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每1 mL含芦丁0.2 mg的对照品溶液，即得。
2.3.3 色谱条件与系统适用性试验
色谱注为 Agilent 5 TC-C18 （2）（250 mm×4.6 mm，5
μm）；流动相为甲醇-0.3％磷酸溶液（40 ∶ 60，V/V）；检测
波长为 358 nm；流速为 1.0 mL/min；柱温为 30 ℃；进样
量为 10 μL。分别取“2.3.1”项下供试品溶液、“2.3.2”项
下对照品溶液以及空白溶液（甲醇），按上述色谱条件进
样测定，记录色谱图。结果，待测成分色谱峰与相邻色
谱峰的分离度＞1.5，理论板数按芦丁计不低于3 000，且
注：1～7 为供试品（编号 1～7）；8 为缬氨酸对照品；9 为亮氨酸对
空白溶液对测定无干扰，表明该方法的专属性较好。系
照品
Note：1-7 mean test samples（No. 1-7）；8 means valine substance 统适用性试验的高效液相色谱图见图5。
control；9 means leucine substance control
30 芦丁
图4 氨基酸鉴别的薄层色谱图
Fig 4 TLC chromatogram of amino acids mAU 20
10
表2 反枝苋药材中水分、总灰分、酸不溶性灰分和水溶 0
性浸出物含量测定结果（n＝3，％％） 0 5 10 t，min 15 20 25
Tab 2 Results of content determination of moisture， A.对照品溶液
total ash，acid insoluble ash and water-soluble
50
extract in A. retroflexus（n＝3，％％） 芦丁
mAU 25
编号 水分 总灰分 酸不溶性灰分 水溶性浸出物
1 8.72 13.32 0.33 24.74 0
2 7.75 12.27 0.32 19.89 0 5 10 15 20 25
t，min
3 7.70 12.71 0.34 22.19
B.供试品溶液（编号5）
4 7.43 12.70 0.15 17.88 100
5 8.39 13.78 0.55 24.69 75
6 8.06 11.82 0.46 17.27 50
7 8.42 12.75 0.40 20.92 mAU 25
0
法”进行测定 ，每批样品重复测定 3 次，取平均值。结
[10]
－25
果，7 批样品中总灰分含量为 11.82％～13.78％，平均含 0 5 10 15 20 25
t，min
量 为 12.76％ ；7 批 样 品 中 酸 不 溶 性 灰 分 的 含 量 为 C.空白溶液
0.15％～0.55％，平均含量为 0.36％。反枝苋药材中总 图5 系统适用性试验的高效液相色谱图
Fig 5 HPLC chromatograms of system suitability tests
灰分和酸不溶性灰分含量测定结果见表2。
2.2.3 水溶性浸出物含量测定 2.3.4 线性关系考察
精密称取7批反枝苋药材粉末（过二号筛）各约3 g， 精密量取“2.3.2”项下芦丁对照品溶液 0.5、1.0、2.5、
按照 2015 年版《中国药典》（四部）通则“2201 浸出物测 5.0、7.5、10 mL，分别置于 10 mL 量瓶中，用甲醇稀释至
定”项下的热浸法进行测定 ，每批样品重复测定 3 次， 刻度，摇匀，按“2.3.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面
[10]
取平均值。结果，7 批样品中水溶性浸出物含量为 积。以峰面积（y）为纵坐标、对照品质量浓度（x，μg/mL）
17.27％～24.74％，平均含量为 21.08％。反枝苋药材中 为横坐标进行线性回归，得到芦丁的回归方程为 y＝
水溶性浸出物含量测定结果见表2。 14 851x+270.36（R ＝1.000 0），表明芦丁在质量浓度
2
2.3 芦丁含量测定 10～200 μg/mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
2.3.1 供试品溶液的制备 2.3.5 精密度考察
取本品粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置于具塞 取“2.3.4”项下同一份芦丁对照品溶液（100 μg/mL），
锥形瓶中，精密加入甲醇 25 mL，称定质量，超声（频率 按“2.3.3”项下色谱条件连续进样 6 次，记录峰面积。结
40 kHz，功率 600 W）处理 40 min，冷却；再次称定质量， 果，芦丁峰面积的 RSD 为 0.12％（n＝6），表明仪器精密
用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 度良好。
2.3.2 对照品溶液的制备 2.3.6 稳定性试验
取芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并制成 取同一份供试品溶液（编号 6），分别于室温放置 0、

·1744 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 14 中国药房 2021年第32卷第14期