Page 56 - 《中国药房》2021年16期
P. 56
地稔为野牡丹科植物地稔 Melastoma dodecandrum 自中国食品药品检定研究院;芦丁对照品(批号 153-
Lour.的新鲜或干燥全草,又名地菍、铺地锦、嘎狗噜、地 18-4,纯度≥98.0%)购自成都植标化纯生物技术有限公
枇杷等。该药主要分布在我国广东、贵州、浙江、福建等 司;DPPH(批号 C11386826)、ABTS(批号 C11838739)均
地区 [1-2] ,具有活血止血、清热解毒等功效,民间常用于 购自上海麦克林生化科技有限公司;2,4,6-三(2-吡
治疗痛经、产后腹痛、子宫出血、崩漏、痈肿、痔疮、盆腔 啶)-1,3,5-三嗪(TPTZ,批号 BCCD2024)购自西格玛奥
炎、肝炎等病症 。现代药理研究表明,地稔止血与抗炎 德里奇贸易有限公司;甲醇(色谱纯)购自美国TEDIA公
[3]
作用显著,并具有抗衰老、降血糖、降血脂、抗肿瘤等活 司;福林酚试剂购自上海蓝季生物有限公司;其余试剂
性 [4-6] 。地稔含有多种化学成分,以黄酮类、多糖类、三 均为分析纯,水为纯净水。
萜类、有机酸类等成分为主 [7-10] 。有研究报道,适当服用 15批地稔药材采收自贵州不同自然生长区,由贵州
抗氧化剂可以清除体内过多的自由基,有利于人类的身 中医药大学药学院生药实验室孙庆文教授鉴定,均为野
体健康和疾病的预防与控制,而植物中含有大量的天然 牡丹科植物地稔 M. dodecandrum Lour.的全草,其凭证
抗氧化活性成分,具有抗氧化活性强、副作用小等特点, 标本存放于贵州中医药大学药学重点实验室。15 批地
已成为当前研究的热点之一 [11-12] 。因此,对地稔药材中 稔药材的来源信息见表1。
的抗氧化活性成分进行研究具有一定的意义。 表1 15批地稔药材的来源信息
中药谱效关系研究是将中药指纹图谱信息与药效 Tab 1 Source information of 15 batches of M. do-
学指标相结合,采用相应的数据分析技术进行关联、分 decandrum
析,从而揭示化学成分与生物活性之间的相关性,阐明 编号 产地 采收时间 编号 产地 采收时间
活性物质基础,建立符合中医学理论和中医药实践基础 S1 贵州花溪高坡乡 2020年7月 S9 贵州惠水县三都镇 2018年8月
S2 贵州惠水县司蒙村 2020年8月 S10 贵州惠水县高镇 2018年7月
的质量评价模式。该研究手段能快速反映植物提取物
S3 贵州长顺县代化镇 2020年8月 S11 贵州榕江县古州镇 2018年8月
的主要化学特征,已被世界卫生组织认可为药用植物质 S4 贵州龙里县 2019年7月 S12 贵州惠水县摆榜乡 2020年11月
S5 贵州黔南贵定县 2019年8月 S13 贵州惠水县米丹 2020年11月
量评价的一种策略 [13-15] 。为此,本研究在前期实验基础
S6 贵州黔南贵定县 2020年8月 S14 贵州惠水县米安寨 2020年11月
上,采用高效液相色谱法(HPLC)建立15批不同产地地 S7 贵州长顺县鼓扬镇 2020年7月 S15 贵州惠水县水围村 2020年11月
稔醇提物(预实验示抗氧化活性较强)的指纹图谱,采用 S8 贵州惠水县羡塘乡 2020年9月
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、2,2′- 2 方法与结果
联氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自 2.1 溶液的制备
由基清除法和总抗氧化能力测定法(FRAP)评价其抗氧 2.1.1 对照品溶液 精密称取没食子酸、牡荆素、芦丁
化活性,采用主成分分析、双变量相关性分析、偏最小二 对照品各适量,分别溶解于甲醇中,再精密量取1 mL,置
乘回归分析研究地稔醇提物指纹图谱共有峰与抗氧化 于同一10 mL量瓶中,用甲醇稀释并定容,摇匀,制成上
活性的谱效关系,以期为进一步阐明该药抗氧化活性的 述成分质量浓度分别为10.17、8.73、14.00 μg/mL的混合
药效物质基础提供参考。 对照品溶液。另精密称取鞣花酸对照品适量,加甲醇
1 材料 溶解、稀释并定容,摇匀,制成质量浓度为 8.00 μg/mL
1.1 主要仪器 的单一对照品溶液。
本研究所用主要仪器有 LC-2030C 3D 型 HPLC 仪 2.1.2 供试品溶液 分别称取15批地稔药材粉末(过二
(包 括 二 极 管 阵 列 检 测 器 ,日 本 Shimadu 公 司)、 号筛)各15 g,分别加入12、10倍量(mL/g,下同)的50%
KQ-3OODB型数控超声清洗波(昆山市超声仪器有限公 乙醇回流提取 2 次,每次 1.5 h,合并滤液,浓缩,得浸膏
司)、UV-5900型紫外-可见分光光度计(上海元析仪器有 (得率为16.56%~28.21%)。精密称取上述浸膏0.05 g,
限公司)、FA2204N型万分之一电子天平(上海菁海仪器 置于10 mL量瓶中,加入50%甲醇溶解、稀释并定容,摇
有限公司)、1530型酶标仪(美国Thermo Fisher Scientific 匀,过 0.22 μm 微孔滤膜,即得指纹图谱用供试品溶液。
公司)等。 另精密称取上述浸膏 0.05 g,置于 25 mL 量瓶中,加入
1.2 主要药品与试剂 50%乙醇溶解、稀释并定容,摇匀,即得抗氧化活性用供
牡荆素对照品(批号111687-201704,纯度≥94.9%)、 试品溶液。
没食子酸对照品(批号 110831-201605,纯度≥91.5%)、 2.2 色谱条件
鞣花酸对照品(批号 111959-201903,纯度 88.8%)均购 以 ChromCore AQ C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)为
TM
·1970 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 16 中国药房 2021年第32卷第16期