Page 53 - 《中国药房》2021年12期

相进行梯度洗脱（0～25 min，45％A→55％A；25～30 650 1
600
min，55％A→65％A；30～45 min，65％A→100％A），柱 550
500
温为 30 ℃，流速为 1.0 mL/min，检测波长为 220 nm，进 450
样量为10 µL。 400
mV 350
2.1.2 对照溶液的制备 （1）取五味子对照药材粉碎， U， 300
250
取粉末（过三号筛）约10 g，精密称定，置于锥形瓶中，加 200 8
150
水 50 mL，回流提取 30 min，滤过，滤液蒸干。残渣加甲 100 4 5 6
50 2 3 7
醇 50 mL，称定质量，超声（功率 250 W，频率 20 kHz，下 0
同）处理 30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
t，min
的质量，滤过，取续滤液，作为对照药材溶液。（2）另取五 图1 醋五味子配方颗粒的对照图谱R
味子醇甲、五味子醇乙、当归酰基戈米辛 H、五味子甲 Fig 1 Reference chromatogram R for vinegar-pro-
素、五味子乙素对照品各适量，加甲醇制成质量浓度均 cessed S. chinensis formula granules
为25 μg/mL的混合对照品溶液，于4 ℃下冷藏，备用。 2 600
2.1.3 供试品溶液的制备 取醋五味子配方颗粒，研 2 400 1
2 200 3 7 8
细，取粉末 0.5 g，置于锥形瓶中，加甲醇 50 mL，称定质 2 000 2 4 5 6
量，超声处理 30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足 1 800
1 600
减失的质量，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
mV 1 400
2.1.4 阴性对照溶液的制备 取辅料糊精 0.25 g，按 U， 1 200
1 000
“2.1.3”项下方法处理，取续滤液，作为阴性对照溶液。 800
2.1.5 精密度试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号 600
400
S1）适量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以 200
五味子醇甲为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相 0
对峰面积。结果，8个共有峰相对保留时间的RSD均不 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48
t，min
高于 0.2％（n＝6），相对峰面积的 RSD 均不高于 1.2％
图2 19批醋五味子配方颗粒的HPLC叠加特征图谱
（n＝6），表明方法精密度良好。
Fig 2 HPLC superimposed characteristic pattern of
2.1.6 重复性试验 精密称取醋五味子配方颗粒（编号
19 batches of vinegar-processed S. chinensis
S1）适量，每份约 0.5 g，共 6 份，按“2.1.3”项下方法制备
formula granules
供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以五
2.1.9 相似度评价 将 19 批醋五味子配方颗粒和五味
味子醇甲为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对
子对照药材[取“2.1.2（1）”项下对照药材溶液，按同一色
峰面积。结果，8个共有峰相对保留时间的RSD均不高
谱条件测得]的色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度
于0.3％（n＝6），相对峰面积的RSD均不高于1.5％（n＝
6），表明方法重复性良好。 分析软件（2012版）》，采用全谱峰匹配，以对照图谱R为
2.1.7 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号 参照，计算各样品图谱与对照图谱的相似度。结果，各
S1）适量，分别于 25 ℃下放置 0、2、4、8、12、16、20、24 h 样品图谱与对照图谱 R 的相似度均在 0.996 以上，表明
时按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以五味子醇甲为参 生产工艺稳定。五味子对照药材与对照图谱 R 的相似
照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结 度为0.999，表明对照图谱R能够较全面地反映五味子对
果，8个共有峰相对保留时间的RSD均不高于0.6％（n＝ 照药材的化学特征信息。19 批醋五味子配方颗粒和五
8），相对峰面积的RSD均不高于2.0％（n＝8），表明供试 味子对照药材的相似度评价结果见表2。
品溶液于25 ℃下放置24 h内稳定性良好。 2.1.10 共有峰指认 19批醋五味子配方颗粒共有8个
2.1.8 特征图谱的建立 分别取 19 批醋五味子配方颗 共有峰，通过与混合对照品[图3，取“2.1.2（2）”项下混合
粒（编号S1～S19），约0.5 g，精密称定，按“2.1.3”项下方 对照品溶液，按同一色谱条件测得]对比，共指认出 5 个
法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测 共有峰，分别为峰1（五味子醇甲）、峰4（五味子醇乙）、峰
定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 5（当归酰基戈米辛 H）、峰 6（五味子甲素）、峰 8（五味子
版）》，以 S1 样品图谱为参照，采用中位数法，设置时间 乙素）。其中，峰1的响应最强，且该峰所对应的成分五
窗为0.4，生成醋五味子配方颗粒的对照图谱R（图1）和 味子醇甲为2020年版《中国药典》（一部）醋五味子含量
[1]
19 批醋五味子配方颗粒的叠加特征图谱（图 2）。由图 测定项的指标成分 ，故以峰1为参照，计算其他共有峰
1、图2可知，19批醋五味子配方颗粒共有8个共有峰。 的相对保留时间和相对峰面积，结果见表3、表4。

中国药房 2021年第32卷第12期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 12 ·1455 ·