Page 42 - 《中国药房》2022年1期

表 3 不同产地吴茱萸水提物对 L02 细胞的抑制情况
（n＝6） 1.5
组别 OD值（x±s） 细胞抑制率/％
1.0
阴性组 1.098±0.069
吴茱萸S1水提物组 0.715±0.036 a 34.87 0.5
吴茱萸S2水提物组 0.352±0.031 a 67.95 VIP值
吴茱萸S3水提物组 0.712±0.023 a 35.09 0
吴茱萸S4水提物组 0.817±0.053 a 25.60
－0.5
吴茱萸S5水提物组 0.835±0.069 a 23.96
吴茱萸S6水提物组 0.986±0.018 a 10.17 －1.0
吴茱萸S7水提物组 0.849±0.043 a 22.64 峰8 峰3 峰23 峰2 峰7 峰4 峰12 峰9 峰19 峰5 峰17 峰26 峰10 峰15 峰20 峰1 峰6 峰14 峰21 峰27 峰24 峰13 峰22 峰25 峰11 峰18 峰16
吴茱萸S8水提物组 0.595±0.033 a 45.79
吴茱萸S9水提物组 0.438±0.033 a 60.12 图5 吴茱萸水提物各色谱峰与L02细胞抑制率的VIP
吴茱萸S10水提物组 0.527±0.017 a 51.98 直方图
吴茱萸S11水提物组 1.024±0.018 b 6.68 得到高纯度制备液，于 40 ℃条件下浓缩，经冷冻干燥
吴茱萸S12水提物组 0.756±0.066 a 31.17
吴茱萸S13水提物组 1.001±0.020 a 8.84 后，得到白色固体，即为峰8对应化学成分。经高效液相
吴茱萸S14水提物组 0.928±0.011 a 15.48 色谱分析后发现，该化合物纯度较高（约为 93％），其色
吴茱萸S15水提物组 1.013±0.004 b 7.69 谱图（图略）中未见其他明显杂质峰。进一步进行结构
吴茱萸S16水提物组 1.004±0.013 a 8.53
鉴定发现，该化合物为类白色固体，易溶于水、甲醇；电
a：与阴性组比较，P＜0.01；b：与阴性组比较，P＜0.05
喷 雾 质 谱（ESI-MS）为 质 荷 比（m/z）381[M + Na] ，
+
表4 吴茱萸水提物UPLC指纹图谱与L02细胞抑制率
－
1
357[M-H] ；H-NMR（500 MHz，D2O）δ：7.41（1H，d，J＝
的关联度及关联序
15.9 Hz，H-7′），6.98（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2′），6.93（1H，
关联序 峰号 关联度 关联序 峰号 关联度
1 8 0.878 0 15 21 0.820 7 dd，J＝8.3，2.0 Hz，H-6′），6.81（1H，d，J＝8.2 Hz，H-5′），
2 3 0.873 8 16 26 0.818 8 6.17（1H，d，J＝16.0 Hz，H-8′），4.43（1H，d，J＝3.8 Hz，
3 23 0.870 9 17 20 0.816 5 H-2），4.39（1H，dd，J＝11.6，3.5 Hz，H-6），4.24（1H，dd，
4 7 0.869 8 18 14 0.808 7 J＝11.7，5.8 Hz，H-6），4.15（1H，t，J＝3.8 Hz，H-3），4.01
5 4 0.860 8 19 10 0.798 8
6 9 0.855 4 20 24 0.796 7 （1H，td，J＝6.4，3.4 Hz，H-5），3.89（1H，dd，J＝7.3，3.8
7 12 0.854 3 21 11 0.794 6 Hz，H-4）；C-NMR（126 MHz，D2O）δ：175.9（C-1），169.3
13
8 2 0.847 9 22 13 0.792 8 （C-9′），146.9（C-4′），146.0（C-7′），144.1（C-3′），126.8
9 19 0.843 7 23 22 0.792 0
10 6 0.836 1 24 27 0.767 0 （C-1′），122.7（C-6′），116.0（C-5′），115.0（C-2′），113.9
11 15 0.835 9 25 25 0.748 7 （C-8′），72.2（C-2），71.7（C-4），70.7（C-3），68.6（C-5），
12 5 0.829 2 26 16 0.731 8 65.3（C-6）。以上波谱数据与文献[21]报道基本一致，故
13 1 0.828 9 27 18 0.716 4
14 17 0.827 4 鉴定该化合物为6-O-反式咖啡酰葡萄糖酸。
3 讨论
0.12
本研究前期对不同流动相（乙腈-0.1％磷酸溶液、乙
0.10
0.08 腈-0.1％甲酸溶液、乙腈-0.1％乙酸溶液、乙腈-水）、不同
0.06 检测波长（215、254、324 nm）进行了考察，结果发现，当
回归系数 0.04 0 流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液、检测波长为 254 nm 时，
0.02
所得色谱峰的信息较全、分离度较好且峰形对称、无拖
－0.02
尾现象。
－0.04
－0.06 吴茱萸在临床上的用药方式以水煎液为主，因此，
－0.08 本文以吴茱萸水提物进行谱-毒关系研究符合临床的用
峰1 峰2 峰3 峰4 峰5 峰6 峰7 峰8 峰9 峰10 峰11 峰12 峰13 峰14 峰15 峰16 峰17 峰18 峰19 峰20 峰21 峰22 峰23 峰24 峰25 峰26 峰27
药特点，具有实际意义。L02 细胞是人胚胎期正常肝细
图4 吴茱萸水提物各共有峰与L02细胞抑制率的回归 胞，适用于药物肝毒性作用的评价 。因此，本研究采
[10]
系数图 用L02细胞进行吴茱萸水提物的体外肝毒性评价，结果
基于此，笔者参考文献[20]方法，采用制备液相色谱 显示，16 批吴茱萸水提物对 L02 细胞生长均有抑制作
法对吴茱萸水提物的峰8进行分离、纯化。色谱条件如 用，且抑制率在 6.68％～67.95％之间，表明不同产地吴
下：色谱柱为 C18制备柱（60 cm×15 cm，10 μm），流动相 茱萸药材水提物的体外肝毒性作用有所不同。
为乙腈-0.1％磷酸溶液（13 ∶ 87，V/V），检测波长为 254 目前在谱-效（毒）关系分析方法中，常用的数据处
nm，流速为 450 mL/min，柱温为 30 ℃。经反复制备后， 理模型有相关分析、回归分析、主成分分析、典型相关分

·36 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 1 中国药房 2022年第33卷第1期