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表1 各组大鼠肝组织损伤指数测定结果(x±±s,n=10)                      表 3   各组大鼠肝组织中 NLRP3、ASC、pro-caspase-1、
        Tab 1 Liver tissue injury index of rats in each group    RIP1、RIP3、MLKL 蛋白表达水平测定结果(x±±
              (x±±s,n=10)                                        s,n=10)
        组别               损伤指数    组别              损伤指数      Tab 3 Protein expression of NLRP3,ASC,pro-cas-
        正常组             0.33±0.50  健脾益气方高剂量组     1.78±0.63 ##      pase-1,RIP1,RIP3 and MLKL in liver tissue
        模型组             3.67±0.47 **  NLRP3抑制剂组  1.22±0.79 ##      of rats in each group(x±±s,n=10)
        健脾益气方低剂量组       2.89±0.31 ##  caspase-1抑制剂组  1.11±0.57 ##
        健脾益气方中剂量组       1.56±0.50 ##                                   NLRP3/  ASC/  pro-caspase-1/  RIP1/  RIP3/  MLKL/
                                                            组别         GAPDH  GAPDH  GAPDH  GAPDH  GAPDH  GAPDH
           注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.01
                        **
                                          ##
                                                            正常组       0.27±0.01 0.66±0.06 0.54±0.04  0.63±0.01  0.72±0.06 0.33±0.01
           Note:vs. normal group, P<0.01;vs. model group,P<0.01
                                              ##
                           **
                                                            模型组       0.69±0.07 1.09±0.07 0.81±0.01 **  0.74±0.03 *  0.94±0.09 0.66±0.08 *
                                                                           **
                                                                                 **
                                                                                                    *
        3.2  健脾益气方对肝癌模型大鼠血清中 TNF-α、IL-1β                    健脾益气方低剂量组 0.38±0.03 0.53±0.04 0.56±0.03 ##  0.64±0.04 #  0.72±0.08 0.55±0.06
                                                                           ##
                                                                                                    #
                                                                                 ##
                                                                           ##
                                                                                                    #
                                                                                 ##
        含量的影响                                               健脾益气方中剂量组 0.32±0.01 0.77±0.03 0.60±0.03 ##  0.66±0.02 #  0.74±0.06 0.56±0.05
                                                            健脾益气方高剂量组 0.43±0.02 0.89±0.05 0.62±0.03 ##  0.60±0.02 ##  0.69±0.06 0.51±0.05 #
                                                                                                    #
                                                                           ##
                                                                                 ##
            与正常组比较,模型组大鼠血清中 TNF-α、IL-1β含
                                                            NLRP3抑制剂组  0.28±0.01 0.85±0.04 0.19±0.09 ##  0.28±0.01 ##  0.65±0.05 0.23±0.02 ##
                                                                                 ##
                                                                                                    #
                                                                           ##
        量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,健脾益气方各                        caspase-1抑制剂组  0.61±0.01 0.76±0.04 0.74±0.05 #  0.69±0.03  0.72±0.06 0.61±0.03
                                                                                 ##
                                                                                                    #
                                                                           #
        剂量组、NLRP3 抑制剂组、caspase-1 抑制剂组大鼠血清                      注:与正常组比较, P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<
                                                                             *
                                                                                                        #
                                                                                    * *
                                                               ##
        中 TNF-α(健脾益气方低、高剂量组除外)、IL-1β含量均                    0.05,P<0.01
                                                                                       * *
