Page 50 - 2021年19期
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cytoplasm of cardiomyocytes，distal renal tubular epithelial cells，alveolar macrophages and epithelial cells. Compared with model
        group，the above indexes of rats in each dose group of Cur-SLN were mostly significantly reversed；the pathological changes of
        heart，kidney and lung tissues were reduced，the infiltration of inflammatory cells was reduced；and the positive expression of LC3
        and Beclin-1 protein were reduced，which were mainly distributed in the cytoplasm of cardiomyocytes and proximal renal tubular
        epithelial cells，and a few in distal renal tubular epithelial cells，alveolar macrophages and epithelial cells. CONCLUSIONS：
        Cur-SLN can improve the heart，kidney and lung functions of rats with cardiorenal syndrome，and its mechanism may be related to
        regulating the distribution or expression of LC3 and Beclin-1 protein in heart，kidney and lung.
        KEYWORDS     Curcumin；Solid lipid nanoparticles；Cardiorenal syndrome；Autophagy


            心肾综合征是指心脏和肾中的一个器官发生慢性                           PL203型精密电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限
        或急性功能损伤，从而导致另一个器官出现慢性或急性                            公司]，EG1150H 型生物组织包埋机、RM 21351 型切片
        功能障碍的一种临床综合征 。随着研究的深入，研究                            机（德国Leica公司），B071型光学显微镜（日本Olympus
                                 [1]
        者发现，心肾综合征患者往往存在肺水肿症状，使得肺                            公司），DNM-9602 型酶标仪（北京普朗有限公司），
                                  [2]
        扩张程度降低，从而加重病情 。细胞自噬是一种分解                            BR162123型电泳仪（美国Bio-Rad公司），LAS-500型凝
        代谢过程，涉及细胞内长寿命蛋白和受损细胞器的降                             胶成像系统（美国GE公司）。
        解，其在肿瘤、心力衰竭、衰老相关性疾病、神经退行性                           1.2 主要药品与试剂
                                                      [3]
        疾病以及传染病等多种生命进程中发挥着重要作用 。                                Cur原料药（批号TZSW200317-1，纯度99.0％）购自
        本课题组在前期的研究中发现，有效调控心肾综合征模                            西 安 通 泽 生 物 科 技 有 限 公 司 ；雷 帕 霉 素（批 号
        型大鼠心肌组织中自噬相关蛋白LC3的表达，对改善大                           H12J10J79598，纯度 99％）购自上海源叶生物科技有限
                                                   [4]
        鼠心肾功能、延缓细胞衰竭具有一定的积极作用 。由                            公司；大鼠血管紧张素转换酶（ACE）酶联免疫吸附试验
        此推测，以自噬为靶向治疗策略，可能成为预防和治疗                           （ELISA）试剂盒、精氨酸加压素（AVP）ELISA试剂盒、游
        心肾综合征的重要新途径之一。                                      离三碘甲状腺原氨酸（FT3）ELISA 试剂盒、兔抗大鼠
            姜黄素（curcumin，Cur）是从姜黄根茎中提取出来的                   LC3 单克隆抗体（批号分别为 9J2811、9J2811、9J2811、
                                                   [5]
        一种多酚类化合物，是中药姜黄的主要活性成分 。研                            6N26）均购自美国 SAB 公司；细胞裂解液试剂盒、BCA
        究发现，Cur 具有调节组织细胞凋亡和自噬功能的作                           蛋白浓度测定试剂盒（批号分别为 P00138、P0010）均购
          [6]
        用 ，因此笔者推测其可能具有治疗心肾综合征的作用，                           自上海碧云天生物技术有限公司；生物素标记的山羊抗
        但其是否可通过影响心脏、肾、肺组织中细胞自噬相关                            兔免疫球蛋白 G 抗体（二抗）、兔抗大鼠β-肌动蛋白
        因子的表达来治疗心肾综合征，尚不明确。                                （β-actin）单克隆抗体（批号分别为 201806、BM0627）购
            由于Cur难溶于水，血药浓度和生物利用度较低，很                        自武汉博士德生物有限公司；超敏ECL化学发光试剂盒
        难在病灶区维持有效浓度，使其在临床应用中受到了一                           （批号17122220）购自沈阳万类生物科技有限公司；兔抗
        定的限制    [5，7] 。固体脂质纳米粒（solid lipid nanoparticles，   大鼠 Beclin-1 单克隆抗体（批号 3507223001）购自武汉
        SLN）是一种针对低生物利用度的活性成分的理想递药                           爱博泰克生物科技有限公司；兔SP试剂盒（兔链霉卵白
        系统 。基于此，本课题组在前期研究中采用微乳法制                            素-生物素法检测系统）（批号K197713D）购自北京中杉
             [8]
        备了姜黄素固体脂质纳米粒（Cur-SLN） 。现以Cur-SLN                    金桥生物技术有限公司；其余试剂均为分析纯或实验室
                                         [9]
        为干预物，探讨其对心肾综合征模型大鼠心、肾、肺功能                           常用规格，水为娃哈哈纯净水。
        和细胞自噬相关因子表达的影响，以期为Cur-SLN的作                         1.3 实验动物
        用机制研究和临床应用提供理论基础。                                       本研究所用实验动物为SPF级SD大鼠，雄性，体质
        1 材料                                                量220～240 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公
        1.1 主要仪器                                            司，动物生产许可证号为SCXK（京）2016-0006。所有动
            本文所用主要仪器包括 LC-2010 型高效液相色谱                      物均正常摄食、饮水。
        （HPLC）仪（日本 Shimadzu 公司），XW-80A 型涡旋混合                2 方法
        仪（上海医科大学仪器厂），HWS-24 型电热恒温水浴锅                        2.1 Cur-SLN的制备
                                                                                  [9]
        （上海一恒科学仪器有限公司），XW-80A型定时恒温磁                             采用微乳法进行制备 。称取Cur原料药50 mg、硬
        力搅拌器（上海沪西分析仪器厂有限公司），PHS-3C 型                        脂酸0.5 g，于65 ℃条件下熔化；再加入4倍量（V/V）相同
        精密pH计（上海精密科学仪器有限公司），Nikon Ci-L型                     温度的聚山梨酯80乙醇溶液和适量水，涡旋1 min，制成
        显微镜（日本 Nikon 公司），HMIAS-2000 型高清晰度数                  水包油（O/W）型微乳。在电磁搅拌（1 000 r/min）下，将
        码显微图像分析系统（北京利金阳科技发展有限公司），                           上述微乳以 5 s/滴的速度滴入 2 ℃的水中；当微乳全部


        ·2348 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 19                                 中国药房    2021年第32卷第19期
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