Page 83 - 《中国药房》2021年16期
P. 83

2.1.2  内标溶液     精密称取十二烷对照品适量,加入乙                       200                   4
                                                               180
        酸乙酯溶解,混匀,制成质量浓度为7.327 mg/mL的内标                         160
        溶液。                                                    140
                                                               120
        2.1.3  混合对照品溶液        分别精密量取“2.1.1”项下6种               pA  100                   5
                                                              I,
        单一对照品贮备液 400、800、240、4 000、1 900、380 μL,                80                        6
                                                                60
        置于10 mL量瓶中,加入乙酸乙酯定容,混匀,得各成分                             40                            7
                                                                               1  2 3
        质量浓度分别为0.305 4、0.665 8、0.217 6、7.652 0、3.872 6、         20
                                                                0
        0.342 2 mg/mL的混合对照品贮备液。精密量取上述贮                           0     5    10   15    20    25   30    35
                                                                                    t,min
        备液 5 mL 及“2.1.2”项下内标溶液 1 mL,加入乙酸乙酯                                       A.混合对照品
                                                               200
        定容至 10 mL,混匀,即得α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、柠檬
                                                               180                   4
        烯、γ-松油烯、α-松油醇、十二烷质量浓度分别为0.152 7、                       160
                                                               140
        0.332 9、0.108 8、3.826 0、1.936 3、0.171 1、0.732 7 mg/mL
                                                               120
        的混合对照品溶液。                                             pA  I,  100               5
                                                                80
        2.1.4  供试品溶液      精密称取佛手挥发油0.1 mL,置于                                               6
                                                                60
        10 mL 量瓶中,精密加入“2.1.2”项下内标溶液 1 mL,加                      40                            7
                                                                               1  2
                                                                20                 3
        入乙酸乙酯定容,混匀,即得供试品溶液。
                                                                0
        2.2  色谱条件                                                0     5    10    15   20    25   30    35
                                                                                    t,min
            色谱柱为 Agilent DB-17 毛细管柱(30 m×0.32 mm,                             B.供试品(批号20191028)
                                                               200
        0.25 μm);检测器为火焰离子化检测器;载气为氮气(纯                          180
        度 99.999%),载气流速为 0.5 mL/min;氮气(尾吹)流速                   160
                                                               140
        为 25 mL/min,氢气流速为 30 mL/min,空气流速为 400                  120
        mL/min;进样口温度为250 ℃,检测器温度为280 ℃,程                      pA  I,  100
                                                                80
        序升温(起始温度 50 ℃,以 5 ℃/min 升温至 60 ℃,再以                     60
        2 ℃/min升温至100 ℃,然后以20 ℃/min升温至250 ℃,                    40
                                                                20
        保留5 min);进样量为0.5 μL,分流比为35∶1。                           0
        2.3  系统适用性试验                                             0     5    10   15  t,min  20  25  30  35
            分别取“2.1”项下混合对照品溶液、供试品溶液以及                                             C.空白对照
                                                               注:1. α-蒎烯;2. β-蒎烯;3.月桂烯;4.柠檬烯;5. γ-松油烯;6.内标;
        空白对照溶液(乙酸乙酯),按“2.2”项下色谱条件进样测
                                                           7. α-松油醇
        定,记录色谱图,详见图 1。由图 1 可知,各待测成分色                           Note:1. α-pinene;2. β-pinene;3. myrcene;4. limonene;5. γ-terpi-
        谱峰与相邻色谱峰的分离度均大于 1.5,理论板数按柠                         nene;6. internal standard;7. α-terpineol
        檬烯峰计均不低于100 000,空白对照对测定无干扰。                        图 1   佛手挥发油混合对照品、供试品以及空白对照溶
                                                                 液的气相色谱图
        2.4  线性关系考察
                                                           Fig 1 GC chromatograms of mixed control,test sam-
            分别精密量取“2.1.3”项下混合对照品贮备液 0.2、
                                                                  ple and blank control of volatile oil from C.
        0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL,置于 2 mL 量瓶中,精密加
                                                                  medica
        入“2.1.2”项下内标溶液 0.2 mL,加入乙酸乙酯定容,混                   松油醇等 6 种成分的检测限与定量限。结果,上述 6 种
        匀,得不同质量浓度的系列线性溶液(表 2),按“2.2”项                      成分的检测限分别为 4.82、7.89、4.01、4.54、5.53、2.47
        下色谱条件进样,记录峰面积。以各待测成分质量浓度                           µg/mL,定量限分别为 15.34、25.91、13.69、15.70、18.68、

       (x,mg/mL)为横坐标、各成分与内标的峰面积比值(y)                       8.36 µg/mL。
        为纵坐标进行线性回归,结果见表3。                                  2.6 精密度试验
        2.5 检测限与定量限考察                                          精密量取“2.1.3”项下混合对照品溶液,按“2.2”项下
            取“2.1.3”项下混合对照品溶液,用乙酸乙酯逐级稀                     色谱条件连续进样测定 6 次,记录α-蒎烯、β-蒎烯、月桂
        释,按“2.2”项下色谱条件进样测定,分别以信噪比3 ∶ 1、                    烯、柠檬烯、γ-松油烯、α-松油醇等 6 种成分与内标的峰
        10 ∶ 1 计算α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、柠檬烯、γ-松油烯、α-                面积比值。结果,上述 6 种成分与内标峰面积比值的


        中国药房    2021年第32卷第16期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16  ·1997 ·
   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88