Page 41 - 《中国药房》2021年22期
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3 讨论                                                    matory and antioxidant activities from the basolateral
            迷迭香酸、咖啡酸、绿原酸均为酚酸类化合物，其最                             fraction of caco-2 cells exposed to a rosmarinic acid
        大吸收波长分别为 329、323、327 nm        [13－15] 。三者最大吸           enriched extract[J]. J Agric Food Chem，2018，66（5）：
        收波长相近，经本课题组前期研究证实，无论选择上述                                1167-1174.
        任意波长对3种成分检测的灵敏度影响均不大，因绿原                           [ 5 ]  BISHT A，DICKENS M，RUTHERFURD-MARKWICK K，
                                                                et al. Chlorogenic acid potentiates the anti-inflammatory
        酸的最大吸收波长在三者中间，因此选择327 nm作为本
                                                                activity of curcumin in LPS-stimulated THP-1 cells[J].
        研究的检测波长。
                                                                Nutrients，2020，12（9）：2706.
            本课题组前期比较了等度洗脱和梯度洗脱对迷迭
                                                           [ 6 ]  PACIELLO F，DI PINO A，ROLESI R，et al. Anti-oxidant
        香酸、咖啡酸、绿原酸色谱峰的影响，结果显示，梯度洗
                                                                and anti-inflammatory effects of caffeic acid：in vivo evi-
        脱在分离效果和分析时间方面均优于等度洗脱，故选择
                                                                dences in a model of noise-induced hearing loss[J]. Food
        梯度洗脱。此外，本研究采用UHPLC仪，其洗脱梯度变
                                                                Chem Toxicol，2020，143：111555.
        化不宜过快、分析时间不宜过短，因为洗脱梯度变化过
                                                           [ 7 ]  SWARUP V，GHOSH J，GHOSH S，et al. Antiviral and
        快或分析时间过短可使咖啡酸的色谱峰与其他杂质色                                 anti-inflammatory effects of rosmarinic acid in an experi-
        谱峰重合，大大影响定量分析的准确性。                                      mental murine model of Japanese encephalitis[J]. Antimi-
            本课题组前期比较了不同柱温（25、35、45 ℃）对迷                         crob Agents Chemother，2007，51（9）：3367-3370.
        迭香酸、咖啡酸、绿原酸色谱峰分离的影响，结果显示，                          [ 8 ]  ABAIDULLAH M，PENG S，SONG X，et al. Chlorogenic
        柱温对三者色谱峰分离度的影响并不显著，但当柱温为                                acid is a positive regulator of MDA5，TLR7 and NF-kappaB
        45 ℃时，三者的分析时间明显缩短且柱压更低，因此选                              signaling pathways mediated antiviral responses against
        择45 ℃作为定量分析的柱温。                                         Gammacoronavirus infection[J]. Int Immunopharmacol，
            本研究采用德国 Merck 公司 Amicon Ultra-0.5 10K               2021，96：107671.
        型超滤离心管，其能在高速离心的状态下于较短的时间                           [ 9 ]  LIN S Y，WANG Y Y，CHEN W Y，et al. Hepatoprotec-
       （10～30 min）内截留分子量大于 10 000 Da 且与血浆蛋                      tive activities of rosmarinic acid against extrahepatic cho-
        白结合的化学成分，而小分子化学成分则可通过超滤                                 lestasis in rats[J]. Food Chem Toxicol，2017，108（Pt A）：
        膜，从而实现样品的快速前处理。常用的平衡透析半透                                214-223.
        膜法则需要 12～48 h 才能完成小分子成分与大分子成                       [10]  ZHU L，WANG L，CAO F，et al. Modulation of transport
                                                                and metabolism of bile acids and bilirubin by chlorogenic
        分的分离，同时还存在操作复杂、消耗样品量大、不稳定
                                                                acid against hepatotoxicity and cholestasis in bile duct
        成分易变质等不足 。与平衡透析半透膜法比较，超滤
                        [16]
                                                                ligation rats：involvement of SIRT1-mediated deacetylation
        法分析时间短、操作简单，因此本研究选择超滤法作为
                                                                of FXR and PGC-1α[J]. J Hepatobiliary Pancreat Sci，
        血浆样品处理方法。
                                                                2018，25（3）：195-205.
            血浆蛋白结合率测定结果显示，连钱草中迷迭香
                                                           [11]  关瑾，丁爽，刘芷含，等.药物-血浆蛋白结合率测定方法
        酸、咖啡酸的血浆蛋白结合率较高（＞80％），推测连钱
                                                                的研究进展[J].中国新药杂志，2014，23（10）：1149-1153.
        草与其他药物联用时，可能通过竞争性结合血浆蛋白，
                                                           [12]  邓渝，陈友生，王茜，等. HPLC法同时测定连钱草中4个
        抑制其他药物与血浆蛋白的结合，使其他药物在血液中                                酚酸类成分的含量[J].药物分析杂志，2018，38（4）：643-
        的浓度升高。                                                  647.
            综上所述，本研究所建方法操作简单、分析时间较                         [13]  张福君，张冬璇. UPLC法同时测定冠心丹参胶囊中紫草
        短，可用于测定连钱草中迷迭香酸、咖啡酸、绿原酸的血                               酸和迷迭香酸的含量[J].中国药房，2016，27（18）：2560-
        浆蛋白结合率。                                                 2562.
        参考文献                                               [14]  阮治纲，林君. HPLC法测定蒲地蓝消炎口服液中咖啡酸
        [ 1 ]  中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志：第 65                       的含量[J].中国药师，2010，13（9）：1356-1357.
             卷：第2册[M].北京：科学出版社，1977：316.                   [15]  陈言. HPLC 法测定不同产地金银花中绿原酸和木犀草
        [ 2 ]  国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]. 2020年                   苷的含量[J].北方药学，2019，16（2）：3-4.
             版.北京：中国医药科技出版社，2020：177.                      [16]  刘睿，谢跃生，潘桂湘，等.药物血浆蛋白结合率测定方法
        [ 3 ]  吴西，周雷罡，邓维，等.连钱草化学成分及药理作用研究                       的研究进展[J].天津中医药，2007，24（6）：526-528．
             进展[J].药品评价，2021，18（1）：4-7.                                   （收稿日期：2021-07-10  修回日期：2021-10-22）
        [ 4 ]  VILLALVA M，JAIME L，AGUADO E，et al. Anti-inflam-                                  （编辑：邹丽娟）



        中国药房    2021年第32卷第22期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22  ·2723 ·
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