Page 83 - 《中国药房》2021年16期
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2.1.2 内标溶液 精密称取十二烷对照品适量,加入乙 200 4
180
酸乙酯溶解,混匀,制成质量浓度为7.327 mg/mL的内标 160
溶液。 140
120
2.1.3 混合对照品溶液 分别精密量取“2.1.1”项下6种 pA 100 5
I,
单一对照品贮备液 400、800、240、4 000、1 900、380 μL, 80 6
60
置于10 mL量瓶中,加入乙酸乙酯定容,混匀,得各成分 40 7
1 2 3
质量浓度分别为0.305 4、0.665 8、0.217 6、7.652 0、3.872 6、 20
0
0.342 2 mg/mL的混合对照品贮备液。精密量取上述贮 0 5 10 15 20 25 30 35
t,min
备液 5 mL 及“2.1.2”项下内标溶液 1 mL,加入乙酸乙酯 A.混合对照品
200
定容至 10 mL,混匀,即得α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、柠檬
180 4
烯、γ-松油烯、α-松油醇、十二烷质量浓度分别为0.152 7、 160
140
0.332 9、0.108 8、3.826 0、1.936 3、0.171 1、0.732 7 mg/mL
120
的混合对照品溶液。 pA I, 100 5
80
2.1.4 供试品溶液 精密称取佛手挥发油0.1 mL,置于 6
60
10 mL 量瓶中,精密加入“2.1.2”项下内标溶液 1 mL,加 40 7
1 2
20 3
入乙酸乙酯定容,混匀,即得供试品溶液。
0
2.2 色谱条件 0 5 10 15 20 25 30 35
t,min
色谱柱为 Agilent DB-17 毛细管柱(30 m×0.32 mm, B.供试品(批号20191028)
200
0.25 μm);检测器为火焰离子化检测器;载气为氮气(纯 180
度 99.999%),载气流速为 0.5 mL/min;氮气(尾吹)流速 160
140
为 25 mL/min,氢气流速为 30 mL/min,空气流速为 400 120
mL/min;进样口温度为250 ℃,检测器温度为280 ℃,程 pA I, 100
80
序升温(起始温度 50 ℃,以 5 ℃/min 升温至 60 ℃,再以 60
2 ℃/min升温至100 ℃,然后以20 ℃/min升温至250 ℃, 40
20
保留5 min);进样量为0.5 μL,分流比为35∶1。 0
2.3 系统适用性试验 0 5 10 15 t,min 20 25 30 35
分别取“2.1”项下混合对照品溶液、供试品溶液以及 C.空白对照
注:1. α-蒎烯;2. β-蒎烯;3.月桂烯;4.柠檬烯;5. γ-松油烯;6.内标;
空白对照溶液(乙酸乙酯),按“2.2”项下色谱条件进样测
7. α-松油醇
定,记录色谱图,详见图 1。由图 1 可知,各待测成分色 Note:1. α-pinene;2. β-pinene;3. myrcene;4. limonene;5. γ-terpi-
谱峰与相邻色谱峰的分离度均大于 1.5,理论板数按柠 nene;6. internal standard;7. α-terpineol
檬烯峰计均不低于100 000,空白对照对测定无干扰。 图 1 佛手挥发油混合对照品、供试品以及空白对照溶
液的气相色谱图
2.4 线性关系考察
Fig 1 GC chromatograms of mixed control,test sam-
分别精密量取“2.1.3”项下混合对照品贮备液 0.2、
ple and blank control of volatile oil from C.
0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL,置于 2 mL 量瓶中,精密加
medica
入“2.1.2”项下内标溶液 0.2 mL,加入乙酸乙酯定容,混 松油醇等 6 种成分的检测限与定量限。结果,上述 6 种
匀,得不同质量浓度的系列线性溶液(表 2),按“2.2”项 成分的检测限分别为 4.82、7.89、4.01、4.54、5.53、2.47
下色谱条件进样,记录峰面积。以各待测成分质量浓度 µg/mL,定量限分别为 15.34、25.91、13.69、15.70、18.68、
(x,mg/mL)为横坐标、各成分与内标的峰面积比值(y) 8.36 µg/mL。
为纵坐标进行线性回归,结果见表3。 2.6 精密度试验
2.5 检测限与定量限考察 精密量取“2.1.3”项下混合对照品溶液,按“2.2”项下
取“2.1.3”项下混合对照品溶液,用乙酸乙酯逐级稀 色谱条件连续进样测定 6 次,记录α-蒎烯、β-蒎烯、月桂
释,按“2.2”项下色谱条件进样测定,分别以信噪比3 ∶ 1、 烯、柠檬烯、γ-松油烯、α-松油醇等 6 种成分与内标的峰
10 ∶ 1 计算α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、柠檬烯、γ-松油烯、α- 面积比值。结果,上述 6 种成分与内标峰面积比值的
中国药房 2021年第32卷第16期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 ·1997 ·