Page 63 - 2021年15期

Effect and Its Mechanism of Plantago asiatica Polysaccharide on the Proliferation，Migration and Invasion
of Breast Cancer Cells
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CHEN Gao ，YANG Xiaoting ，WANG Xi ，JIN Zhan ，ZHU Rui ，GAN Chunchun ，ZHOU Daotang ，YAO
3
Shuihong（1. School of Medicine，Quzhou College of Technology，Zhejiang Quzhou 324000，China；2. Dept. of
1
Urology，Quzhou Municipal People’s Hospital，Zhejiang Quzhou 324000，China；3. College of Pharmacy，
Zhejiang University of TCM，Hangzhou 310053，China；4. Dept. of Pharmacy，Kaili Municipal First People’s
Hospital，Guizhou Kaili 556000，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of Plantago asiatica polysaccharide on the proliferation，migration and invasion
of breast cancer cells，and to investigate its mechanism preliminarily. METHODS：Using human breast cancer cell MDA-MB-231
as subjects，MTT method was adopted to detect the effects of different concentrations of P. asiatica polysaccharide（8，16，32，64
mg/L）on the cell proliferation ability，and survival rate of the cells was calculated. Scratch test and Transwell invasion test were
used to detect the effects of different concentrations of P. asiatica polysaccharide （8，16 mg/L） on cell migration ability and
invasion ability. Western blot assay was used to detect the expression of epithelial-mesenchymal transition（EMT）-related proteins
[matrix metalloproteinase-2（MMP-2），MMP-9，E-cadherin，N-cadherin，vimentin]. RESULTS：Results of MTT assay showed
that survival rate of the cells in 32，64 mg/L P. asiatica polysaccharide groups were significantly lower than control group（P＜0.05
or P＜0.01），so that 8，16 mg/L，which did not affect the cell survival rate，were used as the follow-up drug concentrations.
Compared with control group，relative mobility（12，24 h），relative invasion rate and relative expression of MMP-2，MMP-9，
N-cadherin and vimentin protein were decreased significantly in 8，16 mg/L P. asiatica polysaccharide groups（P＜0.05 or P＜
0.01），while relative expression of E-cadherin protein was increased significantly （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS：P.
asiatica polysaccharide can inhibit the proliferation of breast cancer cells MDA-MB-231，and inhibit the migration and invasion of
the cells by regulating the expression of metastasis and EMT-related proteins.
KEYWORDS Plantago asiatica polysaccharide；Breast cancer；MDA-MB-231 cells；Proliferation；Migration；Invasion

近年来，乳腺癌的发病率已居女性恶性肿瘤之首， （美国 Bio-Rad 公司）、3300 Mini 型化学发光成像系统
其患者数量已占各种恶性肿瘤患者总数的 7％～10％， （上海勤翔科学仪器有限公司）、BG-XM496 型酶标仪
已成为影响女性健康的主要原因之一，也是引起女性死 （厦门百谷生物工程有限公司）、XJL-101 型正置显微镜
[1]
亡的重要病因 。研究证实，乳腺癌患者死亡的关键因 （上海皆准仪器设备有限公司）、X715 XK-8型转移脱色
素与乳腺癌细胞迁移和侵袭有关，故筛选能够有效抑制 摇床（江苏新康医疗器械有限公司）、SW-CJ-2FD型超净
肿瘤细胞迁移和侵袭的抗肿瘤药物成为相关研究的热 工作台（苏州净化设备有限公司）、BSA124S-CW型电子
点之一 。车前子 Plantaginis Semen 是车前属植物车前 天平和MDF-U3386S型超低温冰箱（上海巴玖实业有限
[2]
Plantago asiatica L.或平车前 Plantago depressa Willd.的 公司）等。
干燥成熟种子，始见于《神农本草经》，其性微寒，味淡、 1.2 主要药品与试剂
[3]
甘，具有渗湿止泻、明目、祛痰等功效 。多糖为车前子 车前子药材（批号 Y1805060）购自衢州南孔中药有
的主要有效部位，目前国内外有关车前子多糖的研究主 限公司，经衢州职业技术学院医学院魏自太副教授鉴定
要集中于其调节血糖、血脂和润肠通便等作用方面 [4－6] ， 为车前科植物车前P. asiatica L.的干燥成熟种子。
而关于其在抗肿瘤方面的研究报道较为少见。研究表 DMEM/F12 培养基（批号 04541，两者体积比 1 ∶ 1）、
明，车前子多糖在H22肝癌移植瘤小鼠体内表现出一定 胎牛血清（批号 M2128）均购自美国 Hyclone 公司；青霉
[7]
的抗肿瘤活性 ，但有关其对乳腺癌细胞的影响尚缺乏 素-链霉素双抗（批号 20190103）购自美国 Gibco 公司；
系统研究。鉴于此，本研究拟以车前子多糖为干预物， RIPA 裂解液（批号 P0013C）、BCA 蛋白浓度测定试剂盒
分析其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭 （批号 P0024）、胰酶（批号 C0201）均购自上海碧云天生
的影响，并初步探究其作用机制，以期为车前子多糖抗 物技术有限公司；MTT 试剂（批号 M2128）、二甲基亚砜
肿瘤作用的阐释以及乳腺癌的临床治疗提供参考。 （DMSO，批号 M3321）均购自美国 Sigma 公司；苏木精-
1 材料 伊红（HE）试剂盒（批号 20181212）、Matrigel 胶（批号
1.1 主要仪器 20181101）均购自北京索莱宝科技有限公司；兔源基质
本研究所用主要仪器包括3111型CO2培养箱（美国 金属蛋白酶 2（MMP-2）多克隆抗体（批号#87809）、兔源
Thermo Fisher Scientific公司）、PowerPac Basic型电泳仪 MMP-9多克隆抗体（批号#13667）、兔源上皮钙黏附蛋白

中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1849 ·