                                                                               *
        显著降低(P<0.05或P<0.01),详见表2。                              Note:vs. normal group, P<0.05, P<0.01;vs. model group,
                                                                  ##
                                                           # P<0.05,P<0.01
        表2   各组大鼠血清中TNF-α、IL-1β含量测定结果(x±±
             s,n=10)
                                                               NLRP3                                   118 kDa
        Tab 2  Content of TNF-α and IL-1β in serum of rats
               in each group(x±±s,n=10)                         ASC                                    24 kDa
        组别              TNF-α,pg/mL       IL-1β,pg/mL
        正常组             10.41±0.67        24.46±9.02        pro-caspase-1                              45 kDa
        模型组             13.55±2.46 **     51.31±6.90 **
        健脾益气方低剂量组       12.32±0.96        37.45±2.46 #          RIP1                                   76 kDa
        健脾益气方中剂量组       10.38±0.27 ##     37.31±1.94 #
        健脾益气方高剂量组       12.21±0.81        38.35±2.94 #          RIP3                                   57 kDa
        NLRP3抑制剂组       11.47±0.46 #      33.81±6.33 ##
        caspase-1抑制剂组    8.20±0.28 ##     34.13±3.66 ##
                                                               MLKL                                    54 kDa
                        **
                                                 ##
                                          #
           注:与正常组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<0.01
                                                 #
           Note:vs. normal group, * *  P<0.01;vs. model group,P<0.05,  GAPDH                           37 kDa
        ##
         P<0.01                                                     正常组  模型组  健脾益  健脾益  健脾益  NLRP3  caspase-1
        3.3  健脾益气方对肝癌模型大鼠肝组织中 NLRP3、                                          气方低  气方中  气方高  抑制剂组  抑制剂组
                                                                              剂量组
                                                                                   剂量组
                                                                                        剂量组
        ASC、pro-caspase-1、RIP1、RIP3、MLKL 蛋白表达的             图 2   各组大鼠肝组织中 NLRP3、ASC、pro-caspase-1、
        影响                                                       RIP1、RIP3、MLKL蛋白表达的电泳图
            与正常组比较,模型组大鼠肝组织中NLRP3、ASC、                     Fig 2  Electrophoretogram of protein expression of
        pro-caspase-1、RIP1、RIP3、MLKL 蛋白表达水平均显著                    NLRP3,ASC, pro-caspase-1, RIP1, RIP3
        升高(P<0.05 或 P<0.01);与模型组比较,健脾益气方                          and MLKL in liver tissues of rats in each group
        各剂量组、NLRP3 抑制剂组、caspase-1 抑制剂组大鼠肝                      由 NLRP3、ASC 和效应分子 pro-caspase-1 组成的
        组织中NLRP3、ASC、pro-caspase-1、RIP1(caspase-1抑制        NLRP3 炎症小体可介导多种疾病的炎症反应 。其在
                                                                                                   [22]
        剂组除外)、RIP3、MLKL(健脾益气方低、中剂量组和                       肿瘤的发生、发展和转移中也具有重要作用,如刘钱                       [23]
        caspase-1抑制剂组除外)蛋白表达水平均显著降低(P<                     研究发现,与正常肝细胞比较,肝癌细胞中NLRP3水平
        0.05或P<0.01),详见表3、图2。                              显著上调。在生理条件下,NLRP3炎症小体处于非活动
        4 讨论                                               状态;当感知到危险信号时,NLRP3招募并裂解pro-cas-
            脾虚是肝癌最重要的病机之一,因而中医在临床上                         pase-1,从 而 激 活 caspase-1;激 活 的 caspase-1 可 将
                            [4]
        常以健脾之法防治肝癌 。临床实践表明,健脾类方药                           pro-IL-1β、pro-IL-18 切割成 IL-1β、IL-18,使之分泌至细
        能明显改善肝癌患者的临床症状、增强其机体免疫力、                           胞外,进而发挥各种炎症效应 。另外,IL-1β 、IL-18 还
                                                                                     [24]
        提高其生活质量、延长其生存期              [4,20-21] 。本课题组前期      可增强细胞黏附作用,促进黑色素瘤的肝转移 。
                                                                                                  [25]
        研究表明,健脾益气方具有补益正气、健脾祛湿、散结消                              细胞程序性坏死是一种炎症相关的程序性死亡,由
        痞的功效    [5-6] ,且对肝癌具有良好的治疗作用。                      TNF-α下游的 RIP1/RIP3/MLKL 信号通路介导,使得炎
        中国药房    2021年第32卷第19期                                             China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 19  ·2345 ·
   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52