Page 59 - 2021年15期

2.6 指纹图谱的化学计量学分析 地虎杖药材的模式识别。采用变量投影重要性（VIP）
化学计量学已广泛应用于中药材产地、基原、炮制 法，以VIP＞1为标准，共筛选出7个差异性标志物，按影
[11]
和真伪鉴别等方面 ，分为有、无监督两种统计方法。 响大小排序依次为峰 7＞峰 9（大黄素-8-O-β-D-葡萄糖
其一般先进行无监督的系统聚类分析和主成分分析，观 苷）＞峰 6（白藜芦醇）＞峰 8＞峰 2（虎杖苷）＞峰 1＞峰
察样本之间是否有分类趋势，再采用偏最小二乘判别分 10，结果如图7所示。
析或者正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）进行有监 虎杖.M1（OPLS-DA）
督的模式识别，以显示样本间差异主要由哪些变量引
6
[6]
起，并寻找差异性标志物 。 4
2.6.1 聚类分析 以12个共有峰的“峰面积/称样量”为 2 重庆
安徽
变量，以夹角余弦为距离，采用SPSS 25.0统计软件对15 1.002*t[2] －2 0 江西
浙江
批不同产地虎杖药材进行系统聚类，结果如图 4 所示。 －4
由图4可知，当判别条件距离为5时，15批虎杖药材被大 －6
－8
致分为 4 类，其中编号 S7～S12 的样品聚为Ⅰ类，编号 －8 －6 －4 －2 0 2 4 6
1.001 82*t[1]
S1～S3 的样品聚为Ⅱ类，编号 S13～S15 的样品聚为Ⅲ R X[1]＝0.448 R X[2]＝0.349 Ellipse：Hotelling’s T（95％）
2
2
2
类，编号 S4～S6 的样品聚为Ⅳ类。该结果呈现一定的 图5 15批虎杖药材的OPLS-DA得分图
产地规律性：编号 S7～S12 的虎杖药材来自江西，编号 Fig 5 OPLS-DA scores diagram for 15 batches of P.
S1～S3 的虎杖药材来自重庆，编号 S13～S15 的虎杖药 cuspidatum
材来自浙江，编号S4～S6的虎杖药材来自安徽，说明不 虎杖.M1（OPLS-DA）：Validate Model
2
$M1.DA（1）Intercepts：R ＝（0，0.122），Q ＝（0，－0.793）
2
同产地的虎杖药材具有一定的差异性，这与相似度评价
结果基本一致。 0.5
0
0 5 10 15 20 25 R 2
－0.5
S11 Q 2
S12 －1.0
S9
S10 －1.5
S7 －2.0
S8 －0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
S1 200 permutations 3 components
S2
S3 图6 OPLS-DA模型置换检验图
S14
S15 Fig 6 OPLS-DA model permutation test diagram
S13
S4 虎杖.M1（OPLS-DA）
S5
S6
2
图4 15批虎杖药材的聚类分析图
1.5
Fig 4 Cluster analysis diagram of 15 batches of P. cus- 1
pidatum VIP[3+0+0] 0.5
2.6.2 OPLS-DA 根据聚类分析结果，进一步运用 0
－0.5
SIMCA 14.1 统计软件对 15 批虎杖药材进行 OPLS-DA， 峰7 峰9 峰6 峰8 峰2 峰1 峰10 峰5 峰4 峰3 峰11 峰12
Var ID（Primary）
其得分图如图 5 所示。由图 5 可知，15 批虎杖药材按不
图7 共有峰峰面积的VIP图
同产地分为 4 组，即重庆产样品（S1～S3）、安徽产样品
Fig 7 VIP plot for common peak area
（S4～S6）、江西产样品（S7～S12）、浙江产样品（S13～
S15）各聚为一类，且4组样品聚类良好、分离明显。本研 2.7 含量测定
2
究建立的模型参数 R X（cum）为 0.852，R Y（cum）为 2.7.1 线性关系考察 取虎杖苷、白藜芦醇、大黄
2
0.908，Q（cum）为0.808，三者数值均趋近于1，表明该分 素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素对照品各适量，精密称定，
2
组模型具有较强的解释和预测能力 。运用统计推断 加 甲 醇 制 成 每 1 mL 含 虎 杖 苷 189.00 μ g、白 藜 芦 醇
[12]
方法分析该模型 ，将模型随机排列200次做置换检验， 255.10 μg、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷 168.54 μg、大黄素
[13]
2
结果如图 6 所示。由图 6 可知，R 和 Q 截距值分别为 162.79 μg 的混合对照品贮备液。取上述混合对照品贮
2
0.122和－0.793，置换检验模型右上方的真实R 和Q 值 备液适量，加甲醇依次稀释 2、5、10、50 倍，得到每 1 mL
2
2
均大于样本随机排列后得到的 R 和 Q 值，说明建立的 含 虎 杖 苷 94.50、37.80、18.90、3.78 μ g，含 白 藜 芦 醇
2
2
OPLS-DA模型没有出现过拟合现象 ，可以用于不同产 127.55、51.02、25.51、5.10 μg，含大黄素-8-O-β-D-葡萄糖
[13]
中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1845 ·