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表1 各组大鼠肝组织损伤指数测定结果(x±±s,n=10) 表 3 各组大鼠肝组织中 NLRP3、ASC、pro-caspase-1、
Tab 1 Liver tissue injury index of rats in each group RIP1、RIP3、MLKL 蛋白表达水平测定结果(x±±
(x±±s,n=10) s,n=10)
组别 损伤指数 组别 损伤指数 Tab 3 Protein expression of NLRP3,ASC,pro-cas-
正常组 0.33±0.50 健脾益气方高剂量组 1.78±0.63 ## pase-1,RIP1,RIP3 and MLKL in liver tissue
模型组 3.67±0.47 ** NLRP3抑制剂组 1.22±0.79 ## of rats in each group(x±±s,n=10)
健脾益气方低剂量组 2.89±0.31 ## caspase-1抑制剂组 1.11±0.57 ##
健脾益气方中剂量组 1.56±0.50 ## NLRP3/ ASC/ pro-caspase-1/ RIP1/ RIP3/ MLKL/
组别 GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH
注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.01
**
##
正常组 0.27±0.01 0.66±0.06 0.54±0.04 0.63±0.01 0.72±0.06 0.33±0.01
Note:vs. normal group, P<0.01;vs. model group,P<0.01
##
**
模型组 0.69±0.07 1.09±0.07 0.81±0.01 ** 0.74±0.03 * 0.94±0.09 0.66±0.08 *
**
**
*
3.2 健脾益气方对肝癌模型大鼠血清中 TNF-α、IL-1β 健脾益气方低剂量组 0.38±0.03 0.53±0.04 0.56±0.03 ## 0.64±0.04 # 0.72±0.08 0.55±0.06
##
#
##
##
#
##
含量的影响 健脾益气方中剂量组 0.32±0.01 0.77±0.03 0.60±0.03 ## 0.66±0.02 # 0.74±0.06 0.56±0.05
健脾益气方高剂量组 0.43±0.02 0.89±0.05 0.62±0.03 ## 0.60±0.02 ## 0.69±0.06 0.51±0.05 #
#
##
##
与正常组比较,模型组大鼠血清中 TNF-α、IL-1β含
NLRP3抑制剂组 0.28±0.01 0.85±0.04 0.19±0.09 ## 0.28±0.01 ## 0.65±0.05 0.23±0.02 ##
##
#
##
量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,健脾益气方各 caspase-1抑制剂组 0.61±0.01 0.76±0.04 0.74±0.05 # 0.69±0.03 0.72±0.06 0.61±0.03
##
#
#
剂量组、NLRP3 抑制剂组、caspase-1 抑制剂组大鼠血清 注:与正常组比较, P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<
*
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* *
##
中 TNF-α(健脾益气方低、高剂量组除外)、IL-1β含量均 0.05,P<0.01
* *
*
显著降低(P<0.05或P<0.01),详见表2。 Note:vs. normal group, P<0.05, P<0.01;vs. model group,
##
# P<0.05,P<0.01
表2 各组大鼠血清中TNF-α、IL-1β含量测定结果(x±±
s,n=10)
NLRP3 118 kDa
Tab 2 Content of TNF-α and IL-1β in serum of rats
in each group(x±±s,n=10) ASC 24 kDa
组别 TNF-α,pg/mL IL-1β,pg/mL
正常组 10.41±0.67 24.46±9.02 pro-caspase-1 45 kDa
模型组 13.55±2.46 ** 51.31±6.90 **
健脾益气方低剂量组 12.32±0.96 37.45±2.46 # RIP1 76 kDa
健脾益气方中剂量组 10.38±0.27 ## 37.31±1.94 #
健脾益气方高剂量组 12.21±0.81 38.35±2.94 # RIP3 57 kDa
NLRP3抑制剂组 11.47±0.46 # 33.81±6.33 ##
caspase-1抑制剂组 8.20±0.28 ## 34.13±3.66 ##
MLKL 54 kDa
**
##
#
注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
#
Note:vs. normal group, * * P<0.01;vs. model group,P<0.05, GAPDH 37 kDa
##
P<0.01 正常组 模型组 健脾益 健脾益 健脾益 NLRP3 caspase-1
3.3 健脾益气方对肝癌模型大鼠肝组织中 NLRP3、 气方低 气方中 气方高 抑制剂组 抑制剂组
剂量组
剂量组
剂量组
ASC、pro-caspase-1、RIP1、RIP3、MLKL 蛋白表达的 图 2 各组大鼠肝组织中 NLRP3、ASC、pro-caspase-1、
影响 RIP1、RIP3、MLKL蛋白表达的电泳图
与正常组比较,模型组大鼠肝组织中NLRP3、ASC、 Fig 2 Electrophoretogram of protein expression of
pro-caspase-1、RIP1、RIP3、MLKL 蛋白表达水平均显著 NLRP3,ASC, pro-caspase-1, RIP1, RIP3
升高(P<0.05 或 P<0.01);与模型组比较,健脾益气方 and MLKL in liver tissues of rats in each group
各剂量组、NLRP3 抑制剂组、caspase-1 抑制剂组大鼠肝 由 NLRP3、ASC 和效应分子 pro-caspase-1 组成的
组织中NLRP3、ASC、pro-caspase-1、RIP1(caspase-1抑制 NLRP3 炎症小体可介导多种疾病的炎症反应 。其在
[22]
剂组除外)、RIP3、MLKL(健脾益气方低、中剂量组和 肿瘤的发生、发展和转移中也具有重要作用,如刘钱 [23]
caspase-1抑制剂组除外)蛋白表达水平均显著降低(P< 研究发现,与正常肝细胞比较,肝癌细胞中NLRP3水平
0.05或P<0.01),详见表3、图2。 显著上调。在生理条件下,NLRP3炎症小体处于非活动
4 讨论 状态;当感知到危险信号时,NLRP3招募并裂解pro-cas-
脾虚是肝癌最重要的病机之一,因而中医在临床上 pase-1,从 而 激 活 caspase-1;激 活 的 caspase-1 可 将
[4]
常以健脾之法防治肝癌 。临床实践表明,健脾类方药 pro-IL-1β、pro-IL-18 切割成 IL-1β、IL-18,使之分泌至细
能明显改善肝癌患者的临床症状、增强其机体免疫力、 胞外,进而发挥各种炎症效应 。另外,IL-1β 、IL-18 还
[24]
提高其生活质量、延长其生存期 [4,20-21] 。本课题组前期 可增强细胞黏附作用,促进黑色素瘤的肝转移 。
[25]
研究表明,健脾益气方具有补益正气、健脾祛湿、散结消 细胞程序性坏死是一种炎症相关的程序性死亡,由
痞的功效 [5-6] ,且对肝癌具有良好的治疗作用。 TNF-α下游的 RIP1/RIP3/MLKL 信号通路介导,使得炎
中国药房 2021年第32卷第19期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 19 ·2345 ·