Page 103 - 《中国药房》2022年2期

表2 FXT等成分定量分析的精密度和准确度试验结果 88.8％（RSD≤16.2％），平均基质效应为73.9％～76.1％
日间精密度（n＝15） 日内精密度（n＝5） （RSD≤20.0％）；NFXT 的平均提取回收率为 79.4％～
理论质量浓度/
待测成分 实测质量浓度 RSD/ RE/ 实测质量浓度/ RSD/ RE/
（ng/mL） 112.0％（RSD≤15.0％），平 均 基 质 效 应 为 95.4％ ～
（x±s）/（ng/mL） ％ ％ （x±s）/（ng/mL） ％ ％
FXT 5.00 4.9±0.3 7.0 －2.0 5.2±0.1 1.9 4.0 119.0％（RSD≤13.9％）；SERT 的平均提取回收率为
15.0. 16.1±2.2 13.4 7.2 17.8±2.5 14.0 14.5 83.7％ ～101.0％（RSD≤13.2％），平 均 基 质 效 应 为
250. 261.0±26.6 10.2 10.5 242.0±28.2 11.7 －3.0
450. 448.0±19.4 4.3 －3.0 456.0±20.4 4.5 1.5 96.3％～108.0％（RSD≤12.9％）；内标的平均提取回收
NFXT 5.00 5.0±0.3 6.0 －0.6 5.2±0.5 9.6 5.0 率为 92.1％（RSD＝12.3％），平均基质效应为 90.1％
15.0. 16.9±0.3 1.8 12.5 16.8±2.2 13.1 11.2
250. 259.0±30.1 11.6 3.7 252.0±29.1 11.5 0.8 （RSD＝11.0％）。结果见表4。
450. 493.0±55.6 11.3 －9.6 452.0±29.3 6.5 0.4 表4 不同质量浓度质控样品的提取回收率和基质效应
SERT 5.00 4.9±0.2 4.1 －1.7 5.0±0.3 6.0 1.0 试验结果（n＝6）
15.0. 15.2±0.6 3.9 1.5 17.2±2.4 13.9 14.7
250. 240.0±10.9 4.5 －4.0 255.0±21.9 8.6 1.8 待测成分 理论质量浓度/（ng/mL） 提取回收率/％ 基质效应/％
450. 470.0±12.6 2.7 4.4 460.0±16.7 3.6 2.5 结果（x±s） RSD 结果（x±s） RSD
FXT 15.0 88.8±14.3 16.1 75.8±15.3 20.0
450、250、15.0 ng/mL的质控样品溶液，分别于－30 ℃冷 250. 83.6±10.0 12.0 73.9±13.5 18.2
冻保存 8 d、反复冻融（－30 ℃～室温）3 次后按“2.2”项 450. 63.7±10.3 16.2 76.1±14.4 18.9
NFXT 15.0 112.0±14.4 12.9 95.4±7.5 7.8
下方法处理，再按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析， 250. 102.0±13.9 13.6 105.0±14.6 13.9
记录峰面积。以实测质量浓度与理论质量浓度进行比 450. 79.4±11.9 15.0 119.0±13.6 11.4
SERT 15.0 101.0±13.1 13.0 99.9±8.8 8.8
较，用 RE 考察准确度。每样品平行操作 6 次。结果显
250. 91.2±12.0 13.2 108.0±13.9 12.9
示，各样品的 RSD 均不高于 11.5％，RE 为－4.0％～ 450. 83.7±10.4 12.4 96.3±11.4 11.8
内标 800. 92.1±11.4 12.3 90.1±9.9 11.0
11.0％，表明样品在上述各种条件下稳定性良好。结果
2.4.6 残留效应考察 取“2.1.3”项下空白胎盘灌流液
见表3。
180 μL，按“2.1.4”项下方法制备质量浓度为500.0 ng/mL
表3 不同质量浓度质控样品的稳定性试验结果（n＝6）
的样品溶液，按“2.2”项下方法处理后，再按“2.3”项下色
－30 ℃冷冻保存8 d 反复冻融3次
理论质量浓度/
待测成分 实测质量浓度/ RSD/ RE/ 实测质量浓度/ RSD/ RE/ 谱与质谱条件进样分析。取空白胎盘灌流液适量，按
（ng/mL）
（x±s）/（ng/mL） ％ ％ （x±s）/（ng/mL） ％ ％ “2.1.4”项下方法制备质量浓度为 0 ng/mL 的样品溶液，
FXT 15.0 16.1±1.0 6.2 7.0 14.5±1.0 6.8 －3.0
250. 264.0±14.2 5.4 6.0 258.0±12.4 4.8 3.0 同法测定，考察方法的残留效应。每样品平行测定5次。
450. 456.0±18.1 4.0 1.0 453.0±22.2 4.9 1.0 结果显示，空白胎盘灌流液色谱图中未见明显色谱峰。
NFXT 15.0 16.7±1.9 11.5 11.0 14.5±1.0 6.7 －4.0
250. 260.0±10.1 3.9 4.0 249.0±14.8 5.9 0. 2.5 胎盘透过率的检测
450. 461.0±22.7 4.9 2.0 443.0±20.5 4.6 －2.0 2.5.1 胎盘纳入与排除标准 本研究中胎盘的纳入标
SERT 15.0 14.9±1.6 10.5 －1.0 15.0±1.1 7.2 0. 准为：（1）经阴道自然分娩或剖宫产娩出的新鲜胎盘；
250. 249.0±15.9 6.4 0. 239.0±14.0 5.9 －4.0
450. 452.0±25.8 5.7 0. 450.0±24.5 5.4 0. （2）足月生产（妊娠37～41周）娩出的新鲜胎盘；（3）结构
2.4.5 提取回收率和基质效应考察 取“2.1.5”项下质 完整且胎盘小叶无明显破损，胎膜、羊膜完整的胎盘；
量浓度分别为450、250、15.0 ng/mL的质控样品溶液，每 （4）无基础疾病妊娠期妇女娩出的胎盘。排除标准为：
质量浓度平行 6 份，按“2.2”项下方法处理后，再按“2.3” （1）经人工剥离的胎盘；（2）经医师判断需要进行病理检
项下色谱与质谱条件进样分析，记录峰面积 A。取 查的胎盘；（3）患有基础代谢性疾病或传染性疾病妊娠
“2.1.3”项下空白胎盘灌流液，按“2.2”项下方法处理后， 期妇女娩出的胎盘；（4）分娩超过10 min的胎盘。

