Page 45 - 《中国药房》2021年22期

2.2 含量测定 0.15 1
0.12
2.2.1 色谱条件 以Venusil XBP Polar-Phenyl（250 mm× 0.09 2
AU
4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇-0.1％磷酸溶液（含 0.06
0.03
0.04％三乙胺）（1.5∶98.5，V/V）为流动相；检测波长为210 nm； 0
5
流速为1 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。 0 1 2 3 4 t，min 6 7 8 9 10
2.2.2 供试品溶液的制备 将用酸和碱溶液预处理过 A. 混合对照品溶液
0.15
的阳离子交换树脂装入交换柱（直径2 cm，柱高20 cm）， 0.12
1
0.09
并经酸-碱-酸处理（用 1 mol/L 稀盐酸缓慢流过树脂，用 AU
0.06
2
量约为树脂体积的3倍，再用酸浸泡1 h后，用水冲洗至 0.03
0
洗脱液 pH 为 5 左右；随后用 1 mol/L 氯化钠缓慢流过树
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
脂，用量与酸相同，再用碱浸泡 1 h 后，用水洗至洗脱液 t，min
B.供试品溶液（编号S1）
pH 为 9 左右；再以上述同样方法进行酸处理）后转型为 0.15
0.12
H 型。取“2.1.2”项下越婢加术汤50 mL，用1 mol/L稀盐 0.09
+
AU
酸将越婢加术汤调节pH至1～2后，以每小时1.5倍柱体 0.06
0.03
积流过已转型的交换柱，并用水冲洗至洗脱液完全无 0
色，再用 2 mol/L 氨水 100 mL 以每小时 1.5 倍柱体积洗 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
t，min
脱，收集氨水洗脱液，于 60 ℃水浴中蒸干，残渣用 2 mL C.阴性对照溶液
甲醇复溶，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供 注：1.盐酸麻黄碱；2.盐酸伪麻黄碱
Note：1.ephedrine hydrochloride；2. pseudoephedrine hydrochloride
试品溶液。
图4 盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱的混合对照品溶液、供
2.2.3 混合对照品溶液 精密称取盐酸麻黄碱、盐酸伪
试品溶液和阴性对照溶液的HPLC图
麻黄碱对照品，用甲醇溶解，制得盐酸麻黄碱、盐酸伪麻 Fig 4 HPLC chromatograms of mixed control，test
黄碱质量浓度分别为0.048、0.051 mg/mL的混合对照品 sample and negative control of ephedrine hy-
溶液。 drochloride and pseudoephedrine hydrochlo-
2.2.4 阴性对照溶液 按“2.1.2”项下方法制备缺麻黄 ride
的阴性对照药液，再按“2.2.2”项下方法制备阴性对照 2.2.7 精密度试验 取“2.2.3”项下混合对照品溶液，按
溶液。 “2.2.1”项下色谱条件进样测定 6 次，记录峰面积。结果
2.2.5 系统适用性试验 取上述混合对照品溶液、供试 显示，盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱峰面积的 RSD 分别为
品溶液（编号S1）和阴性对照溶液，按“2.2.1”项下色谱条 1.37％、1.63％（n＝6），表明仪器精密度良好。
件进样测定，记录色谱图。结果显示，盐酸麻黄碱和盐 2.2.8 重复性试验 取“2.1.2”项下越婢加术汤（编号
酸伪麻黄碱与相邻色谱峰的分离度均大于 1.5，理论板 S1），共 6 份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按
数按盐酸麻黄碱峰计均大于 3 000，阴性对照对两种成 “2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲
分的测定无干扰。结果见图4。 线法计算样品中两种成分的含量。结果显示，盐酸麻黄
2.2.6 线性关系考察 取“2.2.3”项下混合对照品溶液 碱、盐酸伪麻黄碱含量的 RSD 分别为 1.42％、1.79％
适量，加甲醇释释并定容，制得盐酸麻黄碱质量浓度分 （n＝6），表明方法重复性良好。
别为 0.98、2.4、4.8、12、24、48 μg/mL，盐酸伪麻黄碱质量 2.2.9 稳定性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
浓度分别为1.02、2.55、5.1、12.75、25.5、51 μg/mL的混合 S1），分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.2.1”项
系列对照品溶液。取上述系列溶液，按“2.2.1”项下色谱 下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，盐酸麻
条件进样测定，记录峰面积。以各待测成分的质量浓度 黄 碱 、盐 酸 伪 麻 黄 碱 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1.37％ 、
（X，μg/mL）为横坐标、对应峰面积（Y）为纵坐标进行线 1.21％（n＝6），表明供试品于室温下放置 24 h 内稳定性
性回归。结果显示，盐酸麻黄碱的回归方程为 Y＝2.0× 良好。
7
10 X－1 959.1（r＝0.999 9），盐酸伪麻黄碱的回归方程为 2.2.10 加样回收率试验 取已知含量的样品（编号
Y＝1.0×10 X－3 263.7（r＝0.999 2），表明盐酸麻黄碱、盐 S1），每份 1 mL，共 9 份，每 3 份各按已知含量的 0.5、1、2
7
酸伪麻黄碱在各自的质量浓度范围内与峰面积成良好 倍加入单一对照品溶液（取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱
的线性关系。 对照品适量，加甲醇溶解并稀释，制得盐酸麻黄碱、盐酸

中国药房 2021年第32卷第22期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22 ·2727 ·