Page 84 - 《中国药房》2021年8期

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for the content determination of related substances in belinstat. METHODS：
HPLC method was adopted and the principal component self-control comparison method with correction factor was used to calculate
the contents of related substances. The determination was performed on ODS-AM column with 1.02％ potassium dihydrogen
phosphate buffer（pH value adjusted to 3.5 with phosphoric acid）-acetonitrile（85 ∶ 15，V/V）as mobile phase A，1.02％ potassium
dihydrogen phosphate buffer （pH value adjusted to 3.5 with phosphoric acid）-acetonitrile （30 ∶ 70，V/V） as mobile phase B
（gradient elution），at the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was set at 30 ℃，and the detection wavelength was
220 nm. The sample size was 10 μL. RESULTS：The linear ranges of belinstat and impurities A，D，F，G，H were 0.113-1.693，
0.050-1.496，0.117-1.750，0.098-1.471，0.120-1.799，0.100-1.506 μ g/mL （r≥0.999 7）. The correction factors of the last 5
impurities were 1.0，1.0，1.2，1.5，1.0；the detection limits were 0.250，0.590，0.490，0.600，0.500 ng，respectively. The
quantification limits were 0.500，1.170，0.980，1.200，1.000 ng，respectively. The recoveries were 90.18％ -111.48％ （RSD＝
1.52％ -4.78％ ，n＝9）. RSDs of stability （100 h） and precision tests were no more than 16％ ，and the durability was good.
Impurities A，D and H were detected in 3 batches of belinlestat，the contents were 0.030％ -0.038％ ，0.019％ -0.022％ and
0.012％-0.013％，respectively. The contents of other maximum monomer impurities were 0.012％-0.013％ and the total impurities
were 0.075％-0.084％. Impurities B，C，F，G were not detected. CONCLUSIONS：The method for the content determination of
related substances in belinstat has been successfully established，and the method is accurate and specific.
KEYWORDS Belinostat；Related substances；HPLC；Principal component self-control comparison method with correction factor

贝林司他（结构式见图1）是一种组蛋白去乙酰化酶 新增或含量出现增长的杂质列为降解杂质。有关物质
（HDAC）抑制剂，由美国 Spectrum Technologies 公司和 是药品质量研究的关键项目之一，其含量高低是反映药
丹麦 TopoTarget 公司联合研发生产，主要用于治疗复发 品纯度的直接指标。有研究指出，对药品的纯度要求，
性或难治性外周T细胞淋巴瘤（PTCL） [1－5] 。贝林司他于 应基于安全性和生产实际情况两方面的考虑 。基于
[18]
2009年被授予孤儿药地位，用于治疗PTCL；2013 年，贝 此，本研究采用高效液相色谱法（HPLC）联合加校正因
林司他的 PTCL 二期临床结果超过预期值，其新药申请 子的主成分自身对照法针对贝林司他生产及贮藏中可
于 2014 年 2 月 6 日被美国 FDA 受理，并于 2014 年 7 月 3 能引入的7种杂质进行定性分析，考虑到杂质对照品的
日通过审批获准上市。目前，在国内已有盛世泰科生物 可获得性仅对其中5种杂质进行定量分析，以期能将各
医药技术（苏州）有限公司和石药控股集团有限公司对 杂质及主成分有效分离，并为贝林司他的质量控制提供
[6]
其进行仿制药临床申报 。 参考。
1 材料
1.1 主要仪器
图1 贝林司他的结构式 本研究所用主要仪器包括 e2695 型 HPLC 仪（美国
Fig 1 Structure chart of belinostat Waters公司）、XP205型电子分析天平（瑞士Mettler Tole-

临床前体外药效学研究显示，贝林司他对各种 do公司）等。
HDAC的抑制作用较好，其不仅能够提高组蛋白的乙酰 1.2 主要药品与试剂
化水平，还能够促进细胞凋亡；更重要的是，贝林司他可 贝林司他原料药（批号 171201、180101、180102，纯
优先杀伤肿瘤细胞而非正常细胞，并可抑制纳摩尔浓度 度≥99％）、杂质 A 对照品（批号 140813，纯度 99.3％）、
HDAC 的活性 [7－11] 。毒性研究显示，贝林司他有一定的 杂质 B 对照品（批号 140810，纯度 99.5％）、杂质 C 对照
毒性，但是相对于该药给复发性、难治性淋巴瘤患者带 品（批号 140822，纯度 99.4％）、杂质 D 对照品（批号
来的临床获益，这些毒性反应是可以接受的 [12－14] 。此 140801，纯度 99.9％）、杂质 F 对照品（批号 140806，纯度
外，贝林司他用于治疗卵巢癌、胸腺上皮癌、骨髓异常增 99.1％）、杂质G对照品（批号150416，纯度99.5％）、杂质
生症、恶性腹膜间皮瘤等其他肿瘤的二期临床试验研究 H对照品（批号140903，纯度98.6％）均由深圳万乐药业
结果均显示，其具有较好的疗效 [14－17] 。由此可见，贝林 有限公司提供；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水
司他的临床使用前景良好。 为纯化水。
有关物质主要是在生产过程中带入的起始原料、中 2 方法与结果
间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物 2.1 色谱条件
等，其中生产过程中带入的列为工艺杂质，贮藏过程中 以 ODS-AM（250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以

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