Page 78 - 《中国药房》2021年16期

500
75 000
400 750 000
intensity 300 50 000 500 000

200 intensity 25 000 intensity 250 000

100 0 0
0 2.5 5.0 7.5 0 2.5 5.0 7.5 10.0 0 2.5 5.0 7.5 10.0
t，min t，min t，min
25 000
10 000
750 20 000
7 500
intensity 500 intensity 5 000 intensity 15 000
10 000
2 500
250 5 000
0 0
0 2.5 5.0 7.5 0 2.5 5.0 7.5 10.0 0 2.5 5.0 7.5 10.0
t，min t，min t，min
A. 空白溶液 B.混合对照品溶液 C.供试品溶液
注：1.苯甲酰乌头原碱；2.苯甲酰新乌头原碱；3.苯甲酰次乌头原碱；4.乌头碱；5.新乌头碱；6.次乌头碱；7.胡椒碱；8.没食子酸
Note：1. benzoylaconitine；2. benzoylneoaconitine；3. benzoylhypoaconitine；4. aconitine；5. neoaconitine；6. hypoaconitine；7. piperine；8. gal-
lic acid
续图2
Continued fig 2
表 2 苯甲酰乌头原碱等 8 种成分的回归方程与线性 2.00、5.50、10.50 mg，加甲醇 5 mL 溶解，取上述溶液 100
范围 μL，置于上述圆底烧瓶中，按“2.2.3”项下方法制备供试
Tab 2 Regression equations and linear ranges of 8 品溶液，再按“2.2.1”项下试验条件进样分析，记录峰面
components as benzoylaconitine 积并计算加样回收率，结果见表3。
待测成分 回归方程 R 2 线性范围，ng/mL 2.2.11 样品含量测定 称取“2.1”项下那如-3 味约 9.0
苯甲酰乌头原碱 Y＝4 167.9X+5 713.3 0.999 8 2.28～228.00 g，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下
苯甲酰新乌头原碱 Y＝40 691.9X+78 964.6 0.999 3 2.12～212.00 试验条件进样分析，记录峰面积并按标准曲线法计算样
苯甲酰次乌头原碱 Y＝447.0X+1 584.0 0.999 9 8.00～800.00
乌头碱 Y＝42 422.8X+5 774.5 0.999 8 0.40～40.00 品中8种成分的含量。每样品平行测定3次。
新乌头碱 Y＝29 194.6X+16 450.6 0.999 5 1.06～106.00 2.3 那如-3味的醇提工艺优化
次乌头碱 Y＝32 733.2X+43 064.1 0.999 1 1.60～160.00 2.3.1 实验设计与结果 本研究前期在参考相关文献
胡椒碱 Y＝100 641.0X+1 021 260.0 0.999 0 7.36～736.00 的基础上 [16 － 17] ，选择料液比（A，g/mL）、乙醇体积分数
没食子酸 Y＝2 797.6X+13 542.5 0.999 9 20.40～2 040.00
（B，％）、提取时间（C，h）为考察因素，每个因素设置3个
2.2.8 重复性试验 称取“2.1”项下那如-3 味，共 6 份，
水平；同时，选择8种成分含量的综合评分为考察指标，
每份 9.0 g，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按
采用L9 （3）正交实验优化醇提工艺。根据那如-3味各组
4
“2.2.1”项下试验条件进样分析，记录峰面积并按标准曲
方药材的比例计算综合评分：综合评分＝（制草乌中6种
线法计算样品中 8 种成分的含量。结果，8 种成分含量
生物碱总含量）×27.8％+（荜茇中胡椒碱含量）×16.7％+
的RSD均小于5％（n＝6），表明方法重复性良好。
（诃子中没食子酸含量）×55.5％，综合评分越高表明提
2.2.9 稳定性试验 取“2.2.3”项下供试品溶液，分别于 [14－15]
取效果越好 。那如-3味醇提工艺的因素与水平见表
室温下放置0、2、4、6、8、12、24 h时按“2.2.1”项下试验条
4，实验设计方案与结果见表5（表中，K1～K3、R均以综合
件进样分析，记录峰面积。结果，8种成分峰面积的RSD 评分计算）。由表5可见，各因素对综合评分影响的顺序
均小于 5％（n＝7），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 由高到低为A＞C＞B，其中A3＞A1＞A2、B2＞B3＞B1、C3＞
内稳定性良好。 C1＞C2。方差分析结果显示，A、B、C、D（误差）的偏差平
2.2.10 加样回收率试验 取已知含量的“2.1”项下那 方和分别为24.52、11.62、18.62、7.18，自由度均为2，方差
如-3味共6份，置于圆底烧瓶中；精密称取苯甲酰乌头原 分别为 12.26、5.81、9.41、3.59，F 值分别为 3.41、1.62、
碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、胡椒碱、没 2.62、1.00；其中，因素 A、B、C 对综合评分均无显著影
食子酸对照品 15.75、11.34、129.01、129.64、164.57 mg， 响（P＞0.05）。最优提取工艺为 A3B2C3，即料液比 1 ∶ 10
加甲醇7 mL溶解，取上述溶液1 mL，置于上述圆底烧瓶 （g/mL）、乙醇体积分数75％、提取时间1.5 h。
中；另精密称取乌头碱、新乌头碱、次乌头碱对照品 2.3.2 验证实验 按处方比例称取制草乌、荜茇、诃子

·1992 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 中国药房 2021年第32卷第16期