取上清液180 μL作为空白基质，加入“2.1.2”项下4 500、 2.5.2 胎盘来源及灌注模型建立 在获取胎盘前已征
2 500、150 ng/mL 的质控工作溶液各 20.0 μL，每质量浓 得妊娠期妇女或家属知情同意，并与之签署了胎盘处置
度平行 6 份，按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析，记 告知书。本研究方案经医院伦理委员会批准，伦理编号
录峰面积B。取水180 μL代替空白胎盘灌流液，按“2.1.5” 为（2016）伦审 L 第 5-1 号。选择 2017 年 3 月－2020 年 9
项下方法制备质量浓度分别为 450、250、15.0 ng/mL 的 月昆明医科大学第一附属医院妇产科提供的胎盘，按如
质控样品溶液，每质量浓度平行 6 份，按“2.2”项下方法 下方法建立胎盘灌注模型：根据胎盘的结构和功能特
处理后，再按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析，记录 点，采集刚分娩出的胎盘，选取其中一块完整的胎盘绒
峰面积 C。提取回收率＝A/B×100％，基质效应＝B/C× 毛小叶，建立母体面和胎儿面（子体面）的双向循环，根
100％。结果显示，FXT 的平均提取回收率为 63.7％～ 据实验设计使用含目标物质的胎盘灌流液替代人体血

中国药房 2022年第33卷第2期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2 ·221 ·