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物质（如黄嘌呤、尿嘧啶、鸟嘌呤、尿苷等），其可参与 2.2 溶液的制备
DNA的代谢过程，具有抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性， 2.2.1 供试品溶液 取蚕蛹样品，粉碎（过三号筛），精
并可调节机体的心血管系统、免疫系统、代谢系统、神经 密称取上述粉末 0.5 g，置于具塞锥形瓶中，精密加入水
系统等，具有较高的研究价值 [8－9] 。在医药领域，目前已 25 mL，密塞，称定质量，超声（功率250 W，频率40 kHz）
研究开发出了多种含核苷类成分的药物，如碘苷、利巴 处理40 min，放冷至室温；再次称定质量，用水补足减失
韦林、阿昔洛韦等，且研究、应用范围还在扩大 。中药 的质量，摇匀，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，
[10]
指纹图谱作为一种可量化的综合性化学鉴定方法，具有 即得。
整体性和模糊性的特点 [11－13] ，可用来评价中药材及中成 2.2.2 混合对照品溶液 称取黄嘌呤对照品10.12 mg、
药的整体质量 [14－16] 。鉴于此，本研究拟采用高效液相色 鸟嘌呤对照品 10.56 mg、尿苷对照品 10.39 mg、尿嘧啶
谱法（HPLC）建立不同产地蚕蛹的指纹图谱，并对黄嘌 对照品 10.68 mg，置于同一 10 mL 量瓶中，加 50％甲醇
呤、尿苷、尿嘧啶、鸟嘌呤等4个核苷类成分进行定量分 溶解并稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品贮备液。将
析，以期更科学、全面地评价蚕蛹的质量。 上述贮备液用 50％甲醇稀释 20 倍，制成每 1 mL 中含黄
1 材料 嘌呤 50.6 μg、鸟嘌呤 52.8 μg、尿苷 51.9 μg、尿嘧啶 53.4
1.1 主要仪器 μg的混合对照品溶液。
本研究所用的主要仪器有 1260 型 HPLC 仪（美国 2.2.3 空白溶液 以样品的提取溶剂（水）作为空白
溶液。
Agilent公司）、XS105DU 型电子天平（瑞士 Mettler-Tole-
2.3 专属性试验
do 公司）、P180H 型超声波清洗机（德国 Elmasonic 公
取“2.2”项下供试品溶液（编号 CY-5）、混合对照品
司）、FW100型高速万能粉碎机（天津泰斯特仪器有限公
溶液以及空白溶液，分别按“2.1”项下色谱条件进样测
司）等。
1.2 主要药品与试剂 定，记录色谱图。结果，各待测成分的色谱峰与相邻色
谱峰间的分离度均大于 1.5，以各成分计的理论板数均
本研究共收集蚕蛹药材 18 批，分别来自河北（8
大于6 000，且空白溶液对测定无干扰，说明此方法专属
批）、浙江（5批）和四川（5批）；所有药材经石家庄市食品
性良好。专属性试验的HPLC色谱图见图1。
药品检验中心毕飞霞副主任药师鉴定均为蚕蛾科昆虫
家蚕 B. mori Linnaeus 的干燥蛹，具体来源信息见表 1。 160
尿嘧啶（批号 100469-201302，纯度 99.6％）、鸟嘌呤（批 120
mV
号 140631-201205，纯度 99.6％）、黄嘌呤（批号 140662- U， 80
200802，纯度 99.1％）、尿苷（批号 111887-200202，纯度 40
98.6％）对照品均购自中国食品药品检定研究院；甲醇、 0
0 10 20 30 40 50
乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为去离子水（电 t，min
导率为18.0 MΩ·cm）。 A.供试品溶液（编号CY-5）
表1 18批蚕蛹药材来源信息 40
Tab 1 Origin of 18 batches of B. mori 30
mV 20
编号 产地 收集时间 编号 产地 收集时间 U，
10
CY-1 河北承德 2018-06 CY-10 浙江杭州 2018-09
0
CY-2 河北承德 2018-06 CY-11 河北承德 2018-10
CY-3 河北承德 2018-06 CY-12 四川成都 2018-10 0 10 20 30 40 50
CY-4 河北承德 2018-06 CY-13 浙江嘉兴 2018-10 t，min
B.混合对照品溶液
CY-5 河北承德 2018-08 CY-14 浙江嘉兴 2018-10 40
CY-6 河北承德 2018-08 CY-15 四川成都 2018-10
30
CY-7 河北承德 2018-09 CY-16 四川成都 2018-10 mV 20
CY-8 浙江嘉兴 2018-09 CY-17 四川成都 2018-09 U，
CY-9 浙江嘉兴 2018-10 CY-18 四川成都 2018-10 10
2 方法与结果 0
2.1 色谱条件 0 10 20 30 40 50
t，min
以资生堂 CAPCELL PAK C18 AQ S5（250 mm×4.6 C.空白溶液
mm，5 µm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.05 mol/L磷酸二氢钾 图1 专属性试验的HPLC图
溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～13 min，100％B； Fig 1 HPLC chromatograms of specificity tests
13～30 min，100％ B→85％ B；30～50 min，85％ B→ 2.4 指纹图谱的建立及分析
40％B；50～55 min，40％B）；流速为1.0 mL/min；柱温为 2.4.1 精密度试验 精密称取蚕蛹样品（编号CY-5）0.5
30 ℃；检测波长为260 nm；进样量为10 μL。 g，按照“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，然后按照“2.1”

·1748 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14 中国药房 2021年第32卷第14期