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十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后转膜，以 mg/L作为后续研究的给药浓度。
5％脱脂奶粉室温封闭 30 min；加入 MMP-2、MMP-9、 表 1 车前子多糖对 MDA-MB-231 细胞存活率的影响
E-cadherin、N-cadherin、vimentin、GAPDH 一抗（稀释比 （x±±s，n＝4）
例均为 1 ∶ 1 000），4 ℃下孵育过夜；用 TBST 溶液清洗 3 Tab 1 Effects of P. asiatica polysaccharide on the sur-
次，加入相应二抗（稀释比例为 1 ∶ 3 000），室温下孵育 2 vival rate of MDA-MB-231 cells（x±±s，n＝4）
h；用TBST溶液清洗3次，经ECL显色后，使用化学发光 组别 细胞存活率，％ 组别 细胞存活率，％
荧光成像系统成像。采用Image J 1.52V软件进行分析， 对照组 100.02±8.12 车前子多糖32 mg/L组 64.64±5.86 ＊
车前子多糖8 mg/L组 97.32±7.24 车前子多糖64 mg/L组 37.65±4.82 ＊＊
以目标条带与内参GAPDH蛋白条带灰度值的比值表示 车前子多糖16 mg/L组 90.86±7.12
目标蛋白的相对表达量，并以各组蛋白相对表达量与对 注：与对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊
＊＊
照组蛋白相对表达量的比值作为最终结果。上述实验 Note：vs. control group，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
重复3次。 3.2 车前子多糖对MDA-MB-231细胞迁移能力的影响
2.7 统计学方法 培养 12 h 时，8、16 mg/L 的车前子多糖使细胞相对
采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。所有数 迁移率分别降至约 20％和 9％；培养 24 h 时，8、16 mg/L
据均以 x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，组 的车前子多糖使细胞的相对迁移率分别降至约 24％和
间两两比较采用LSD检验。检验水准α＝0.05。 5％。在上述各时间点，各药物组细胞的相对迁移率均
3 结果 显著低于对照组（P＜0.01），且有随药物质量浓度增加
3.1 车前子多糖对MDA-MB-231细胞存活率的影响 而降低的趋势，详见图1、表2。
与对照组比较，车前子多糖32、64 mg/L组细胞的存 3.3 车前子多糖对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响
活率均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；而车前子多糖8、 与对照组比较，各药物组的侵袭细胞数明显减少，
16 mg/L 组细胞的存活率与对照组比较，差异均无统计 其相对侵袭率均显著降低（P＜0.05或P＜0.01），且有随
学意义（P＞0.05），详见表 1。鉴于此，本研究将 8、16 药物质量浓度增加而降低的趋势，详见图2、表2。
0 h
12 h
24 h
A.对照组 B.车前子多糖8 mg/L组 C.车前子多糖16 mg/L组
图1 车前子多糖对MDA-MB-231细胞迁移能力影响的显微图（×100）
Fig 1 Micrographs of the effects of P. asiatica polysaccharide on the migration ability of MDA-MB-231 cells（×100）
中国药房 2021年第32卷第15期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 15 ·1851 ·
