Page 33 - 《中国药房》2021年10期

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A. RPV修饰的空白脂质体组 B.紫杉醇与五味子乙素脂质体组 C. RPV修饰的紫杉醇与五味子乙素脂质体组
图7 各组细胞迁移能力测定的显微图
Fig 7 Micrographs of migration ability of SK-OV-3 cells in each group
μmol/L，紫杉醇与五味子乙素摩尔比1 ∶ 5，浓度根据前期 低（P＜0.05），且 RPV 修饰的紫杉醇与五味子乙素脂质
预实验设定），下室中加入完全培养基 0.6 mL，置于 体组细胞的侵袭率显著低于五味子乙素脂质体组（P＜
37 ℃、5％CO2培养箱中孵育 12 h。然后用 PBS 轻洗小 0.05）。
室中未穿过下室的细胞，小室外侧用 4％多聚甲醛溶液 3 讨论
固 定 30 min 后 ，再 置 于 0.1％ 结 晶 紫 溶 液 中 染 色 20 卵巢癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，其发病机制
min。用 PBS 洗去多余染料后晾干，于倒置显微镜下进 复杂、诊断迟，因此其病死率位居妇科癌症首位 。目
[17]
行细胞计数并拍照，计算细胞侵袭率：细胞侵袭率 前，临床上主要采取手术和放、化疗等手段进行治疗，虽
（％）＝n/n0×100％（式中，n为给药组侵袭细胞总数、n0为 然可以改善患者的症状，但化疗药物本身的毒副作用对
RPV 修饰的空白脂质体组侵袭细胞数）。实验重复 3 患者影响较大，故临床应用受限 。靶向治疗是继手术
[18]
次。按“2.7.2”项下方法进行统计分析。各组细胞侵袭 和放、化疗后的一种新方法，能选择性地作用于特定因
能力测定的显微图见图8。 子、酶类以及信号通路等，从而抑制癌细胞的增殖甚至
直接杀死癌细胞 。靶向治疗的机制主要是抑制肿瘤
[19]
[20]
血管生成、抑制信号酶传导、诱导细胞凋亡等 。紫杉
醇作为临床上常用的广谱抗癌药，在水溶液中的溶解度
极低，口服给药生物利用度较差，也不具备靶向性，临床
效果有限 。本研究成功制备了 RPV 修饰的紫杉醇与
[21]
A. RPV修饰的空白脂质体组 B.紫杉醇与五味子乙素脂质体组 五味子乙素脂质体，将紫杉醇和五味子乙素成功包载于
脂质体中，其中五味子乙素可发挥辅助作用，进而增强
紫杉醇的抗肿瘤作用；穿膜肽RPV的修饰可进一步增强
脂质体的靶向性，提高2种药物在肿瘤部位的浓度，以达
到更好的疗效。因紫杉醇与五味子乙素在该脂质体中
[22]
具有协同抗肿瘤转移的作用，二者相辅相成 ，故本研
C. RPV修饰的紫杉醇与五味子乙素脂质体组
究对两药的平均包封率进行考察。
图8 各组细胞侵袭能力测定的显微图 处方工艺优选的方法有单纯形网格法、星点设计-
Fig 8 Micrographs of invasion ability of SK-OV-3 效应面法及正交设计法等，其中Box-Behnken设计-响应
cells in each group 面法具有实验次数少、预测值精准的优点，能简单快速

结果显示，3 种脂质体对 SK-OV-3 细胞侵袭能力的 地优化出最优处方工艺 [23－24] 。本研究前期进行了单因
抑制作用大小为 RPV 修饰的紫杉醇与五味子乙素脂质 素实验，以包封率为指标，对胆固醇含量、紫杉醇含量、
体＞紫杉醇与五味子乙素脂质体＞RPV 修饰的空白脂 探头超声时间间隔和温度进行了考察，确定了各因素的
质体。与 RPV 修饰的空白脂质体组[细胞侵袭率为 重要程度及优化区间，为本研究的Box-Behnken设计-响
（106.00±5.57）％]比较，紫杉醇与五味子乙素脂质体组 应面法奠定了基础。在本研究中，根据 Box-Behnken 设
和 RPV 修饰的紫杉醇与五味子乙素脂质体组细胞的侵 计-响应面法优选出的处方工艺为磷脂 44 mg、胆固醇 8
袭率[分别为（26.44±3.93）％、（9.21±1.77）％]均显著降 mg、紫杉醇 0.64 mg、五味子乙素 1.5 mg、处方量 5 mL、

中国药房 2021年第32卷第10期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10 ·1179 ·