Page 49 - 《中国药房》2021年12期

表3 甘露糖等6种单糖成分的回归方程和线性范围
0.50
0.40 Tab 3 Regression equation and linear range of 6
AU 0.30 5 kinds of monosaccharide as mannose
0.20
0.10 7 单糖成分 回归方程 R 2 线性范围，μg/mL
1 2 3 4 6
0 甘露糖 y＝29 330x+132 169 0.999 5 4.96～198.40
0 10 20 30 40 50 鼠李糖 y＝19 026x+11 153 0.999 6 4.96～198.40
t，min
A.黄芪多糖水解溶液（编号H-01）的衍生化样品 半乳糖醛酸 y＝35 214x+107 374 0.999 2 4.14～165.60
葡萄糖 y＝15 503x－3 000 000 0.999 7 520.33～20 813.20
0.50 半乳糖 y＝41 391x－6 393 0.999 7 4.20～168.00
0.40 阿拉伯糖 y＝69 951x－75 638 0.999 4 4.35～174.00
5
AU 0.30
0.20 2.10 精密度试验
0.10 取“2.3”项下衍生化后的单糖混合对照品溶液适量，
1 2 3 4 6 7
0
0 10 20 30 40 50 按“2.5”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
t，min 结果，甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿
B.黄芪多糖水解溶液（编号H-04）的衍生化样品
拉伯糖峰面积的 RSD 分别为 1.67％、1.08％、1.29％、
0.50
0.40 1.81％、1.42％、1.92％（n＝6），表明仪器精密度良好。
5
AU 0.30 2.11 黄芪多糖中单糖含量的测定
0.20
0.10 4 分别称取 9 批黄芪药材约 20 g，依次按“2.1”“2.2”
1 2 3 6 7
0 “2.4”项下方法处理后，再按“2.5”项下色谱条件进样测
0 10 20 30 40 50 定，记录峰面积并代入回归方程计算单糖含量，结果见
t，min
C.黄芪多糖水解溶液（编号H-07）的衍生化样品 表4。
表4 不同生长年限黄芪中单糖含量测定结果（mg/g）
0.50
0.40 Tab 4 Results of content determination of monosac-
AU 0.30 1 2 charides in A. membranaceus from different
0.20 4 7
3 6
0.10 5 growth years（mg/g）
0
编号 甘露糖 鼠李糖 半乳糖醛酸 葡萄糖 半乳糖 阿拉伯糖 合计
0 10 20 30 40 50
t，min H-01 0.72 1.22 6.27 94.78 3.73 4.17 110.88
D.混合对照品溶液的衍生化样品 H-02 0.50 0.92 3.63 87.33 1.95 3.94 98.26
H-03 0.89 1.52 7.68 107.70 8.30 13.84 139.92
0.50
H-04 0.94 0.94 7.86 275.77 ＊ 4.76 5.44 295.71
0.40
4.03
AU 0.30 1 H-05 0.52 0.76 3.52 162.71 ＊ ＊ 2.27 13.76 173.81
219.29
H-06
1.37
0.78
5.61
8.75
249.56
0.20
0.10 H-07 0.78 1.11 6.91 167.26 4.00 2.35 182.41
0 H-08 0.57 0.85 3.35 111.54 2.17 3.90 122.37
0 10 20 30 40 50 H-09 0.82 1.60 7.52 119.05 8.96 14.04 151.99
t，min
＊
E.阴性对照溶液的衍生化样品 注：与同产地2、4年生黄芪比较，P＜0.05
＊
注：1. PMP；2.甘露糖；3.鼠李糖；4.半乳糖醛酸；5.葡萄糖；6.半乳 Note：vs. 2，4 old years A. membranaceus，P＜0.05
糖；7.阿拉伯糖 由表 4 可以看出，黄芪多糖中各单糖的含量为
Note：1. PMP；2. mannose；3. rhamnose；4. galacturonic acid；5. 0.50～275.77 mg/g；各批黄芪药材中黄芪多糖均含有甘
glucose；6. galactose；7. arabinose 露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等
图1 不同生长年限黄芪中多糖和混合对照品衍生化样 6 种单糖，其中葡萄糖含量最高。采用 Excel 2016 软件
品的高效液相色谱图
对2、3、4年生黄芪药材中各单糖含量进行两两t检验，发
Fig 1 HPLC chromatograms of derivative of A. mem-
现仅3年生黄芪药材中葡萄糖含量显著高于2、4年生黄
branaceus polysaccharides and monosaccha-
芪（P＜0.05），其他单糖含量均无显著差异（P＞0.05）。
rides reference from different growth years
同时，3个产地黄芪药材中黄芪多糖含量不一致，其中山
方程计算含量，再计算加样回收率和 RSD 值。结果，样 西省产含量最高。
品中甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉 3 讨论
伯 糖 的 平 均 加 样 回 收 率 分 别 为 96.65％ 、99.56％ 、 本研究采用水提醇沉法提取了黄芪多糖，并建立了
95.92％ 、101.48％ 、93.87％ 、99.80％ ，RSD 分 别 为 测定其中 6 种单糖含量的 PMP 柱前衍生化-HPLC 法。
1.85％、1.12％、1.05％、0.95％、0.83％、0.44％（n＝6），表 该方法的灵敏度高、分离效果好，线性范围宽，精密度、
明本方法准确度好。 重复性、稳定性和回收率良好，操作简便，结果稳定可

中国药房 2021年第32卷第12期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 12 ·1451 ·