Page 66 - 2021年15期

表 2 车前子多糖对 MDA-MB-231 细胞相对迁移率和
MMP-2 72 kDa
相对侵袭率的影响（x±±s，n＝3，％％）
Tab 2 Effects of P. asiatica polysaccharide on the rela-
MMP-9 92 kDa
tive migration rate and relative invasion rate of
MDA-MB-231 cells（x±±s，n＝3，％％） E-cadherin 135 kDa
相对迁移率
组别 相对侵袭率
12 h 24 h N-cadherin 140 kDa
对照组 101.24±10.28 102.24±4.24 101.08±8.18
车前子多糖8 mg/L组 20.12±4.32 ＊＊ 24.56±3.44 ＊＊ 40.15±4.88 ＊
车前子多糖16 mg/L组 9.28±1.34 ＊＊ 5.24±0.48 ＊＊ 28.32±3.34 ＊＊ vimentin 57 kDa
注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊
＊＊
＊＊
Note：vs. control group，P＜0.05， P＜0.01
＊
GAPDH 37 kDa
对照组 车前子多糖8 mg/L组 车前子多糖16 mg/L组
图 3 车前子多糖对 MDA-BA-231 细胞转移及 EMT 相
关蛋白表达影响的电泳图
Fig 3 Electrophoretogram of the effects of P. asiatica
polysaccharide on the expression of metastasis
and EMT-related proteins in MDA-MB-231
A.对照组 B.车前子多糖8 mg/L组
cells
表3 车前子多糖对MDA-MB-231细胞转移及EMT相
关蛋白表达的影响（x±±s，n＝3）
Tab 3 Effects of P. asiatica polysaccharide on the ex-
pression of metastasis and EMT-related pro-
teins in MDA-MB-231 cells（x±±s，n＝3）
C.车前子多糖16 mg/L组 组别 MMP-2 MMP-9 E-cadherin N-cadherin vimentin
图 2 车前子多糖对 MDA-MB-231 细胞侵袭能力影响 对照组 1 1 1 1 1
车前子多糖8 mg/L组 0.78±0.04 ＊ 0.58±0.03 ＊ 1.85±0.14 ＊ 0.75±0.08 ＊ 0.65±0.06 ＊
的显微图（×100）
车前子多糖16 mg/L组 0.54±0.02 ＊ 0.48±0.02 ＊ 3.02±0.55 ＊＊ 0.32±0.02 ＊＊ 0.25±0.01 ＊＊
Fig 2 Micrographs of the effects of P. asiatica polysac-
＊＊
＊
注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
charide on the invasion ability of MDA-MB- Note：vs. control group，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
231 cells（×100）
子多糖，考察其对人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 增殖、迁
3.4 车前子多糖对 MDA-MB-231 细胞转移及 EMT 相 移和侵袭能力的影响。首先，通过MTT实验发现，较高
关蛋白表达的影响 质量浓度（32、64 mg/L）的车前子多糖对该细胞增殖具
与对照组比较，各药物组细胞中 MMP-2、MMP-9、 有明显的抑制作用。根据细胞增殖实验结果，本研究选
N-cadherin、vimentin蛋白的相对表达量均显著降低（P＜ 择了对细胞无显著抑制作用的8、16 mg/L作为后续实验
0.05 或 P＜0.01），E-cadherin 蛋白的相对表达量均显著 的给药浓度，进一步通过划痕实验和Transwell侵袭实验
升高（P＜0.05或P＜0.01），且均有随药物质量浓度增加 探讨了车前子多糖对细胞迁移和侵袭能力的影响。结
而降低或升高的趋势，详见图3、表3。 果显示，不同质量浓度的车前子多糖均能显著抑制细胞
4 讨论 的增殖和迁移，且有浓度依赖趋势。
现阶段乳腺癌的治疗方式主要以化疗为主，但是常 转移是恶性乳腺癌最重要的生物学特征，是肿瘤转
规的化疗药物对乳腺癌细胞和正常细胞的选择性不佳， 移的必需步骤，同时也是近年来肿瘤患者病死率较高的
并容易对心脏、肾脏等重要组织器官产生器质性损伤， 主要原因之一 [13－14] 。因此，肿瘤的转移机制成为近年来
故有必要进一步挖掘有效的治疗药物 。车前子的主要 相关领域的研究热点之一。有研究指出，肿瘤细胞侵
[8]
有效成分为车前子多糖，该多糖是其种皮外表细胞壁含 袭、转移的关键因素是细胞外基质（EMC）以及基底膜的
[9]
[15]
有的黏液质（为一种亲水性胶体） 。多糖在动植物和微 降解，而其中发挥关键作用的则是 MMP 家族 。据报
生物细胞中分布甚广，其药理活性相关研究的进展迅 道，乳腺癌细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达量显著高
速，已初步证实其具有包括抗病毒、抗凝血、抗氧化等在 于癌旁正常组织，同时这两种 MMP 的高表达与乳腺癌
内的多种生物活性 [10－12] 。本研究从车前子中提取车前 细胞转移密切相关 。MMP-2和MMP-9具有促进基底
[16]

·1852 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 中国药房 2021年第32卷第15期