Page 44 - 《中国药房》2021年22期

S10）。煎煮时采用相同容器并结合重复性试验以保证 对，共指认了2个共有峰，分别为甘草苷（峰11）、甘草酸
制备过程的一致性。 铵（峰 18）。因甘草酸铵色谱峰峰面积适中、分离度较
2.1.3 供试品溶液的制备 取“2.1.2”项下 10 批越婢加 好，故以甘草酸铵为参照。
术汤各4 mL，加甲醇6 mL，称定质量，超声（功率200 W， 1 200
频率 40 kHz）处理 20 min，放冷至室温，再次称定质量， 1 000
800
用甲醇补足减失的质量，摇匀，以14 000 r/min离心10 min， mV 600
U，
取上清液，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供 400
200
试品溶液。 0
2.1.4 混合对照品溶液的制备 精密称取甘草苷、甘草 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85
t，min
酸铵对照品，加甲醇溶解，制得甘草苷、甘草酸铵质量浓 图1 10批越婢加术汤的HPLC叠加指纹图谱
度分别为0.02、0.2 mg/mL的混合对照品溶液。 Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 10 batches
2.1.5 精密度试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号 of Yuebi jiazhu decoction
S1）适量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以 300
甘草酸铵为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对 mV 200
峰面积。结果显示，20 个共有峰相对保留时间的 RSD U， 100
0
均小于 1.5％（n＝6），相对峰面积的 RSD 均小于 2.5％
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85
（n＝6），表明方法精密度良好。 t，min
2.1.6 重复性试验 取“2.1.2”项下越婢加术汤（编号 图2 越婢加术汤的对照指纹图谱
Fig 2 Control fingerprint of Yuebi jiazhu decoction
S1），共 6 份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按
“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以甘草酸铵为参照，计 0.10
0.08 18
算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示， AU 0.06
0.04
20 个共有峰相对保留时间的 RSD 均小于 1.5％（n＝6）， 0.02 11
0
相对峰面积的 RSD 均小于 2.5％（n＝6），表明方法重复 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85
t，min
性良好。 注：11.甘草苷；18.甘草酸铵
2.1.7 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号 Note：11. liquiritin；18. ammonium glycyrrhetate
S1），分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1”项 图3 甘草苷、甘草酸铵混合对照品的HPLC图
下色谱条件进样测定，以甘草酸铵为参照，计算各共有 Fig 3 HPLC chromatogram of liquiritin and ammo-
峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，20个共有 nium glycyrrhetate mixed control
峰相对保留时间的 RSD 均小于 1.5％（n＝6），相对峰面 2.1.10 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度
积的 RSD 均小于 2.5％（n＝6），表明供试品于室温下放 评价系统（2012 版）》对 10 批越婢加术汤样品进行相似
置24 h内稳定性良好。 度评价。结果显示，与对照指纹图谱（R）相比，10批样品
2.1.8 指纹图谱的建立 取“2.1.2”项下 10 批越婢加术 的相似度均大于 0.92，表明 10 批样品的质量差异较小。
汤，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项 结果见表2。
下色谱条件进样测定，记录色谱图。将10批越婢加术汤 表2 10批越婢加术汤的相似度评价结果
的色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 Tab 2 Similarity evaluation results of 10 batches of
（2012 版）》进行分析，以 S1 为参照图谱（该批样品的色 Yuebi jiazhu decoction
谱信息较多），采用中位数法，设置时间窗宽度为0.1 min， 编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 R
对色谱峰进行多点校正和全峰匹配，得到10批越婢加术 S1 1.000 0.746 0.757 0.813 0.973 0.826 0.936 0.935 0.778 0.977 0.923
S2 0.746 1.000 0.955 0.925 0.742 0.967 0.790 0.904 0.980 0.774 0.933
汤的叠加指纹图谱和对照指纹图谱（R）。结果显示，10 S3 0.757 0.955 1.000 0.971 0.764 0.930 0.751 0.917 0.971 0.754 0.936
批越婢加术汤共有20个共有峰，详见图1、图2。 S4 0.813 0.925 0.971 1.000 0.835 0.911 0.792 0.947 0.952 0.808 0.954
S5 0.973 0.742 0.764 0.835 1.000 0.827 0.924 0.942 0.786 0.969 0.926
2.1.9 共有峰的指认 经与混合对照品色谱图[由于甘
S6 0.826 0.967 0.930 0.911 0.827 1.000 0.880 0.932 0.978 0.850 0.964
草苷、甘草酸铵与盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱的结构存 S7 0.936 0.790 0.751 0.792 0.924 0.880 1.000 0.903 0.828 0.945 0.922
在差异，无法采用相同的色谱条件进行检测，因此选择 S8 0.935 0.904 0.917 0.947 0.942 0.932 0.903 1.000 0.921 0.944 0.991
S9 0.778 0.980 0.971 0.952 0.786 0.978 0.828 0.921 1.000 0.794 0.955
甘草苷、甘草酸铵为对照。取“2.1.4”项下混合对照品溶 S10 0.977 0.774 0.754 0.808 0.969 0.850 0.945 0.944 0.794 1.000 0.930
液，按“2.1.1”项下色谱条件进样，得到色谱图（图 3）]比 R 0.923 0.933 0.936 0.954 0.926 0.964 0.922 0.991 0.955 0.930 1.000

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