Page 60 - 《中国药房》2021年21期
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两者的混合加权法计算出各指标的权重系数，然后结合                            处理30 min，放冷；再次称定质量，用80％甲醇补足减失
        Box-Behnken 响应面法优化酒赤芍的炮制工艺，并通过                      的质量，摇匀，过0.22 μm微孔滤膜，取续滤液，即得。
        体外抗凝血实验初步考察按最优炮制工艺所制备的酒                             2.1.3 阴性对照溶液        以80％甲醇作为阴性对照溶液。
        赤芍的药效，为赤芍饮片的炮制和临床应用提供参考。                            2.2 酒赤芍的制备方法
        1 材料                                                    取赤芍饮片 200 g，加黄酒 28 g，拌匀，闷润一定时
        1.1 主要仪器                                            间，然后置于炒药机内，在一定温度下炒制一定时间，取
            本研究所用的主要仪器包括 Prominence-ILC-2030                出，放凉，即得。
        型 高 效 液 相 色 谱（HPLC）仪（日 本 Shimadzu 公 司）、             2.3 酒赤芍中4种指标成分含量测定方法的建立
        MTN-Ⅱ型半自动凝血分析仪（长春市曼特诺医疗器械                           2.3.1  色谱条件与系统适用性试验              以 Agilent Eclipse
        有限公司）、JA2603B型千分之一电子天平（上海天美天                        XDB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇
        平仪器有限公司）、FA1004B型万分之一电子天平（上海                       （A）-0.1％磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～20
        佑科仪器仪表有限公司）、DHG-9053A型电热鼓风干燥                        min，6％A→18％A；20～35 min，18％A→20％A；35～
        箱（上海一恒科学仪器有限公司）、FST-Ⅲ-20s型普力菲                       70 min，20％ A；70～75 min，20％ A→95％ A；75～85
        尔超纯水机（上海富诗特仪器设备有限公司）、KQ3200E                        min，95％A；85～90 min，95％A→5％A；90～100 min，
        型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、MS-5 型                         5％A）；流速为 1.0 mL/min；柱温为 28 ℃；检测波长为
        炒药机（常州市金坛迈斯机械有限公司）、HT-866迷你型                        230 nm；进样量为10 μL。取“2.1”项下各溶液（其中酒赤
        红外测温仪（广州市宏诚集业电子科技有限公司）等。                            芍样品是按“2.5”项下响应面实验中 8 号方案制备，下
        1.2 主要药品与试剂                                         同），分别按此色谱条件进样测定，记录色谱图（图 1）。
            赤芍饮片（批号HML20190722-03）购自吉林国安药                   结果显示，各待测成分均达到基线分离，各待测成分色
        业有限公司，经长春中医药大学药学院中药鉴定教研室                            谱峰与相邻色谱峰的分离度均大于 1.5，理论板数均大
        翁丽丽教授鉴定为毛茛科植物芍药 P. lactiflora Pall.的                于 10 000，且阴性对照溶液对测定无干扰，表明本方法
        干燥根。氧化芍药苷对照品（批号P12N9S74762，纯度≥                      的适用性较好。
        98％）、芍药内酯苷对照品（批号 Y21A9H59553，纯度≥                            100
        91.4％）、芍药苷对照品（批号 L07M9Q60533，纯度≥
                                                                     75
        98％）、苯甲酸对照品（批号Z18S7H21155，纯度≥98％）
        均购自上海源叶生物技术有限公司；活化部分凝血活酶                                    mV  U，  50              苯甲酸
        时间（APTT）检测试剂盒（批号B202005B）、凝血酶时间                                          芍药内酯苷 芍药苷
                                                                     25
        （TT）检测试剂盒（批号D202005A）、凝血酶原时间（PT）                                      氧化芍药苷
                                                                      0
        检测试剂盒（批号 A202008A）均购自赛奥生物科技（青                                  0  10  20  30  40  50  60  70
        岛）有限公司；磷酸、甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，                                                 t，min
                                                                               a.混合对照品溶液
        水为超纯水。
                                                                    150
        1.3  动物                                                                        芍药苷
            本研究所用动物为 SPF 级健康 ICR 小鼠，共 18 只，                         100
        雄性，4～6周龄，体质量18～22 g，购自长春市亿斯实验                               mV  U，
        动物技术有限责任公司，实验动物生产许可证号为                                       50          芍药内酯苷       苯甲酸
                                                                              氧化芍药苷
        SCXK（吉）2020-0002。小鼠饲养于温度为（24±2）℃、
                                                                      0
        12 h 光照/12 h 黑暗的动物房内，予以常规饲料饲养，自                                0  10  20  30  40  50  60  70
        由饮水、进食。小鼠适应性饲养1周后用于实验。                                                     t，min
                                                                                b.供试品溶液
        2 方法与结果                                                     100
        2.1 溶液的制备
                                                                     75
        2.1.1  混合对照品溶液         精密称取氧化芍药苷、芍药内
                                                                    mV  50
        酯苷、芍药苷、苯甲酸对照品各适量，置于同一量瓶中，                                   U，
        加甲醇溶解并制成上述成分质量浓度分别为 0.108 6、                                 25
        0.194 0、0.134 8、0.124 7 mg/mL 的混合对照品溶液，                       0
        备用。                                                            0  10  20  30  40  50  60  70
                                                                                  t，min
        2.1.2  供试品溶液       取酒赤芍样品粗粉（过二号筛，下                                    c.阴性对照品溶液
        同）0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入 80％                               图1 系统适用性试验的HPLC图
        甲醇 25 mL，称定质量，超声（功率 250 W，频率 40 kHz）                Fig 1 HPLC chromatograms of system suitability test


        ·2614 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 21                                 中国药房    2021年第32卷第21期
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