期研究首先建立了
                                                           关。此外，另一项研究利用小鼠肌细胞 C2C12 进行实
        缺氧/复氧诱导的人心肌细胞AC-16损伤模型，发现低浓
                                                           验，结果提示，T1AM可明显减低C2C12细胞耗氧量，通
        度的T1AM可提高损伤心肌细胞的活力，显著降低损伤
                                                           过增加腺苷一磷酸/腺苷三磷酸比例，激活 AMPK 磷酸
        心肌细胞的耗氧率和凋亡率；其次，通过转录组学测序
                                                           化，使肉碱棕榈酰转移酶和丙酮酸脱氢酶激酶表达上
        技术检测 T1AM 对缺氧/复氧损伤心肌细胞转录组的影
                                                           调，ACC和丙酮酸脱氢酶磷酸酶表达下调，从而引起脂肪
        响，发现差异基因可富集到 FoxO1 信号通路上 ；最后，
                                                [7]
                                                           动员 。由此可见，T1AM可通过激活AMPK/ACC信号
                                                               [55]
        通过实时定量聚合酶链反应技术和免疫印迹法检测
                                                           通路来促进脂肪分解，并减少细胞脂质沉积。
        FoxO1、Akt、Glut1、Bcl-2、Bax 基因和 Akt/FoxO1 信号通
                                                           2.7.2 T1AM 通过 AMPK/FoxO1/脂肪甘油三酯脂肪酶/
        路相关蛋白的表达水平，证实T1AM可以通过上述信号
                                                           单酰基甘油脂肪酶信号通路分解脂肪细胞                      肥胖是脂
        通路使 AC-16 细胞代谢降低，从而减少其凋亡 ，为心
                                                 [51]
                                                           肪细胞在白色脂肪中的聚集。Kim等 通过诱导小鼠胚
                                                                                           [56]
        肌缺血再灌注损伤的治疗提供了新的思路。
                                                           胎成纤维细胞3T3-L1脂滴积累，研究T1AM分解脂肪的
        2.5.2 T1AM通过FoxO1信号通路诱导肌细胞萎缩 当
                                                           机制，结果发现，T1AM 可通过激活 AMPK/FoxO1/脂肪
                                                     [52]
        细胞的分解代谢多于合成代谢时，会诱发肌肉萎缩 。
                                                           甘油三酯脂肪酶/单酰基甘油脂肪酶信号通路将甘油三
            [53]
        Ju等 以小鼠肌细胞C2C12为研究对象进行实验发现，
                                                           酯分解为游离脂肪酸和甘油，这种作用可以被脂肪甘油
        经 T1AM 处理后，C2C12 细胞直径减小，去除 T1AM 9 h
                                                           三酯脂肪酶抑制剂 ATGListatin 显著抑制；此外，T1AM
        后，C2C12 细胞直径基本恢复正常；免疫印迹实验结果
                                                           还可通过 AMPK/ACC/肉毒碱棕榈酰转移酶 1 信号通路
        提示，经 T1AM 处理后，C2C12 细胞合成代谢减少[磷酸
        化 Akt1/Akt1、磷酸化雷帕霉素靶蛋白（mammalian tar-              来促进游离脂肪酸进入线粒体并发生β氧化，从而提供
        get of rapamycin，mTOR）/mTOR、磷酸化核糖体蛋白 S6            能量。
        激 酶（ribosomal protein S6 kinase，S6K）/S6K 降 低 了     2.8 T1AM作用于SIRT影响体质量、神经细胞
        44％～56％，热休克蛋白 27 和αB-晶体蛋白的表达水平                     2.8.1 T1AM 通过 SIRT 减轻体质量           SIRT 是一类具
        分别降低了26％和47％]，分解代谢增强（FoxO1蛋白表                      有多种代谢调节酶活性的蛋白家族，共有 7 个家族成
        达水平增加了2.0倍，磷酸化FoxO1/FoxO1降低了65％；                   员  [57－58] 。其中，SIRT6在维持糖脂代谢稳态中起着重要
        磷酸化FoxO3蛋白表达水平降低了42％，磷酸化FoxO3/                     作用，可减少糖酵解和甘油三酯合成               [1，35] ；SIRT4是一种线
        FoxO3降低了39％）。综合上述实验结果分析，T1AM可                      粒体沉默调节蛋白，也是线粒体代谢的负调节因子，抑制
        通过激活 FoxO1 信号来增加分解代谢，抑制 Akt/S6K 信                  SIRT4可增强肝脏和肌肉细胞的线粒体功能并加速脂肪
                                                                 [37]
                                                                                  [59]
        号通路介导的合成代谢，从而引起肌细胞萎缩，该机制                           酸氧化 。Assadi-porter等 研究发现，按10 mg/（kg·d）
        为T1AM在肌肉肥大患者的治疗应用奠定了理论基础。                          的剂量给予小鼠 T1AM，7 d 后其体质量较对照组下降
        2.6  T1AM 通过 PKC/K -ATP 通道调节线粒体渗透性                 10％；按 25 mg/（kg·d）的剂量给予小鼠 T1AM，7 d 后其
                             +
        从而减轻心肌缺血再灌注损伤                                      体质量较对照组下降18％；此外，与对照组比较，T1AM
                    [16]
            Sabina 等 以雄性 Wistar 大鼠为研究对象，建立心                组小鼠体内的代谢物（乳酸、丙氨酸、琥珀酸等）含量、相

        中国药房    2022年第33卷第2期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2  ·247 ·
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