Page 52 - 《中国药房》2021年16期

置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定质量，加 1.20
1.00
热回流45 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失的 0.80
AU 0.60 1
质量，摇匀，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供 0.40 2 4
0.20 3 5
试品溶液。 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44
2.2.3 阴性对照溶液 按槐花散处方要求，分别制备不 t，min
A.混合对照品溶液
含槐花、侧柏叶、枳壳、荆芥穗的阴性样品，再按“2.2.2” 1.20
1.00
项下方法分别制备各阴性对照溶液。 0.80
2.3 专属性考察 AU 0.60 1
0.40 2
分别精密吸取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶 0.20 3 4 5
0
液（编号 201201）和阴性对照溶液适量，按“2.1”项下色 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44
t，min
谱条件进样测定，记录色谱图。结果，各待测成分色谱 B.供试品溶液
0.80
峰峰形较好且均已实现基线分离，分离度均大于1.5；阴 0.70
0.60
0.50
性对照对待测成分的测定无干扰，详见图1。 AU 0.40
0.30 2
2.4 线性关系考察 0.20 3 5
0.10
0
取干燥至恒定质量的芦丁、柚皮苷、新橙皮苷、槲皮 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44
t，min
素、胡薄荷酮对照品各适量，精密称定，用甲醇制成质量 C.缺槐花阴性对照溶液
1.00
浓度分别为2 170、4 600、2 230、96、270 μg/mL的混合贮
0.80 1
备液；取上述混合贮备液适量，用甲醇分别稀释 5、10、 0.60
AU 0.40
50、100 倍，制得芦丁质量浓度分别为 434、217、43.4、 2 4
0.20 3 5
21.7 μg/mL、柚皮苷分别为 920、460、92、46 μg/mL、新橙 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44
皮苷分别为 446、223、44.6、22.3 μg/mL、槲皮素分别为 t，min
D.缺侧柏叶阴性对照溶液
19.2、9.6、1.92、0.96 μg/mL、胡薄荷酮分别为 54、27、5.4、 0.80
2.7 μg/mL的线性工作溶液。取上述贮备液和线性工作 0.60 1
溶液各适量，按“2.1”项下色谱条件进样测定，以各待测 AU 0.40
0.20 4 5
成分质量浓度（X，μg/mL）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44
标进行线性回归，结果见表1。 t，min
2.5 精密度试验 E.缺枳壳阴性对照溶液
0.80 1
取“2.4”项下相应质量浓度的线性工作溶液（芦丁、
0.60
柚皮苷、新橙皮苷、槲皮素、胡薄荷酮的质量浓度分别为 AU 0.40 2
0.20 3 4
217、460、223、9.6、27 μg/mL）适量，按“2.1”项下色谱条
0
件连续进样6次，记录峰面积。结果，芦丁、柚皮苷、新橙 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46
t，min
皮苷、槲皮素、胡薄荷酮峰面积的 RSD 分别为 0.61％、 F.缺荆芥穗阴性对照溶液
1.19％、0.46％、0.41％、0.24％（n＝6），表明仪器精密度 注：1.芦丁；2.柚皮苷；3.新橙皮苷；4.槲皮素；5.胡薄荷酮
Note：1. rutin；2. naringin；3. neohesperidin；4. quercetin；5. pule-
良好。
gone
2.6 稳定性试验
图1 芦丁等5种成分混合对照、供试品、阴性对照的高
精密吸取“2.2.2”项下供试品溶液（编号 201201）适 效液相色谱图
量，分别于室温下放置0、4、8、12、16、24 h时按“2.1”项下 Fig 1 HPLC chromatograms of mixed control，test
色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，芦丁、柚皮苷、 sample and negative control of 5 components
新橙皮苷、槲皮素、胡薄荷酮峰面积的 RSD 分别为 as rutin
0.91％、1.78％、1.54％、1.36％、0.96％（n＝6），表明供试 再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标
品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。 法计算样品中 5 种待测成分的含量。结果，芦丁、柚皮
2.7 重复性试验 苷、新橙皮苷、槲皮素、胡薄荷酮的平均含量分别为
精密称取槐花散样品（编号 201201）6 份，每份约 20.058、27.806、13.165、0.475、2.766 mg/g，RSD 分别为
0.25 g，精密称定，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液， 1.03％、1.02％、1.22％、0.54％、0.25％（n＝6），表明方法

·1966 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 中国药房 2021年第32卷第16期